抗菌肽在畜牧生产上的应用研究进展

抗菌肽是一类生物体内产生的具有生物活性的小分子多肽。它能够杀灭细菌和抑制寄生虫、病毒的生长,提高动物的健康水平。本文从提高动物生产性能、改善繁殖性能等方面来说明抗菌肽在畜牧生产上的应用前景广阔。     

根癌农杆菌农杆菌介导抗菌肽基因转化大豆的研究

为利用抗菌肽基因培育转基因大豆抗病材料,采用根癌农杆菌介导法将抗菌肽基因和绿色荧光蛋白基融合因转入大豆胚尖外植体。结果表明,60mg/L的卡那霉素可以对转化植株进行有效的筛选;在共培养时添加200µmol/L乙酰丁香酮有利于抗菌肽基因的转化;在生根培养基中不添加卡那霉素更有利于转化苗的成活。目的基因特异的PCR检测和绿色荧光蛋白表达分析,发现抗菌肽基因已转入大豆,并得到表达。     

抗菌肽Sublancin与黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能调节作用的比较分析

旨在比较研究抗菌肽sublancin与黄芪多糖对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的免疫抑制小鼠的免疫功能的调节作用。试验选取60只4～6周龄健康雌性BALB/c小鼠,随机分为6个处理组。正常对照组:第1—3天,腹腔注射生理盐水;第4—10天,灌胃生理盐水。其余五个处理组:第1—3天,腹腔注射CTX(80mg·kg-1);第4—10天,阴性对照组:灌胃生理盐水;低浓度抗菌肽组:灌胃4.0mg·kg-1抗菌肽sublancin;高浓度抗菌肽组:灌胃8.0mg·kg-1抗菌肽sublancin;黄芪多糖组:灌胃200.0mg·kg-1黄芪多糖;阳性对照组:灌胃10.0mg·kg-1左旋咪唑。所有处理均为每天一次,每次0.2mL。于试验第1天小鼠腹腔注射CTX前、第4天灌胃前和第11天对小鼠进行称重。第11天称重结束后,采集全部小鼠的外周血及脾,检测外周血生理生化指标、CD4+与CD8+数量和脾细胞的细胞因子mRNA表达等指标。结果表明,与正常对照组相比,阴性对照组中小鼠体重、外周血的红细胞、血红蛋白和白细胞含量显著降低(P<0.05),脾IL-2、IL-4和IL-6的基因表达显著降低(P<0.05)。灌胃后,与阴性对照组相比,黄芪多糖组和高浓度sublancin组体重无差异但有升高趋势,说明高浓度sublancin与黄芪多糖对小鼠体重有积极影响;低、高浓度sublancin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠外周血的白细胞含量显著升高(P<0.05);高剂量sublancin组中小鼠外周血的红细胞和血红蛋白显著升高;低、高浓度sublancin和黄芪多糖组中小鼠外周血的CD4+显著升高(P<0.05);低、高浓度sublancin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠外周血的CD8+显著降低(P<0.05);低、高浓度sublancin组中小鼠外周血的CD4+/CD8+细胞显著升高(P<0.05);低、高浓度sublan-cin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠脾IL-4的表达均显著升高(P<0.05);高浓度sublancin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠脾IL-2、IL-6的表达显著升高(P<0.05)。综合上述结果,适宜剂量的抗菌肽sublancin和黄芪多糖均可缓解环磷酰胺造成的免疫抑制。与200.0mg·kg-1黄芪多糖相比,8.0mg·kg-1抗菌肽sublancin对缓解环磷酰胺免疫抑制造成的细胞因子降低的效果更好。     

鸡源抗菌肽的研究进展及展望

阐述抗菌肽的基本特点,归纳鸡源抗菌肽的种类、分布及抗菌作用,并在分析鸡源抗菌肽研究现状的基础上,对抗菌肽研究的理论意义和现实意义进行展望。     

复合抗菌肽对断奶仔猪生长性能及血清细胞因子含量的影响

本试验旨在研究饲粮复合抗菌肽水平对断奶仔猪生长性能及血清细胞因子含量的影响。将90头26日龄的健康杜×长×大三元杂交断奶仔猪按体重相近、公母各占1/2的原则随机分成5组,每组3个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加400 mg/kg黄芪多糖,250、500和1 000 mg/kg的复合抗菌肽,试验期28 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加250、500和1 000 mg/kg复合抗菌肽和400 mg/kg黄芪多糖均能提高断奶仔猪的平均日增重,降低料重比,且1 000 mg/kg复合抗菌肽的效果均优于400 mg/kg黄芪多糖。2)与对照组相比,饲粮中添加250 mg/kg复合抗菌肽显著或极显著提高断奶仔猪血清白介素-2(IL-2)(46和53日龄)、白介素-4(IL-4)(39、46和53日龄)、白介素-6(IL-6)(39、46和53日龄)、干扰素-γ(IFN-γ)(32、39、46和53日龄)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(53日龄)的含量(P0.05或P0.01);在整个试验期间,除饲粮中添加500 mg/kg复合抗菌肽对32日龄断奶仔猪血清IL-2、IL-4含量和饲粮中添加1 000 mg/kg复合抗菌肽对32日龄断奶仔猪血清IL-4含量无显著影响(P0.05)外,饲粮中添加500和1 000 mg/kg复合抗菌肽均显著或极显著提高断奶仔猪血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α含量(P0.05或P0.01),且效果均优于400 mg/kg黄芪多糖。由此可见,饲粮中添加复合抗菌肽能够提高断奶仔猪的生长性能及免疫功能,以添加量为1 000 mg/kg时效果较好。     

