龙须藤茎皮甲醇提取物生物活性初探

龙须藤Bauhinia championii在医用方面已证实具有良好的抗菌、消炎作用,但其在农用方面的活性研究还鲜有报道。本研究分别采用菌丝生长速率法和种子生物测定法,首次测定龙须藤茎皮甲醇提取物及分离组分对6种农业有害真菌和单、双子叶两种植物的生物活性。结果表明,龙须藤甲醇浸提物对水稻稻瘟病菌Magnaporthe oryzae有一定的抑制效果,对油菜Brassica napus和稗草Echinochloa crusgalli的根芽均没有抑制作用。但其甲醇浸提物中分离的大部分组分对供试病原菌和植物的根芽都表现出一定抑制作用。杀菌活性方面:10号组分对西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum和番茄早疫病菌Alternaria solani的抑制效果最好,抑制率分别达到80.0%和78.0%,除草活性方面:1～3号组分对油菜根的抑制率较高,达到50%以上,2号组分对稗草根的抑制效果最好,达到68%。可见,龙须藤茎皮提取物中含有具有良好杀菌活性和除草活性的物质。     

温度胁迫下沙葱萤叶甲小热激蛋白基因GdHsp20.6的克隆及表达分析

为明确小热激蛋白在沙葱萤叶甲Galeruca daurica应对温度胁迫中的作用,采用PCR方法克隆沙葱萤叶甲小热激蛋白基因Hsp20（GdHsp20.6）完整的开放阅读框（open reading frame,ORF）序列,应用在线软件对GdHsp20.6基因进行生物信息学分析,通过原核表达技术诱导表达及纯化其编码蛋白,并通过实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）技术分析不同温度胁迫下GdHsp20.6基因的表达量。结果显示,GdHsp20.6基因ORF序列长度为543 bp,编码180个氨基酸,预测分子量为20.6 kD,无跨膜区和信号肽。GdHsp20.6氨基酸序列有高度保守的α-结构域。GdHsp20.6氨基酸序列与其它鞘翅目昆虫的Hsp20氨基酸序列有较高的一致性,其中与花绒寄甲Dastarcus helophoroides的Hsp20.99氨基酸序列的一致性最高,为63%。GdHsp20.6基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）细胞系中成功表达,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG）诱导后GdHsp20.6蛋白成功表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和Western-blot分析表明融合蛋白大小与预测大小一致,并纯化获得了纯度较高的目的蛋白GdHsp20.6。低温（-10~5℃）和高温（35~40℃）处理1 h以及处理后25℃恢复30 min均能诱导GdHsp20.6基因表达上调,并且0℃处理30~120 min也能诱导GdHsp20.6基因表达上调。表明GdHsp20.6基因在沙葱萤叶甲应对低温和高温胁迫中可能起着重要作用。     

无苦味茶叶提取物加工技术研究

研究了外源单宁酶对绿茶品质成分的酶解特性、酶解条件优化及其酶解液在微滤澄清工艺中的效应.结果表明,根据绿茶粗滤液中酯型儿茶素的含量添加相应活性单位的外源单宁酶,在40℃酶解2 h,主要苦味成分酯型儿茶素能够有效地降解为简单儿茶素,达到提取物的无苦味,并且酶解液中的氨基酸、茶多酚、咖啡碱、水浸出物等品质成分的得率依次增加5.56%,6.18%,11.17%,3.53%.微滤澄清工艺对外源单宁酶加工无苦味茶叶提取物在工效、产品得率方面具有协同增效的作用,可作为外源单宁酶加工无苦味茶叶提取物的配套技术.     

青鳞鱼鱼肉提取物在加热过程中的性质研究

本文以青鳞鱼鱼肉为原料,采有冷水法和酶水解法制备提取物并对其在加热过程中的性质进行了研究。结果表明：①青鳞鱼鱼肉蛋白含量为68．3-71％且水溶性蛋白与水不溶性蛋白之比约为2：9;②酶水解法提取物非蛋白氮约为其总氮的50％．而冷水法提取物则为41．5％;③酶水解法提取物在50℃、60℃、70℃、80℃和90℃的温度条件下加热2h后．颜色明显加深,同时产生大量的呈香物质。但常规成分基本无变化;而冷水法提取物在同样的温度条件下,其颜色、滋味等感官特性变化不明显,但常规成分变化却明显;④提取物水溶性蛋白的变性温度为60—70℃,70—90℃时提取物总氮大部分是非蛋白氮。青鳞鱼提取物在加热过程中的这些性质为其加工和利用提供了重要的理论依据。     

杜仲对草鱼生长及成鱼肌肉成份影响试验

正杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)是我国特有树种,在传统医学中,有补肝肾、强筋骨、除酸痛功能。随着杜仲产品的开发,其作为中草药饲料添加剂在畜禽及水产饲料中已有一定应用。本文以草鱼鱼种及成鱼为研究对象,通过在饲料中添加杜仲叶及其提取物,考察对草鱼生长及成鱼肌肉成份的影响。1材料与方法1.1试验设计与试验饲料     

