猪圆环病毒2型病毒样颗粒的制备及免疫原性评价

旨在利用原核表达系统在大肠杆菌中制备出猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP),用改良的镍亲和层析法纯化并在小鼠体内评价其免疫原性。通过PCR方法从发病猪中扩增出PCV2的ORF2序列,对其全长进行密码子优化并交由公司合成重组质粒pET-32a-yCap;以BL21(DE3)为表达菌株,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE与Western blot对Cap蛋白的表达方式及抗原特异性进行鉴定;利用改良的镍亲和层析法纯化带有His-Tag标签的重组蛋白;利用透射电镜观察所纯化的载体融合蛋白能否形成VLP;用自制的VLP疫苗与PCV2灭活疫苗(ZJ/C株)分别免疫小鼠,利用商业化PCV2 IgG抗体ELISA检测试剂盒评价其免疫原性。结果显示,成功得到PCV2 ORF2序列和重组质粒pET-32a-yCap,重组质粒在大肠杆菌中主要以可溶性蛋白形式表达,蛋白大小为47 kDa;经镍亲和层析法纯化可得到单一的目的蛋白;重组Cap蛋白能与PCV2多克隆抗体及HRP标记的6*His, His-Tag小鼠单克隆抗体发生特异性结合;经过磷钨酸负染色的蛋白悬液在透射电镜下可观察到大量规则的、直...     

日本无刺楤木促成芽营养成分的比较研究

以日本无刺楤木(Aralia elatavar.inerm is)休眠枝条离体茎段促生芽为试验材料,对芽体内可溶性蛋白、维生素C和可溶性糖含量进行了比较分析。试验分为5个处理组:不同茎段长度的产芽试验、不同茎段直径的产芽试验、不同茎段年龄的产芽试验,相同茎段不同营养条件下的产芽试验和同一茎段不同芽位的产芽试验。结果表明:(1)离体茎段长度为20 cm时,促生芽可溶性蛋白含量和维生素C含量最高,与其他长度处理差异极显著,可溶性糖含量差异不显著。(2)不同培养条件下,芽体内的3种营养成分差异均不显著。(3)不同直径处理组中,芽体内3种营养成分含量均存在极显著差异。直径为5.8 mm时可溶性蛋白和维生纱C含量最高,直径为8.8 mm时可溶性糖含量最高。(4)2年生茎段促生芽的可溶性蛋白、维生素C和可溶性糖含量均高于1年生茎段。(5)同一茎段不同芽位的促生芽,以下位芽3种营养成分含量为最高。     

杨木-玻璃纤维复合板的物理力学复合效应

以三倍体毛白杨和玻璃纤维为主要原料，研制出三种不同组合形式的木材玻璃纤维复合板并分析了板的物理力学复合效应。结果表明：与普通PF树脂杨木刨花板相比，该复合板的密度、抗弯强度、抗弯弹性模量得到很大提高，内结合强度略有降低，吸水厚度膨胀率有增有减。     

西部干旱半干旱地区生态建设中的造林问题

1999年6月,正当人类社会迎接新世纪到来的时候,党中央、国务院作出了实施西部大开发的重大战略决策,吹响了向实现我国现代化建设进军的战斗号角。为了这一宏伟工程的启动和实施,各方面的专家、学者在各种宣传媒体上发表了许多颇有见地的意见,使人深受启发,笔者此次应邀参加西部大开发笔谈,为有机会回顾过去、瞻望未来,感到十分欣慰。本文主要针对西北干旱半干旱地区生态环境建设中的造林问题提出一些不成熟的看法和建议。     

东江中上游紫色红壤水土保持林树种选择试验

在东江中上游特定的气候条件和特定的紫色红壤上，开展了水土保持林树种选择试验。初步选择出具有固氮改土能力的肯氏相思、绢毛相思和大叶相思作为严重水土流失紫色红壤地区的先锋树种；选择了慢生的伴生树种红锥和海南红豆；在辅以人工施肥的情况下，选择了速生树种桃金娘科的尾叶桉和红胶木。在先锋、速生和慢生树种，以及乔、灌、草相互结合的技术措施指导下，营造的水土保持示范林取得了较为理想的保持水土效果。     