抗菌肽产生菌的推理选育及抑菌特性分析

对一株抗菌肽产生菌GL08进行选育,采用紫外诱变结合次级代谢产物抗菌肽作为筛选因子的方法,筛选出一株效价比出发菌株提高30%的突变菌株。将筛选出的高产菌株进行发酵研究,发现其分泌的抗菌肽不仅效价稳定,而且抗菌谱广,对多种革兰氏阳性和阴性菌均有较好的杀菌活性。将此菌发酵产物制成粉末制剂,用不同的温度、pH、蛋白酶和有机溶剂处理,发现其热稳定性好,对不同的pH、蛋白酶和有机溶剂均有一定的耐受性,且在室温可长期储存且效价不变。通过菌种选育和对抗菌肽制剂的特性分析,发现该抗菌肽制剂可有望开发成新型饲料添加剂。     

抗菌肽对鹌鹑生长性能、免疫功能、血清抗氧化功能和肠道发育的影响

【目的】研究饲粮添加抗菌肽对鹌鹑生长性能、免疫功能、血清抗氧化功能和肠道发育的影响。【方法】选取1 200只1日龄健康、体重相近的雌性鹌鹑,随机分为4组,每组4个重复,每个重复75只。对照组饲喂基础饲粮,抗菌肽Ⅰ组饲喂基础饲粮+0.1%抗菌肽、抗菌肽Ⅱ组饲喂基础饲粮+0.2%抗菌肽、抗菌肽Ⅲ组饲喂基础饲粮+0.4%抗菌肽。试验期为35 d,预试期7 d,正试期28 d。【结果】(1)整个试验阶段,抗菌肽Ⅱ组和抗菌肽Ⅲ组平均日增重显著高于对照组（P<0.05）,料重比显著低于对照组（P<0.05）。(2)第21天,与对照组相比,抗菌肽Ⅱ组、抗菌肽Ⅲ组均显著升高了血清新城疫抗体效价水平（P<0.05）;抗菌肽Ⅲ组胸腺指数显著增高（P<0.05）。第35天,与对照组相比,抗菌肽Ⅱ组、抗菌肽Ⅲ组血清新城疫抗体效价水平、胸腺指数、脾脏指数、血清IL-2和IFN-γ含量均显著升高（P<0.05）。(3)第21天和第35天,所有试验组的血清T-SOD活性和T-AOC含量均显著高于对照组（P<0.05）;抗菌肽Ⅱ组、抗菌肽Ⅲ组血清MDA含量显著低于对照组（P<...     

家蚕肠道感染细菌后6种抗菌肽基因表达的变化

【目的】研究感染绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)后,家蚕中肠和脂肪体中6种抗菌肽基因表达的变化,为家蚕肠道免疫研究提供一定的理论依据。【方法】给家蚕喂食感染绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌,以喂生理盐水为对照,利用半定量RT-PCR方法,检测感染不同时间(1,2,4,8,16,24h)后中肠和脂肪体中6种抗菌肽基因表达的变化。【结果】喂食绿脓杆菌1,2h后,中肠中抗菌肽Gloverin2、Lebocin、CecropinB6、CecropinD和Moricin的相对表达量显著上调;喂食金黄色葡萄球菌1,2,4h后,中肠中6种抗菌肽的相对表达量均显著上调。在脂肪体中,感染两种细菌后,仅抗菌肽CecropinD、Moricin和Attacin2相对表达量的变化较为显著。【结论】家蚕在感染不同细菌后所诱导的免疫机制不同。细菌经由口器进入家蚕肠道,可同时引起上皮免疫反应和体液免疫反应。     

农杆菌法将抗菌肽D基因导入蕉柑胚性细胞的研究

用农杆菌介导的方法成功地将抗菌肽D基因导入到蕉柑胚性悬浮细胞，再生芽经PCR、Southern杂交证明抗菌肽D基因已整合到其基因组DNA中，在农杆菌介导的蕉柑胚性悬浮细胞转化过程中，共培养介质中的乙酰丁香酮（As)能显著提高其转化效率，与对照相比，每克悬浮细胞转化后形成的抗卡那霉素细胞团数从0提高到0.75，悬浮细胞与农杆菌共培养时间对转化效率也具有显著影响，共培养1、2、3d后，每克悬浮细胞转化后形成的抗卡那霉素细胞团数分别为0.20、0.75，0。