洋葱提取物抗氧化作用的研究

绿色饲料添加剂是当前研究的方向,本实验以红皮洋葱为原料,研究其抗氧化作用。用95%乙醇作溶剂,通过微波辅助法提取洋葱精油,料液比为1∶5,微波功率160W,微波时间160s,微波处理之后浸泡2h,浸泡温度55℃,抽滤后减压旋转蒸发除去溶剂得洋葱精油。然后将其加入猪油和花生油中,添加浓度分别为0、0.07%、0.1%、0.2%和对照组0.05%的BHT(二叔丁基羟基甲苯)。采用烘箱贮藏法,以过氧化值(POV)和酸价(AV)为指标研究其对猪油和花生油的抗氧化作用。结果表明:洋葱提取物对猪油和花生油有一定的抗氧化作用,且具有剂量关系。     

29种天然植物提取物对指环虫杀灭作用的研究

利用金鱼、鲢、鲤、草鱼、欧洲鳗鲡所寄生的坏鳃指环虫、中型指环虫、鲢指环虫、伸展指环虫、拟指环虫为材料,建立以金鱼为寄主、中型指环虫为指示虫的杀虫药物筛选动物模型,使寄生感染率达100%。利用该模型对29种天然植物提取物进行杀虫活性筛选。结果表明:银杏外种皮、博落回、小果博落回、鸦胆子、云南重楼、杠柳、槟榔、陈皮最高杀虫率在48 h内均达70%以上,且对鱼安全性较高;刺五加、细柱五加、商陆、乌头、松针、藁本、青蒿、辣蓼、苦参对指环虫有一定的杀灭作用,杀虫率在20%~40%之间;荆芥、山奈、葫芦巴、萹蓄、芫花、马钱子、肉豆蔻、马兜铃、直立百部、千年健、常山、北乌头在实验浓度内对指环虫没有明显的杀灭作用。其中,银杏外种皮、博落回、小果博落回杀灭活性最强,使用浓度较低,该实验条件下杀灭率100%;鸦胆子、槟榔对鱼最为安全,但杀虫浓度较高。     

海洋贝类提取物对血管平滑肌细胞增殖的影响

采用20％胎牛血清（FBS），碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)所诱导的大鼠VSMCs增殖模型，观察了海洋贝类提取物（ESs)对血管平滑肌细胞（VSMCs)增殖的影响。将培养的5－8代细胞接种于96孔板，除正常组加入含0．4％FBS的M199培养液外，其他组均加入含20％FBS培养液（或含50ng/ml bFGF的0．4％FBS培养液），同时给药组分别加入含有25，50，100μl/ml浓度的ESs，孵育48h后，以细胞计数，结晶紫染色及MTT比色法VSMCc生长情况。结果表明，与模型组比较，ESs各剂量组VSMCs的增殖受到明显抑制（P＜0．05，P＜0．01）。ESs对20％FBS和bFGF所致的VSMCs增殖具有明显抑制作用，并存在剂量依赖关系。     

饲料中添加酵母提取物对凡纳滨对虾免疫相关基因表达及抗菌机能的影响

为了评估饲料中添加酵母提取物对凡纳滨对虾免疫灵敏性和平衡性的相关基因表达的影响,以鱼粉含量为24.5%的基础饲料(对照组)及在基础饲料中添加2.5%酵母提取物的实验饲料,分别饲喂凡纳滨对虾56 d,检测两种饲料投喂的对虾在急性感染溶藻弧菌前后鳃组织Toll受体、IM D和溶菌酶mRNA表达量变化及感染后的对虾死亡情况。结果表明:摄食添加酵母提取物饲料的凡纳滨对虾鳃组织中Toll受体mRNA和溶菌酶mRNA表达量均显著高于对照组对虾(P0.05),IMD mRNA表达量与对照组无显著性差异(P0.05)。急性感染溶藻弧菌后,两组对虾鳃组织Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量随感染进程均出现显著变化,Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量峰值出现的时间分别为24、42和36 h,且摄食添加酵母提取物组对虾各基因的表达量峰值分别为对照组峰值的201.06%、481.46%和276.77%,均显著高于对照组对虾(P0.05)。摄食添加酵母提取物饲料组对虾鳃组织中Toll受体和IM D mRNA表达量在感染溶藻弧菌后12和24 h分别出现显著上调,而对照组对虾鳃组织中Toll受体和IMD mRNA表达量分别在感染弧菌后24和42 h才出现显著上调。两组对虾经溶藻弧菌人工急性感染后72 h内的累积死亡率无显著差异(P0.05)。实验表明,饲料中添加酵母提取物上调了溶藻弧菌感染前凡纳滨对虾Toll受体和溶菌酶mRNA的表达量,提早了溶藻弧菌感染后对虾Toll受体和IMD mRNA表达量上调时间,且增加了对虾Toll受体、IM D和溶菌酶mRNA表达量的峰值,在一定程度上提高了凡纳滨对虾免疫相关基因表达的灵敏性。     

一种酵母提取物应用于金针菇栽培的研究

试验采用单因素完全随机设计,对金针菇生长发育期间喷洒不同稀释比例的酵母提取物溶液,研究酵母提取物对金针菇菌丝生长、抗杂能力、子实体产量及品质等的影响。试验结果表明：1：800～1：1300稀释范围的酵母提取物均能促进金针菇菌丝生长,并能提高和改善金针菇子实体产量与品质,其中以1：950稀释配比效果最佳。