刺激经穴诱导大鼠发情抑制的试验观察

本试验利用发情抑制大鼠模型作为评估参照，通过阴道冲洗液涂片检查及病理学观察，就三阴交穴电脉冲刺激对大鼠发情状况的诱导作用进行了探索研究。实验发现，电脉冲刺激可诱发大鼠动情周期紊乱和发情抑制；而激素诱导配合电脉冲刺激则可抑制激素诱导性发情抑制的加剧，减轻卵巢不可复性损伤之程度。结果表明，相关经穴电脉冲刺激对大鼠发情状态存在明显影响，且这种影响作用存在双向性     

兔卵母细胞的孤雌激活

从电脉冲次数、脉冲强度、脉冲间隔时间三方面对兔卵母细胞的孤雌激活进行了研究。结果表明，注射HCG后16h的MⅡ期卵，用1．4kV／cm、60μs的直流脉冲电激，脉冲次数分为1、2、4、8次4组，每次间隔30min，随着电激活次数的增加，活化率从46．5％增加到95．8％(P＜0．01)，但是电激活8次后，桑椹胚率却从63．6％下降列21．2％，囊胚率从23．6％下降列2．8％(P＜0．01)；用60μs的直流脉冲电激3次，每次间隔30min，分为0．4、1．2、2．4kV／cm3组，以1．2kV／cm脉冲强度的兔卵母细胞激活较为理想，脉冲强度增加到2．4kV／cm时，卵细胞死亡率升为67．1％(P＜0．01)。用1．4kV／cm、60μs的直流脉冲电激3次，电脉冲间隔时间分为30、120、240min3组，卵细胞活化率分别为68．6％、91．5％、91．9％（p＜0．01)。     

整合质粒对苏云金芽胞杆菌转化的研究

苏云金芽胞杆菌(Bt)是一种革兰氏阳性菌,可产生具有杀虫活性的伴胞晶体蛋白,作为一种全球性生物农药广泛应用于农林害虫的防治.电脉冲法是细菌质粒转化中比较常用的一种方法,特别是在革兰氏阳性菌以及很多用常规方法不能转化的细胞,用电脉冲法可以成功转化[1].所以,电脉冲法目前已作为一种高效、简便和省时的方法,被用于Bt的遗传改良中.     

马铃薯prp1-1启动子的克隆及转基因研究

采用PCR技术，从云南马铃薯叶片DNA中分离克隆到了马铃薯病程相关蛋白（prpl-1)基因启动子，与国外文献报道序列完全一致。将这一启动子亚克隆到中间载体pUC18中，再构建到植物表达载体pBI121上，以取代其原有的CaMV35S启动子，得到重组植物表达载体pBI121M；用电脉冲法将pBI121M转入农杆菌LBA4404。应用农杆菌介导法，将携带有pBI121M重组质粒的农杆菌转化烟草，经卡那霉素筛选，得到了一批转基因植株。转基因植株的PCR鉴定表明，启动子整合到了烟草植株基因组中。本研究为下一步通过X－Glu染色法检测启动子下GUS基因的表达情况，研究该启动子的病原菌特异性诱导活性，并建立新的植物转基因系统奠定了基础。     

将重组质粒高效导入农杆菌的电脉冲转化研究

利用电脉冲法将重组质粒PBI121/α-PAP导入农杆菌LBA4404,获得3.5×106转化子/μ g质粒DNA的转化效率.探讨了不同电激条件及农杆菌细胞生长状态对转化率的影响.结果表明,农杆菌LBA4404电脉冲转化的最适电激条件为电场强度18kv/cm,电容25μF,电阻200Ω;农杆菌最适细胞生长状态为OD600＝0.4～0.5.在一定范围DNA浓度与转化率成正比关系.     

生命信息仪处理番茄种子后的生物学效应研究

用生命信息仪产生的弱电脉冲处理浸种后的佳粉１５番茄种子,观察了处理对番茄生长发育的生物学效应。结果表明：经处理的番茄具有出苗早、出苗齐及出苗率高等特点,定植后处理幼苗生长明显优于对照,最终处理小区产量坐果数和单果重均增加而产生明显增产效果;不同剂量处理结果显示,以处理６０ｍｉｎ增加最显著,４５ｍｉｎ次之,而处理７５ｍｉｎ产最反而有所降低。因此适当剂量的处理能够增强番茄种子活力而促进增产。     

电脉冲激活对体外成熟猪卵母细胞卵裂率和囊胚率的影响

探索了电脉冲结合细胞松驰素B(CB)、放线菌酮(CHX)以及6-二甲基嘌呤(DMAP)等化学物质,对猪卵母细胞激活后发育的影响.在电脉冲激活时,0.6 kV/cm和1.3 kY/cm,80μs,1次电激活后,(1)用2 mmol/LDMAP处理6 h的卵裂率分别为(60.39±6.71)%和(60.35±8.95)%,差异不显著(P＞0.05),囊胚率分别为(9.51±5.93)%和(14.53±3.38)%,差异显著(P＜0.05);(2)用7.5μg/mL CB+10μg/mL CHX处理6 h的孤雌胚,卵裂率[(1.82±10.76)%vs(58.50±8.33%)]和囊胚率(8.91±4.37)%vs(14.53±3.38)%]均存在显著差异(P＜0.05).卵母细胞经1.3 kV/cm、80μs和单次电脉冲激活后,分别用7.5μg/mL CB、10μg/mL CHX、2 mmol/L DMAP、7.5μg/mL CB+10μg/mLCHX和7.5μg/mLCB+2 mmol/LDMAP处理2～8 h,结果表明CB处理4 h,CHX、CB+CHX和CB+DMAP处理6 h,DMAP处理8 h的卵裂率和囊胚率高于其它时间处理组.在电脉冲/CB、CHX、DMAP、CB+CHX和CB+DMAP 5种激活方法中,CB+CHX和CB+PMAP的卵裂率和囊胚率分别为(78.46±8.46)%、(33.13±7.84)%和(75.84±10.61)%、(39.12±7.15)%,囊胚率显著高于其它各组(P＜0.05).     

海栖热袍菌电转化技术的研究

[目的]对海栖热袍菌电转化技术进行研究。[方法]采用不同参数即不同的方型电脉冲参数、指数衰退型电脉冲参数和高电压电击参数对海栖热袍菌感受态细胞进行电转化,得到的转化子进行PCR验证。[结果]试验中发现以150 V的低压方形电脉冲,室温厌氧条件下电击25 ms、1次,有利于T.maritima MS8的转化,但这种以整合质粒进行的转化效率极低。[结论]为提高T.maritima MS8的基因转化效率奠定了基础。