新常态下猪流感的流行病学、诊断、防控新趋势

猪流感(Swineinfluenza,SI)是由正黏病毒科A型流感病毒属的猪流感病毒(Swineinfluenzavirus,SIV)引起的一种猪的急性、高度接触传染性的群发性猪呼吸道疾病。猪流感具有很强传染性,而且发病比较急,给养猪业造成很大的危害和经济损失,H1N1和H3N2是当前猪流行的最主要的两种血清亚型病毒。猪流感病毒也可感染人类,使人类的生命健康受到了极大的威胁。文章通过分析猪流感的流行病学、诊断、流感疫苗研究进展,并且总结相应的防控新措施。以期引起人们对该病的高度重视,从而建立有效的防疫措施,以减少猪流感给养殖者造成的危害和经济损失。     

H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体IPMA检测方法的建立

本试验旨在建立一种针对检测抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验（immunoperoxidase monolayer assay,IPMA）筛选方法。通过优化MDCK细胞接毒量、细胞接毒后培养时间、封闭液的种类和工作浓度、工作时间等各个反应条件,并对建立的IPMA筛选方法的特异性、敏感性和重复性进行评价。结果显示,建立的IPMA检测方法的最优反应条件为MDCK细胞接毒10^2.63 TCID₅₀/100 μL H1N1亚型猪流感病毒,37℃培养24 h,含3‰ H₂O₂的甲醇室温固定15 min,5%脱脂乳37℃封闭2 h,50 μL杂交瘤细胞上清作为一抗,37℃孵育2 h,羊抗鼠HRP-IgG二抗37℃孵育1 h。所建立的IPMA方法能特异性地检测H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪瘟病毒（CSFV）阳性血清不发生交叉反应;其敏感性检测结果显示,可检测1：3 200的HI=2^-9标准H1N1猪阳性血清;批间和批内重复性试验结果较好。综上所述,本试验成功建立了抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的IPMA检测方法,该方法特异性强、敏感性高、重复性好,为生产鉴定H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体提供了一种简便、实用、有效的检测手段。     

再谈猪流感

提起猪流感可谓是老生常谈,可是近年来猪流感的发生却连年不断,时而竞成为疫病流行的罪魁祸首。由于猪流感易发性强,一旦发病迅速蔓延。发病猪体质下降,抵抗能力降低,继而并发多种疾病,导致病情更为复杂,给养猪业带来很大的安全隐患、因此正确认识猪流感对猪病防治工作有着重要意义。     

A型猪流感病毒TaqMan探针荧光RT-PCR检测方法的建立

根据A型猪流感病毒(SIV)的基质蛋白(M)编码基因保守序列设计合成一对特异性引物和一条Taq Man探针,建立了一种检测A型SIV的荧光RT-PCR方法。结果显示,该方法对H1N1、H3N2和H9N2亚型SIV均呈特异性扩增,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒等猪的其他常见病毒无交叉扩增反应;该方法对M基因RNA对照(SIV-M-RNA)的最适线性检测范围为3.8×10~1~3.8×10~8拷贝数/反应,标准曲线方程为Y=-3.4365X+40.091,相关系数(R~2)为0.999 8,最低检出限为38个拷贝数的SIV-M-RNA。对3个不同浓度(3.8×10~3~3.8×10~5 copies/μL)的SIV-M-RNA进行组间和组内重复试验,每个浓度的Ct值变异系数均小于1.5%,具有良好的重现性。用该方法对860份进口猪的鼻拭子样本和78份国内猪场猪鼻拭子样本进行SIV检测,结果进口猪鼻拭子样本的SIV检测均为阴性,17份国内猪场猪鼻拭子样本SIV检测为阳性。本研究提供了一种快速、敏感和特异的A型猪流感病毒检测方法。     

重组欧洲禽源H1N1亚型猪流感病毒疫苗株的构建及免疫保护效力

以国内欧洲禽源H1N1亚型猪流感病毒流行株A/swine/Shanghai/1/2014(H1N1)(SH1)为材料,RT-PCR扩增HA和NA基因并将其克隆至PBD载体中,构建HA和NA基因的重组质粒。将HA和NA基因重组质粒及来源于流感病毒高产株PR8的6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M和NS)重组质粒共转染293T细胞,从而成功构建了重组欧洲禽源H1N1亚型猪流感病毒疫苗株SH/PR8。以相同病毒剂量接种MDCK细胞,检测不同时间点的血凝效价,绘制病毒生长曲线,结果表明,重组病毒SH/PR8相对于原始野生株SH1在MDCK细胞上具有更高的病毒滴度。重组病毒SH/PR8制备的灭活疫苗经过一免和二免小鼠后,检测血清中血凝抑制抗体、中和抗体和IgG抗体,结果显示首免后抗体效价持续升高,4周后抗体效价达到峰值。小鼠攻毒试验结果表明,免疫组体质量下降不明显且未出现死亡,而非免疫组小鼠体质量持续下降并且于攻毒后6d小鼠出现100%死亡。肺脏组织病毒含量滴定以及组织病理学观察结果显示,免疫组能够有效抑制SH1病毒在肺脏中的复制,减轻肺脏病理变化。总之,本研究表明重组SH/PR8疫苗候选株相对于原始毒株SH1在MDCK细胞上具有更高的复制能力,制备的重组灭活疫苗能够诱导机体产生高水平的抗体,能够针对欧洲禽源H1N1亚型猪流感病毒的攻击提供很好的免疫保护。     

猪流行性感冒的诊断与防治

<正>猪流行性感冒,是猪的一种急性、传染性呼吸器官疾病。其特征为突发、咳嗽、呼吸困难、发热及迅速转归。猪流感是猪体内因病毒引起的呼吸系统疾病。临床特点是突然发生,很快感染全群,体温升高、咳嗽和呼吸道症状。一般可自愈,如果在发病期管理不当,则易发生支气管炎、肺炎、胸膜炎,猪嗜血杆菌(混合感染)等,增加猪的病死率,加重病情引起死亡。因此加强对该病的预防与控制对提高养殖经济效益有十分重要的意义。     

春季常见猪病及综合防控措施

<正>春季是猪病多发季节,且多为混合感染,发病后不易治愈。最常见的有猪瘟、猪肺疫、猪流感、大肠杆菌病、仔猪副伤寒等。1猪瘟猪瘟仍是当前危害养猪生产的罪魁祸首,但临床表现非典型化占据主流。猪瘟又叫烂肠瘟,是由猪瘟病毒引     

猪流感大面积爆发后需重视猪各类猪呼吸道病的继发

在猪流感大面积爆发后需特别重视猪各类猪呼吸道病的继发,常见的继发呼吸道病比较多,如副猪嗜血杆菌（HIS）、猪萎缩性鼻炎、胸膜肺炎放线杆菌（APP）、猪肺炎链球菌（SS）、多杀性巴氏杆菌（Pm）、     

猪流感及其防制措施

<正>今年4月以来,黑西哥、美国等国家的人发生了甲型H1N1流感疫情,世界卫生组织已宣布此疫情为"具有国际影响的公共卫生紧急事态",引起了全球高度关注,对养猪业及其产品市场也带来了一定的影响。为保证我国养猪业的健康持续平稳发展,有必要     

猪流感的诊断与防治

2009年冬季,静乐县不断有养殖户（场）来电话反映其猪群突然发病,停食或减食、高烧、呼吸异常,用常规的青链霉素、安乃近有效,停药后易复发,病程短者3～4d,长者超过10d。经兽医建议使用强效阿莫西林、柴胡、金刚呼喉霸针分开肌肉注射后,病程短者基本痊愈,