二种胡蜂前溶血肽原基因在昆虫杆状病毒系统中的表达

构建亚非马蜂和额斑黄胡蜂前溶血肽原基因的重组供体质粒pBacHT-PhPPM和pBacHT-VmPPM,转化到穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中,得重组穿梭载体Bacmid-PhPPM和Bacmid-VmPPM,再用Lipofectin介导其DNA转染粉纹夜蛾细胞系Tn-5B1-4,最后观察细胞表达时相动态.经ELISA法证实,胞内表达产物具有良好的抗原性,证明二种重组病毒Bacmid-PhPPM和Bacmid-VmPPM已在昆虫细胞中得到了表达.     

Characteristics of Microencapsulated Nutritional Oil for Infant Formula Food

Nutritional oil for infant formula food was microencapsulated by the spray drying method with coating materials including maltodextrin （MD）, soy protein isolate （SPI）, and emulsifier （soy lecithin）. Vegetable oil blend was prepared by mixing coconut oil, safflower oil and soybean oil at a ratio to achieve a fatty acid profile comparable to human milk fat （HMF）. The fatty acid composition of the product was determined by capillary gas chromatograph. As a result, the composition was as close as possible to that of HMF, it could be used for infant fomular food to make up some deficiencies of milk powder in nutrition and functional properties. Furthermore, the glass transition temperature （Tg） of the wall material was determined by DSC and its Tg was 66.42℃. It provided a theoretical basis for the storage of the product at the normal temperature.     

凡纳滨对虾CTNNBL1基因克隆及表达分析

[目的]明确CTNNBL1基因在凡纳滨对虾抗病过程中的功能作用,为深入探讨对虾抗病免疫机制提供参考依据.[方法]采用RACE-PCR克隆凡纳滨对虾CTNNBL1基因(LvCTNNBL1),利用在线软件进行生物信息学分析,并进一步分析其组织表达特征及应答白斑综合征病毒(WSSV)和副溶血弧菌感染的表达模式.[结果]LvCTNNBL1基因cDNA全长1906bp,其中开放阅读框(ORE)长1692 bp,编码563个氨基酸,含有1个CTNNBL结构域.同源性分析发现LvCTNNBL1蛋白与大型溞(Daphnia magna)同源蛋白的相似度最高,为77%.基于CTNNBL1基因序列的系统发育进化分析结果显示,凡纳滨对虾被聚为无脊椎动物一类,与同为节肢动物的大型溞、西方蜜蜂(Apis mellifera)和美洲鲎(Limulus polyphemus)的亲缘关系较近.LvC TNNB L1基因在凡纳滨对虾中呈组成型表达,以在肠道中的表达量最高、表皮中的表达量最低.注射感染WSSV后,LvC TNNB L1基因在凡纳滨对虾血细胞中的表达量呈先下降后上升趋势,在所有检测时间点与对照组间存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01,下同)差异;注射感染副溶血弧菌后,LvCTNNBL1基因在凡纳滨对虾血细胞中的表达量呈先上升后下降趋势,感染后12h内较对照组极显著升高.[结论]LvCTNNBL1基因表达量在病毒和细菌感染时发生明显变化,可能参与了凡纳滨对虾的抗病免疫途径.     

基于氧化石墨烯生物免疫传感器检测副溶血弧菌的研究

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是最为严重的水产动物致病菌之一,准确即时的检测手段是预防控制该菌传播的关键所在.通过量子点(QDs)标记副溶血弧菌鞭毛蛋白抗体(Ab),利用生物免疫传感器技术实现副溶血弧菌的快速、特异性检测.结果显示,QDs-Ab的荧光通过加入氧化石墨烯(G0)产生淬灭,构建了捕获目标细菌的探针,氧化石墨烯最适淬灭浓度为60 ng/ml.细菌捕获探针中加入副溶血弧菌后,能够检测到重新恢复强度的绿色荧光.副溶血弧菌的检出限达到104 CFU/mL.针对副溶血弧菌设计的生物免疫传感器的特异性,选取灿烂弧菌、溶藻胶弧菌、迟缓爱德华氏菌和嗜水气单胞菌作为对照,结果显示,对照组不能明显引起荧光强度的改变,而试验组却能显著提高荧光强度.该研究建立的基于荧光能量共振转移(FRET)的具有高灵敏度和特异性的生物传感器检测方法在细菌的早期诊断中有良好的应用潜质.     

