绿脓杆菌外毒素A与人组蛋白H4嵌合蛋白基因克隆及其原核表达载体的构建

设计引物以pCDPT2质粒(含PEA全序列)为模板亚克隆获得PEA功能区Ⅰa及功能区Ⅱ基因片段(1100 bp); 提取人染色体DNA作为模板,利用一对设计引物扩增获得了人组蛋白H4基因片段(316 bp);将两基因片段连接,构建了融合基因中间载体pMD-18T-PEA-H4;融合基因经NcoⅠ及XhoⅠ酶切,以正确阅读框架插入相同酶切的pET-28A中,经酶切分析及PCR扩增检测,筛选到阳性克隆,其质粒测序结果表明成功地构建了毒性基因缺失的PEA与人组蛋白H4融合基因的原核表达载体,为进一步表达并获得大量的融合蛋白奠定了基础。     

济源双汇确认17头瘦肉精生猪

2011年3月20日,据河南省济源市畜牧局透露,此前济源双汇食品公司发现的19头瘦肉精疑似阳性生猪,目前17头已经得到确认,剩余2头排除。瘦肉精事件经媒体曝光后,济源双汇食品有限     

疑似猪肉毒梭菌中毒的诊断与防治

1.发病情况2011年2月25日9时许,笔者接到辖区某养殖场电话,称场内有7头约150~200kg的种公猪突然得病,其中1头已死,另1头病重,疑似某重大动物疫病所致,要求协助诊断治疗。     

雏鸡绿脓杆菌病的诊治

1 发病情况 积石镇个体鸡场7月10日饲养的2000只AA商品代雏鸡，小鸡5周龄内生长基本正常，第6周时陆续发生小部分小鸡畏寒，呆立，呼吸困难，拉带白色的绿色粪便，并出现成批死亡。曾多次对鸡群用0．03％痢特灵拌料饲喂，并按每公斤体重2万IU肌肉注射庆大霉素，每天2次，连用2天，用药1～3天后，病鸡死亡数明显减少，停药后又重新暴发，再次或反复用药效果差。经诊断为鸡绿脓杆菌病，选用敏感药物卡那霉素、庆大霉素治疗，并配以肌肉注射绿脓杆菌灭活苗，l周后鸡只死亡逐渐减少，半月后鸡群恢复正常。从第6周发病到第9周共死亡鸡只420只，死亡率达21％。     

绿脓杆菌外毒素A的纯化

用绿脓杆菌ＰＡ１０３株接种于ＴＳＡ甘油培养基３２℃培养，产生绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ），经流水透析除盐、ＤＥ－５２纤维素阶段洗脱、硫酸铵分级沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５除盐、ＤＥ－５２纤维素梯度洗脱、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００分子筛层析，纯化了绿脓杆菌外毒素Ａ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，纯化后的毒素为单一蛋白带，分子量约６６０００；对普通小鼠ＬＤ５０为０．２４μｇ蛋白。用ＰＥＡ抗血清作免疫印迹分析，进一步证实纯化的蛋白为ＰＥＡ，毒素约纯化了５００倍，总蛋白回收率约０．０２４％，毒素回收率约１１％。     

珍珠鸡绿脓杆菌病的诊治

2001年7月,临沂市一养殖户饲养的21日龄珍珠鸡600只相继发生绿脓杆菌感染,死亡168只,死亡率28%.现报告如下.     

二氢杨梅素和土霉素体外抑菌作用的比较试验

二氢杨梅素(dihydromyricetin，DMY)——3，5，7，3’，4’，5’-六羟基2，3双氢黄酮，为二氢黄酮醇类化合物。熊大胜等(2000)和熊皓平(2002)体外抑菌试验表明，DMY对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、青霉菌及黑曲霉菌等16种细菌均有一定抑菌作用。其中对大肠杆菌的MIC为0．125％；对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的MIC均为0．0625％。