PRRS病毒核衣壳蛋白基因的原核表达

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计1对引物，用RT—PCR扩增出美洲型PRRSV的核衣完蛋白(N)基因，克隆到pGEM—Teasy载体中，再亚克隆到表达载体pGEX—6p—1谷既甘肽—S—转移酶(GST)基因的下游。重组质粒转化大肠杆菌BL21，用IPTG于37℃条件下诱导，经SDS—PAGE和Western blotting分析，GST—N融合蛋白的分子质量约为39．5ku，另3种不同大小的GST—N降解产物，分子质量分别为33．0、30．5和27．5ku，其中39．5和30．5ku的降解产物分别占菌体蛋白的30．9％和15．3％。结果表明：PRRSV核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中以GST融合蛋白的形式得到高效表达，且表达产物能与PRRSV抗体阳性的猪血清发生特异性反应，可作为PRRS诊断抗原。     

用RT—PCR对湖北省部分猪场繁殖与呼吸综合症的检测

猪繁殖与呼吸综合症 (ｐｏｒｃｉｎｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅａｎｄｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＰＲＲＳ)是目前危害世界养猪业的主要疾病之一 ,能引起母猪严重繁殖障碍及各种年龄的猪出现呼吸道症状 ,育肥猪发病率高、发病后生长缓慢、饲料报酬低、康复猪可长期带毒并排毒。自 1 987年美国首次报道以来 ,世界上很多国家都相继报道 ,并分离到该病毒 ,ＰＲＲＳ已成为国际上危害养猪业最严重的传染病之一。该病病原为ＰＲＲＳ病毒 (ｐｏｒｃｉｎｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅａｎｄｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｖｉｒ…     

2006～2012年猪繁殖与呼吸综合征病毒东北毒株GP5和M基因变异分析

分离鉴定三株中国东北地区PRRSV,对其主要结构蛋白GP5和M基因RT-PCR扩增和测序,同时对2006～2012年东北地区PRRSV毒株进行遗传变异分析.结果表明,三株东北地区PRRSV分离株均属于美洲型高致病性毒株,JilinTN2株和HH12株可能由JXA1变异而来,GP5基因变异较大,而M基因相对保守;一些氨基酸变异会改变GP5和M蛋白的二级结构;GP5蛋白中和表位Q40和L41的突变和诱骗表位L28的新突变在2011和2012年黑龙江省PRRSV毒株中被发现,33～37 aa处氨基酸的变异对潜在糖基化位点的数量和位置影响较大,可能会干扰中和抗体对紧随其后的中和表位识别,减少病毒中和抗体应答;GP5中PRRSV毒力关键住点的新突变在2012年分离株中被发现.文章揭示东北地区PRRSV流行毒株GP5基因的变异特征,PRRSV仍在不断发生变异,需针对GP5基因变异采取相应防控措施.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白单克隆抗体制备与鉴定

根据NSP9非结构蛋白参数选取相应30 bp DNA片段,片段串联后人工合成并连接p ET-28a(+)载体,大肠杆菌BL21中表达得到可溶蛋白,镍柱亲和层析纯化后免疫Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞骨髓瘤细胞融合。细胞融合后利用间接ELISA法杂交瘤细胞阳性克隆筛选,2次亚克隆后共获得3株抗PRRSV NSP9单克隆抗体,命名为3B17、3J13、3F19。这3株单抗可与大肠杆菌表达的蛋白产物和PRRSV感染的Marc-145细胞发生特异性反应。在PRRSV感染的Marc-145细胞中,NSP9蛋白表达水平接毒后不断升高,48 h达最高,为深入研究NSP9功能奠定基础。     

河南地区NADC30-like PRRSV毒株的增殖特性与遗传进化分析

为研究河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特点和遗传变异情况,采集河南省滑县地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场中的病料,经研磨、稀释、离心处理后将悬液上清接种于原代猪肺泡巨噬细胞,进行病毒分离培养,结果显示,PAM出现典型细胞病变效应,将得到的分离株命名为HNhx。应用PRRSV N蛋白的特异抗体进行间接免疫荧光(IFA)试验,结果表明,接种HNhx分离株的PAM出现特异性荧光,证明该分离株为PRRSV。应用RT-PCR技术对Nsp2区进行扩增分析,根据扩增目的产物大小推测HNhx分离株为NADC30-like毒株。遗传分析发现,与其他参考毒株相比,HNhx毒株的ORF3、ORF4和ORF5基因与NADC30毒株的同源性最高。基于ORF3、ORF4和ORF5序列构建进化树,系统进化分析的结果表明,HNhx归于NADC30-like亚群。     

广西某猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是20世纪80年代后期发现的一种新的高度传染性的疾病,临床上以母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍及仔猪呼吸道症状、死亡率高为主要特征.该病自1987年在美国发现以来,至今已蔓延至世界所有养猪国家,给养猪业带来巨大的经济损失.     

猪繁殖与呼吸综合征对塞内卡病毒灭活苗免疫效果的影响

为探究猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)对塞内卡病毒(SVA)灭活疫苗免疫效果的影响,对PRRS阳性猪和PRRS阴性猪分别免疫相同批次、相同剂量的SVA灭活苗,检测首次免疫后7 d、14 d、21 d、28 d血清中和抗体效价,并在免疫后28 d对所有试验猪进行攻毒保护试验。结果显示,所有PRRS阳性猪的SVA血清中和抗体效价均小于1∶4,而PRRS阴性猪SVA血清中和抗体效价在二免后上升到较高水平。攻毒保护结果与中和抗体效价结果呈正相关,PRRS阳性组0/5保护,而PRRS阴性组试验猪达到5/5保护。这一研究表明PRRS会使SVA灭活疫苗免疫效果下降,为SVA及PRRS疫苗的研发及猪场疾病的防控提供了参考。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病的临床诊断和防治措施

我国是生猪养殖和猪肉消费大国,但由于猪病泛滥严重威胁生猪生产,制约着生猪产业的正常发展,高效推动对病猪诊治变得十分有意义.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病是常见猪病,一旦发病,会引起猪群大面积感染,导致猪大面积死亡.近年来,关于蓝耳病引起猪大面积感染死亡的报道不绝于耳,给养殖户造成了巨大的经济损失.本文通过分析高致病性猪繁...     

猪繁殖与呼吸综合征的防治

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),俗称猪蓝耳病,是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的急性传染病.主要是以厌食、发热,妊娠母猪发生早产、流产、死胎、产木乃伊胎,新生仔猪死亡率高,仔猪和育肥猪的呼吸道症状为特征,全世界很多国家广泛发生,目前已形成严重危害世界养猪业的重要传染病之一.     

猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）及其诊断与防治技术（下）

四、病理变化1.死胎及出生后不久的弱仔猪,可见颌下、颈下和腋下水肿,呈胶胨样。2.仔猪和育肥猪体表淋巴结肿胀,仔猪胸腹腔内有暗红色积液。