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【目的】克隆小峰熊蜂(Bombus hypocrita)可溶型海藻糖酶基因(soluble trehalase,Tre-1)全长cDNA序列,预测该基因及其编码蛋白的理化性质,明确该基因在小峰熊蜂不同组织及不同发育时期的表达特性,为研究该基因在小峰熊蜂生长发育中的生物学功能奠定基础。【方法】根据地熊蜂(B. terrestris)和B. impatiens可溶型海藻糖酶基因Tre-1编码蛋白的保守区序列,利用Primer Premier 5.0设计简并引物扩增得到小峰熊蜂保守区片段;随后根据该片段设计基因特异性引物,用RACE方法获得5'端和3'端片段。在此基础上,根据RACE扩增所得片段和保守序列,预测开放阅读框(ORF)序列,分别在起始密码子近5'端和终止密码子的近3'端设计ORF区特异性引物扩增得到ORF,最后采用BioEdit软件比对、拼接获得小峰熊蜂Tre-1 cDNA全长序列。运用ExPASy、SignalP 4.1、NetOGlyc 1.0 sever、ClustalW和MEGA 5.0等软件对该基因进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR技术,采用2-ΔΔCt方法检测不同组织及不同发育时期可溶型海藻糖酶基因的相对表达量。【结果】克隆所得基因cDNA全长为3 129 bp,命名为BhTre-1(GenBank登录号:KJ025078),其中包含5'端441 bp非编码区和3'端945 bp非编码区,ORF为1 743 bp,共编码580个氨基酸。其编码的蛋白预测分子质量为67.16 kD,等电点为5.95;有1个信号肽结构(1-21位),1个甘氨酸富集区(GGGGEY),2个特色“标签序列”(PGGRFKEFYYWDSY和QWDFPNAWPP),6个Asn-Xaa-Ser/Thr(N-X-S/T)序列,无跨膜区。序列分析发现BhTre-1氨基酸序列与地熊蜂BtTre-1和B. impatiens BiTre-1的一致性很高,分别为99%和98%,与西方蜜蜂(Apis mellifera)和云南小蜜蜂(A. florea)的Tre-1一致性也达到78%;系统发育分析也表明BhTre-1与BtTre-1、BiTre-1的亲缘关系最近,与AmTre-1、AfTre-1之间的亲缘关系次之。基因定量分析结果显示BhTre-1在成虫被检测的各组织中均有表达,在中肠的表达量最高,其次是马氏管,其他各组织表达量较低。成年工蜂的BhTre-1表达量高于幼虫和蛹,工蜂出房后随着龄期的增加表达量呈现先升高后降低的规律,在第15天表达量最高。【结论】克隆得到了BhTre-1全长cDNA序列,其分子生物学特性与其他昆虫Tre-1相似,该基因在小峰熊蜂中肠表达量最高,此外,幼虫和蛹的表达量低于成年工蜂,工蜂出房后表达量呈现先升高后降低的趋势,为进一步研究该基因在小峰熊蜂体内的生物学功能奠定了基础。 相似文献
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[目的]分析熊蜂在河西高海拔冷凉区日光温室番茄上的授粉行为及对营养品质的影响。[方法]以koppert熊蜂为材料,观察熊蜂日活动规律,确定其适宜活动的温室温湿度;比较分析生产中常用的熊蜂授粉、振荡器授粉和蘸花授粉3种授粉方式对日光温室番茄产量、品质及效益的影响。[结果]熊蜂授粉和震荡授粉对温室番茄的坐果和产量影响不明显,但可显著降低畸裂果率,提高果实可溶性固形物、可溶性糖、有机酸、V_C含量;熊蜂授粉较蘸花授粉减少生产投入52.4%,震荡授粉较蘸花授粉减少生产投入34.9%。[结论]在人工紧缺或条件适宜的地区,可推广使用熊蜂授粉和震荡授粉技术。 相似文献
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2011年12月底,在第七届世界草莓大会草莓博览园里,万只荷兰熊蜂正在帮助草莓授粉。它们"解放"了往常忙着猫腰点花授粉的工人,还带来了果实数量、品质的提升。黄黑色相间的荷兰熊蜂比普通蜜蜂个头儿大两倍,"这些荷兰籍的小家伙儿可是好帮手!"第七届 相似文献
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[本刊讯]8月28日至9月10日,英国自然历史博物馆昆虫系熊蜂专家Paul Williams博士到中国农业科学院蜜蜂所访问,并就中国熊蜂多样性及其分布特性、基于形态学和DNA条形码方法修订Mg亚属熊蜂等内容进行合作研究。 相似文献
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熊蜂(Bombus spp )是膜翅目蜜蜂总科熊蜂属昆虫,分布于北半球,温带地区较多.欧洲和亚洲约有170多种,我国约有80多种,全国各地均有分布,北部和西部较多. 相似文献