猪胚胎冷冻技术的研究历程与未来展望

本文论述了近年来国内外猪胚胎冷冻技术的研究历程,分析了玻璃化冷冻技术在猪胚胎冷冻实际应用中存在的问题。结合发现的问题和最新的研究进展,从玻璃化冷冻剂的改良、玻璃化冷冻流程的优化、玻璃化冷冻与多组学研究等3个方面对猪胚胎冷冻技术的研究进行展望,以期为猪胚胎冷冻技术的创新提供理论依据。     

林木组培快繁技术中常见问题及对策

针对林木组培快繁过程中经常出现的污染、褐化及玻璃化问题的产生原因和控制措施进行了综述,为今后林木组培快繁研究提供技术参考,同时也为开展新品种苗木组培的科研和生产提供理论基础和实践指导。     

Comparative Effects of Porcine Oocytes Vitrified at the GV and MⅡ Stages

This study was designed to compare the efficiency of porcine oocytes vitrified at the GV and MⅡ stages. The vitrified GV oocytes were matured in vitro and then evaluated their cortical granule distribution with immunofluorescence, CD9 protein level with Western blotting and zona pellucida dissolution time with pronse digestion method, as compared to vitrified MⅡ oocytes.The results showed that the survival percentages of oocytes vitrified at the GV stage were significantly lower than those vitrified at the MⅡ stage after 2 h of warming (P<0.05);However, there was no difference in maturation rate between vitrified and fresh oocytes (P>0.05). The oocytes vitrified at MⅡ stage resulted in significantly decreased normal cortical granule distribution and CD9 protein level (P<0.05), but no such results were found in vitrified GV oocytes after maturation (P>0.05). In addition, vitrification did not affect the dissolution time of zona pellucida in GV and MⅡ oocytes (P>0.05). The data demonstrated that despite of lower survival rate compared with MⅡ oocytes, vitrified porcine GV oocytes after maturation showed normal polar body extrusion, cortical granule distribution and CD9 protein level.     

玻璃化冷冻对猪卵母细胞超微结构的影响

本研究以GV期和MII期卵母细胞作为试验材料,通过透射电镜方法观察卵母细胞冷冻前后的超微结构变化,结果发现,透射电镜下观察卵母细胞发现,GV期卵母细胞与透明带连接紧密,微绒毛伸入透明带中,皮质区分布大量的线粒体。脂滴分为两种,一种为灰色脂滴,一种为深色脂滴。MII期卵母细胞排出第一极体,质膜下分布大量的皮质颗粒。微绒毛缩短成矮柱状,线粒体常聚集存在,卵周隙出现。冻后GV期卵母细胞微绒毛消失,线粒体肿胀,线粒体内有囊泡样结构,包围脂滴的内质网不完整,胞质内溶解为絮状,未见高尔基体。冻后MII期卵母细胞透明带损伤、微绒毛、细胞膜损伤甚至消失、极少量皮质颗粒分布于皮质区。脂滴部分溶解,相互连接,脂滴周围伴随大量肿胀呈圆形的线粒体,嵴不明显,内呈囊泡样,未见到高尔基复合体结构。     

香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化现象的研究

香石竹红色品种茎尖试管苗继代培养玻璃化现象是香石竹脱毒试管苗生产的一个主要障碍.采用改善光照,在培养中提高糖和琼脂的浓度,降低细胞分裂素的用量,对克服香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化有明显效果,但对一些红色系品种效果并不理想,继代培养玻璃苗率仍达61%以上.     

酸樱桃组培过程中产生玻璃化苗的影响因子

以酸樱桃为研究材料,分析了酸樱桃组培过程中产生玻璃化苗的影响因子.结果表明:在影响酸樱桃组织培养苗玻璃化的4种因素中,蔗糖浓度、pH值、6-BA浓度的影响都达到了0.01水平显著,而琼脂浓度的影响不明显;影响程度的强弱次序为蔗糖浓度＞pH值＞外源6-BA浓度.     

大麻组织培养中玻璃化苗研究初报

玻璃化苗是影响大麻组织培养的一个关键性问题，从激素水平、温度、湿度等方面进行实验。结果表明，湿度是造成大麻玻璃化苗的主要原因，琼脂粉浓度在0．75％～0-8％，使用透气性封12‘膜，分装培养基经过5—8分钟的冷却后封口，可降低培养基含水量及瓶内湿度，从而解决大麻组培中的玻璃化苗问题。     

非洲菊组织培养工厂化育苗关键技术研究

通过正交实验用带有2～3片叶的单芽做外植体,探讨了培养基成分对非洲菊离体培养有效增殖的影响,结果表明:MS+BA1 0mg·L-1+NAA0 1mg·L-1+蔗糖40g·L-1是有效增殖的适宜培养基,其有效增殖系数达8～9,且丛生芽的生长势健壮,叶片叶绿素含量高。同时对增殖丛生芽中玻璃化苗的生理状况进行了分析,结果表明:玻璃化试管苗叶片的叶绿素a和叶绿素b含量以及干重/鲜重显著低于正常苗叶片,但叶绿素a/b值差异不显著。KT促进非洲菊增殖的活力比BA弱,增殖系数达3～4,但10mg·L-1的KT形成的丛生芽健壮,叶片舒展,叶绿素含量高。因此,可用BA与KT进行一定轮次的更换使用;活性炭的加入,极大地抑制了非洲菊试管苗增殖;增殖培养基中增加琼脂用量,可有效降低增殖苗的玻璃化程度,但增殖周期延长5～8d。     

科苑荟萃

云南水牛的同期发情、超数排卵和胚胎移植试验；无角道塞特绵羊超数排卵技术研究；胚胎移植技术在云南半细毛羊上的应用研究；受体品种、体重及移植季节对杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊体重的影响；波尔山羊胚胎徒手分割试验；波尔山羊胚胎回收和移植器械研制与应用；OPS法玻璃化冷冻绵羊胚胎的移植效果观察；影响绵羊、山羊超数排卵及胚胎移植效果因素分析；安胎散提高羊胚胎移植受胎率及其机理的研究；[编者按]     

卵丘细胞和细胞骨架稳定剂对绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻的影响

[目的]为了提高绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻的效果。[方法]以未冷冻的卵母细胞为对照,研究卵丘细胞存在与否以及不同浓度的细胞骨架稳定剂对绵羊成熟卵母细胞冷冻保存的影响。[结果]卵丘细胞存在与否对绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻没有影响。在所有细胞松弛素B处理组中,用7.5、10.0μg/ml细胞松弛素B处理的绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻后获得较高的囊胚率(P<0.05),分别为8.1%、7.8%;在所有紫杉醇处理组中,用0.5μmol/L紫杉醇处理的绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻后获得的囊胚率最高为10.1%(P<0.05)。[结论]细胞骨架稳定剂细胞松弛素B或紫杉醇可以提高绵羊成熟卵母细胞的玻璃化冷冻效果。