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从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
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检验花木种子的质量,通常采用标准发芽法。但需时较长,通常为20~28天,而对于许多具有休眠特性的种子来说,需要的时间就更长了。可是在生产中,常常需要在很短时期内(1~3天)及时了解种子质量,特别是一些难以贮藏的花木种子,如九里香、山茶、铁线莲、报春、文殊兰、朱顶红、鸢尾、鹤望兰等,通常是随采随播,更需及时了解质量。为解决这一难题,目前国内针对不同的花木种子,有如下几种快速测定法。 相似文献
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前言 我国经济快速发展,群众收入大幅增加。对营养和健康的关心要求猪肉的质量不断提高。消费需求的变化,促进了猪种改良。商品猪生产,从一洋一土发展到二洋一土的三元杂种瘦肉猪,有经济实力和技术条件的经营者,步子加快,发展更高档次的“杜长大”三洋种瘦肉猪。实践结果,充分证明“杜长大”三洋猪生长快(日增重800克)、耗料省(料肉比3:1以下)、瘦肉率高(62%以上)、效益好(每头100至200元),促进了“杜长大”三洋猪在我国的快速发展。 相似文献
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高效液相色谱法测定复方磺胺嘧啶各组分含量 总被引:1,自引:0,他引:1
采用高效液相色谱法测定复方磺胺嘧啶各组分含量,用ODS(十八烷基硅烷键合硅胶)为填充剂,水-乙腈-三乙胺(300:150:2.0, v/v,用磷酸调pH值为3.0)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长280nm,进样量6μl。该制剂各组分磺胺嘧啶钠、磺胺对甲氧嘧啶钠、磺胺甲噁唑钠、甲氧苄胺嘧啶的含量与峰面积的相关系数分别为:0.9999、0.9999、0.9999、0.9997;平均回收率分别为:99.9%、99.8%、100.1%、99.8%。该方法分离效果好,准确可靠,适用于产品的质量控制。 相似文献
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