凡纳滨对虾WDS基因克隆及其表达分析

[目的]分析WDS基因在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)各组织中的表达情况及应对不同病原感染时的表达变化,以揭示WDS在动物体除生殖外其他生理活动中的功能作用.[方法]采用RACE-PCR克隆凡纳滨对虾WDS基因(LvWDS)cDNA序列,利用在线生物信息学软件进行序列分析,并以实时荧光定量PCR分析LvWDS基因在凡纳滨对虾不同组织中的表达情况及不同病原感染后的表达变化.[结果]LvWDS基因(GenBank登录号MH330316)cDNA序列全长1880 bp,其中,开放阅读框(ORF)978 bp,5'端非编码区(5'UTR)183 bp,3'端非编码区(3'UTR)719 bp,编码325个氨基酸.LvWDS氨基酸序列含有7个WD40重复序列(保守结构域),与拟穴青蟹(Scylla paramamosain)WDS氨基酸序列的相似性最高,为99%,基于WDS氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示LvWDS与拟穴青蟹WDS的亲缘关系最近.LvWDS基因在凡纳滨对虾精囊中的相对表达量最高,在血细胞、鳃和肠道等免疫组织中处于较高表达水平,在肌肉组织中的表达水平最低.经白斑综合症病毒(WSSV)和副溶血弧菌(Vib-rio parahaemolyticus)感染后,凡纳滨对虾血细胞、鳃和肠道组织中LvWDS基因的相对表达量均不同程度发生变化.[结论]WDS进化十分保守,其在不同物种中的功能稳定.LvWDS除了在凡纳滨对虾生殖发育中发挥重要作用外,可能还与免疫相关,在凡纳滨对虾抗病免疫中发挥作用.     

牡蛎养殖过程中副溶血弧菌与水质因子间的关系

为了研究牡蛎养殖过程中副溶血弧菌与水质因子之间的关系,2009年3月到11月从广东阳西某牡蛎养殖场采集牡蛎样品检测其副溶血弧菌的感染情况,并检测水体温度、盐度、pH和溶解氧。实验结果表明：副溶血弧菌总量的检出率为94.38%。水温和副溶血弧菌总量呈正相关,盐度和副溶血弧菌总量呈负相关,pH和溶解氧与副溶血弧菌总量的相关性不明显。对水温和盐度与副溶血弧菌总量的对数进行回归分析,水温和副溶血弧菌浓度的拟合回归方程为：lgVP= 0.093?T-0.685(R₂=0.336);盐度和副溶血弧菌浓度的拟合回归方程为：lgVP=1.199 0.116?S-0.004?S₂(R₂=0.217);水温和盐度对副溶血弧菌浓度的拟合回归方程为：lgVP=-1.941 0.116?T 0.058?S-0.001?S₂(R₂=0.414)。研究结果可为牡蛎养殖过程中副溶血弧菌的风险分析提供参考依据。     

日粮补充甘油和卵磷脂对褐壳蛋鸡产蛋量和营养物质消化率的影响

试验旨在研究日粮补充粗甘油(GLYC)和卵磷脂对23~51周龄褐壳蛋鸡产蛋量、蛋品质和营养成分的全消化道表观存留率(TTAR)的影响。试验采用完全随机和2×3因子设计,两个水平粗甘油(0、70 g·kg-1)和3个水平卵磷脂比率(400,2020and 040 g·kg-1),共分为6个处理。每个处理8个重复,每个重复10只鸡。生产记录按重复每28 d记录和累加一次。对于整个试验,在日粮中补充GLYC阻碍了每kg鸡蛋的饲料转化率(2.071、2.039,P<0.05),但并没有影响到其他生产或蛋品质等。由卵磷脂代替动物脂肪(400,2020和040 g·kg-1)增加了蛋重(分别为60.1、60.7、61.8 g,P<0.001)和产蛋总重(分别为56.8、57.5、58.8g·d-1,P<0.01),改善了由DSM比色卡测得的蛋黄颜色(分别为9.2、9.2、9.5,P<0.001)和料蛋比(分别为2.072、2.068、2.027,P<0.05)。而采食量、产蛋量、体增重并没有受到影响。在日粮中加入GLYC并不影响养分保持,但卵磷脂的添加提高了干物质TTAR(P<0.05)、有机物(P<0.05)、粗脂肪(P<0.001)和总能量(P<0.001)。补充甘油70 g·kg-1饲料阻碍了每kg鸡蛋的饲料转化率,但并没有影响到其他生产性能或消化率特性。卵磷脂替代动物脂肪能提高蛋重,改善蛋黄颜色和营养物质消化率。因此,卵磷脂可以作为蛋鸡日粮的脂肪来源,有利于蛋鸡生产。     

鸡血样的采集要求和方法

1血液采集要求(1)空腹采血;(2)采血后,将采样编号用标签纸/胶布标注于相应的采血管上,及时将血液(置于采血管中或小试管中)45度角斜放,静置处理30min～1h,然后再迅速送实验室检测;(3)溶血样本将严重干扰检测结果,因此样本溶血者作不合格处理,需重新采血;(4)检测数量必须有一定要求才能反映群体特性,每群     

新生仔猪溶血症的中西医防治

新生仔猪溶血症是指新生仔猪吃初乳后引起的红细胞溶解的一种急性、血管内溶血性疾病。患病仔猪以贫血、黄疸和血红蛋白尿为主要特征,死亡率可达100%。该病的实质是由于母猪血清抗体与新生仔猪红细胞抗原不合,而引起的一种同种免疫溶血性反应的病理过程,是母猪血清和初乳中存在抗仔猪红细胞抗原的特异血型抗体所致的疾病。