细胞培养及避免细胞污染的方法

1细胞培养1.1细胞传代培养当细胞生长至高密度时,即需分瓶至新的培养瓶中,否则就会影响细胞的生长,甚而引起死亡。一般分瓶的稀释比例为1∶3～1∶6,依细胞种类而异。一般步骤是先去除原培养瓶中旧的培养液,用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤细胞2次,加入0.25%胰酶溶液37℃作用数秒至数分钟（时间依不同细胞而异）后,倒置显微镜下观察,当细胞呈圆粒状时,去掉胰酶溶液,加入适量新鲜培养基,以吸管反复吹打瓶壁数次,使细胞脱离瓶壁,均匀悬浮于培养液中。     

大鼠蛛网膜下腔出血后皮质中VDAC1的表达与神经元凋亡的关系

目的 观察大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后大脑皮质中VDAC1表达和皮质神经元凋亡,以及两者之间的关系,探讨电压依赖性阴离子通道蛋白1(voltage-dependent anion channel1,VDAC1)参与SAH后早期脑损伤的发生机制.方法 将SD大鼠108只按随机数字表法分为假手术组(n=18只)和SAH组(n=90,下设SAH后6、12、36、48、72 h5个时相点,每个时相点18只).采用视交叉前池注血法建立SAH模型,应用RT-PCR、免疫组化和Western blot分别检测大鼠SAH后不同时相点VDAC1在mRNA水平、蛋白质水平的表达变化.凋亡原位末端标记法( Tunel)观察SAH后不同时相点大脑皮质神经元凋亡.结果 大脑皮质中VDAC1表达,无论在mRNA水平,还是在蛋白质水平,在SAH后12 h均明显增加[mRNA(2.40 ±0.19),蛋白(1.14±0.08)],于36 h时表达达最高峰[mRNA( 3.40±0.65),蛋白(1.72±0.22)],于48 h开始下降[mRNA( 1.94±0.30),蛋白(0.97±0.07)],至72 h时基本恢复正常(P＞0.05).TUNEL法检测显示大鼠SAH后12 h,大脑皮质中神经元凋亡细胞数开始增加,36 h达到高峰,之后逐渐降低(P＜0.05),72 h时降至正常(P＞0.05).结论 SAH后不同时间点VDAC1表达水平的动态变化与神经元凋亡发生、发展的时相性是一致的,提示VDAC1可能通过细胞凋亡途径参与SAH后早期脑损伤的病理过程.     

一例犬淋巴瘤的诊断与分析

淋巴瘤又称恶性淋巴瘤或淋巴肉瘤,是指原发于淋巴结和节外组织等处的淋巴细胞及其前体细胞的恶性肿瘤,为犬常见的恶性肿瘤之一。淋巴瘤可发生于各年龄阶段及品种的犬只,但更易于发生在6～12岁的中高龄犬,某些品种的犬发病率较高,但大多数报告显示不同性别患病率无显著差异。该病发病原因可能与遗传因素及动物的生活环境有关。淋巴瘤依据解剖位置可分为:多中心型、前纵隔型、胃     

两种饲料养蚕对比试验

采用裂区设计,通过湖桑32号与蚕桑草养蚕饲料效率,龄中、上蔟、采茧及茧质情况比较,以及鲜茧产量,茧层量的方差分析和新复极差分析,说明蚕桑草营养成份较桑叶差,鲜茧产质量与全桑饲育有显著差异,不宜推广饲育家蚕。     

西藏地区黄牛放线菌病的诊治

正1前言牛放线菌病(Bovine actinomycosis)又称大颌病(Lumpy jaw),是一种多发性、非接触性、化脓性、肉芽肿性的慢性传染病。该病的特征为头、颈、颌下和舌的放线菌肿。本病广泛分布于世界各地,我国也有存在。病原为牛放线菌(Actinomyces bovis),革兰氏阳性、不运动、不形成芽胞杆菌。本病呈散发性发生,尤以2~5岁牛易感。病原存在于污染的土     

雏鸡患禽下消化道毛滴虫病的诊治

2002年8月以来，我门诊陆续一些患病雏鸡，其发病特点为自进雏3日龄左右开始发病，传播迅速，发病率和死亡率高，雏鸡发病越早，死亡率越高；临床表现为精神沉郁、食欲不振、排自绿稀便、逐渐消瘦、衰竭死亡。现将一典型病例报告如下。     

防暑凉茶

<正>(1)乌梅30 g,山楂50 g,甘草5 g,用慢火煨30 min,过滤取汁,凉至60℃以下后加适量蜂蜜饮用。此方有清暑开胃,生津止咳的功效。(2)金银花、菊花、绿茶、甘草各5 g,生石膏3 g,开水浸泡,当茶喝,能清热解毒,消暑止渴。对暑热感冒和咽喉肿痛有疗效。(3)罗汉果1个,大枣5颗,枸杞子5 g,地竹叶3 g,石竹5 g。煮水1杯,60℃下加蜂蜜1匙,即可饮用。每剂煨煮3次。此方有润肺止咳,暑热口渴,润肠通便的功效,对肺热、肺燥咳嗽和百日咳有疗效。     

新常态下禽业新技术及环保问题探析

当下我国禽业养殖的形式正发生着深刻的变革,其由先前的粗放零星分散型放养模式优化为集约化以及规模化的饲养形式,在促进经济发展的过程中,也使环境污染问题日益显现.新的养殖技术的应用在环保问题方面已取得了一定的成就.本次主要探析新常态下的猪舍采食发酵床及鸡粪干燥脱水新技术的应用对环保问题的影响.     

两种检测精子活率方法的比较

精子活率是评价精液品质的一项重要指标,其在光学显微镜下的测定,操作简便、直观,仍为临床常规检查所应用。本试验就精子用伊红-苯胺黑染色法和中性红染色法两种精子活率的测定方法进行比较,以便选择一种快速又准确的方法。1材料与方法1.1材料1.1.1试剂:伊红Y、中性红染液均购自上海试剂三厂。伊红Y染液:用蒸馏水配制,浓度为0.15%;中性红染液:pH7.4PBS缓冲液配制,浓度为0.01%。1.1.2精液的采集和处理:精液采自宁夏隆德县某奶牛场。精液采集后放入37℃的恒温水浴箱内。借助光学显微镜将精液高倍稀释(以在光学显微镜下可以清楚看到精子轮廓…     

农村种茧育中桑叶消毒应注意的几个问题

家蚕微粒子病传染有胚种传染和食下传染。胚种传染可以通过母蛾检测和补正检查得到有效控制。杜绝食下传染途径,在蚕种生产过程中,仅对养蚕环境严加消毒是不够的,