牛至油对断奶仔猪小肠形态、细胞因子含量及紧密连接蛋白mRNA表达的影响

将120头25日龄断奶的“大白×长白”二元杂交仔猪按公母各半、体质量相近的原则随机分为4组,每组3个重复,每个重复10头猪,分别饲喂添加0,300,500,800 mg/kg牛至油的基础日粮,试验期为30 d,测定小肠形态、小肠组织细胞因子和SIgA含量及肠道紧密连接相关基因mRNA表达。结果显示,不同质量浓度的牛至油对小肠各段绒毛高度与隐窝深度的比值均有一定提高,并且在空肠与回肠结果中500 mg/kg牛至油组与对照组相比有显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01);各小肠段细胞因子、SIgA都有所提高,只是显著性不同;肠道紧密连接基因相对表达量都有增加,特别是500 mg/kg牛至油组在各段小肠中与对照组存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,日粮中添加牛至油可以改善断奶仔猪小肠形态结构及其功能,促进仔猪肠道健康。     

用于筛选植物PGIP的酵母双杂交PGase诱饵载体

对真菌抗性较强的植物能利用自身的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(po lyga lacturonase-inh ib iting prote in,PG IP)来抑制真菌分泌的、降解植物细胞壁的主要物质——多聚半乳糖醛酸酶(po lyga lacturonase,PG ase)的活性.目前,快速、有效的获取植物PG IP的方法是通过酵母双杂交技术来进行的,而这首先要获得真菌PG ase的酵母诱饵载体.以真菌——互格链格孢PG ase的cDNA的为基础,将其克隆到M ATCHM AKER L exA Tw o-Hybrid System的诱饵载体中,并将诱饵载体(pL exA-PG ase)成功转化酵母菌株EGY 478[p8op-lacZ],经检测无自激活作用,可直接用于快速、大量地筛选植物PG IP.     

油桐生物素羧基载体蛋白编码基因VfBCCP的克隆与表达分析

油桐(Vernicia fordii)属于大戟科(Euphorbiaceae)油桐属植物,原产于我国,是世界上著名的木本工业油料树种.其种子榨出的桐油是品质最好的天然干性油之一.桐油具有干燥快、抗酸碱、耐冷热、防腐蚀等特性,作为重要的工业用油广泛应用于制造涂料、高级油墨、增塑剂、医药以及化学试剂等行业(黄挺,2001;Brown et al.,2005).同时油桐作为生物柴油原料树种具有良好的应用前景(钱能志等,2007;Shang et al.,2010;Chen et al.,2010).在油桐种子生长发育过程中,7月为桐油的缓慢形成期,7月底到9月初为桐油的迅速累积期,而9月初至10月中旬为桐油累积完成期(王汉涛等,1985).     

白桦钙调蛋白基因CaM的分离及其转录表达

钙调蛋白(CaM)是生物细胞内的重要调控蛋白,参与调节细胞内一系列酶的活性及各项生命活动.应用RACE和RT-PCR技术克隆了白桦的钙调蛋白基因CaM的全长cDNA,该基因长631 bp,开放阅读框(ORF)为450 bp,编码149个氨基酸,预测编码蛋白的相对分子质量为16.85 kDa,理论等电点为4.11,经过对...     

目标群落、景观格局与“距离”——森林活力评价的新视角

森林不但是一种水平格局上的镶嵌景观,而且其内部群落具有一定的垂直结构.传统的森林活力或生态评价只注重其中一方面.选择"目标群落"作为参照基准,计算与被评估群落"距离"的思想,为建立跨尺度、多要素的森林活力评价方法提供了契机.新的森林活力评价方法最初由Dvaid Parkes提出,Helmut进一步完善并使之系统化.笔者以石林世界公园的四种森林植被类型为研究对象,遵循"目标群落""距离"评价思想,建立了群落和景现尺度上的评价项目及其对应的计算指标,并努力结合两个尺度上的计算指标进行评价.