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我国与CIMMYT小麦穿梭育种取得重大进展 总被引:1,自引:0,他引:1
我国与CIMMYT小麦穿梭育种取得重大进展中国农业科学院作物育种栽培研究所庞家智70年代初期,我国已经和CIMMYT(国际玉米小麦改良中心)开展了材料、信息变换工作,通过不同途径获得了CIMMYT的高产、半矮秆、抗病材料,经过各地的栽培试种,有目的地... 相似文献
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广宿主稳定表达载体pQMV和pGMP的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
以Eschedchia coli高效表达载体pET-29a为基础,将广宿主载体pUCP19中稳定的假单胞菌(Pseudomonas)质粒DNA复制子和自行分离克隆的荧光假单胞菌(P.fluorescens)P303组成型表达启动子PP303插入其中,分别获得了重组载体pQMV(4.6kb)和pGMP(5.6kb)。它们均含有假单胞菌和大肠杆菌复制子、荧光假单胞菌内源强启动子,以及包含8~11个限制性内切酶多克隆酶切位点;此外,载体pGMP还含有绿色荧光蛋白基因gfp作为辅助检测标记。连续培养和继代培养测定,这两种载体在荧光假单胞菌中的稳定性均为100%(120h)。 相似文献
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为了解腺病毒穿梭载体介导NcSAG1基因在293细胞中的表达情况,本试验应用PCR技术扩增牛源新孢子虫NcSAG1基因,构建pMD-18T-NcSAG1克隆质粒和腺病毒重组穿梭质粒pCR259-NcSAG1,将鉴定正确的pCR259-NcSAG1重组质粒转染293细胞,应用免疫荧光试验(IFA)和Western blot技术检测pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中的表达。结果显示:扩增的牛源新孢子虫NcSAG1基因长度为982 bp,与GenBank中发表的NcSAG1(AF132217)核苷酸序列同源性为99%,IFA检测构建的pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中得到瞬时表达,Western blot分析表达蛋白的分子量为33 ku,具有较好的反应原性。本试验为NcSAG1腺病毒载体疫苗的构建奠定了基础。 相似文献
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采用PCR方法从噬菌体PhiX174基因组中扩增出裂解蛋白E基因,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出核酸酶A基因(SN),通过15个柔性氨基酸linker将双基因串联,插入PBV220表达载体,构建温控双基因裂解系统(DLS)。PCR扩增DLS,将其与E.coli-App穿梭载体pMC-Express相连,构建重组穿梭载体pMC-WK。裂解试验表明,E-15aalinker-SN裂解较E裂解迅速而彻底,菌体裂解率达到99.999 4%;经PCR扩增出的DLS具有裂解活性。本试验成功构建了温控双基因裂解载体pMC-WK,为App菌影疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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