猪小肠粘膜抗菌肽

目前已经从猪体内发现12种以上不同的抗菌肽,这些抗菌肽具有不同的螺旋结构,分子量相对较小,小于10kDa,但对多种微生物有广谱杀灭作用,对多数革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌以及囊膜病毒有强烈抑制作用。根据抗菌肽前体的基因结构、氨基酸序列特征,可将猪源抗菌肽分为4类：富含保守的胱氨酸防御素（Defensins）超家族、Cathelicidins家族、Cecropins家族和NK-lysin。防御素和Cathelicidin是到目前为止在哺乳动物中所发现的两个最大群体的抗菌肽家族其中猪小肠是生物活性小肽的重要富集区,分子量均在3kDa～10kDa之间。     

抗菌肽在现代兽医临床中的研究及应用前景

迄今为止,已在许多生物中发现300多种内源性抗菌肽,这些抗菌肽除了具有广谱的抗菌活性外,同时还有高效的抗真菌、抗病毒、抗原虫和抗肿瘤活性。因此,抗菌肽的这些功能得到了人们的重视。论文就抗菌肽在兽医方面的研究、临床应用及其前景做一综述。     

水产动物抗菌肽基因异源表达研究进展

综述了近几年的一些研究结果,就水产动物抗菌肽在大肠杆菌、酵母菌、动植物等表达系统中的异源表达以及各自系统的优缺点等进行了阐述。     

天蚕素抗菌肽对817肉杂鸡生长性能及免疫功能的影响

试验旨在研究天蚕素抗菌肽对817肉杂鸡生长性能和免疫功能的影响。选取1日龄817肉杂鸡900羽,随机分为5个处理组（对照组、抗生素组及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组）,每组6个重复,每个重复30羽。对照组饲喂基础日粮,抗生素组在基础日粮中添加150 mg/kg金霉素,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮中添加100、200和300 mg/kg天蚕素抗菌肽,试验期42 d。结果显示,Ⅱ、Ⅲ组能显著提高1~21日龄817肉杂鸡的平均日增重（P<0.05）,显著降低料重比（P<0.05）;显著提高21、42日龄817肉杂鸡的胸腺、法氏囊和脾脏指数（P<0.05）;显著提高42日龄肉杂鸡的ND抗体水平和T淋巴细胞转化率（P<0.05）,表明在日粮中添加天蚕素抗菌肽能提高817肉杂鸡的生长性能和免疫功能,在本试验条件下,适宜的添加量为200 mg/kg。     

重组鸡Cathelicidins类抗菌肽的融合表达及其对金黄色葡萄球菌抗菌活性的研究

Cathelicidins抗菌肽在家禽天然免疫系统中发挥重要作用,本研究将已构建的含Cathelicidins抗菌肽成熟肽的阳性克隆菌株Rosetta(DE3)/pET30-CathL1S、pET30-CathL2S、pET30-CathL3S分别在37℃、1.0 mmol/L IPTG的条件下进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,Cathelicidins成熟肽片段均在大肠杆菌中以融合形式成功表达,表达产物的表观分子质量分别为7、8、7.5 ku。琼脂糖孔穴扩散法检测结果显示,表达产物对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、鸡白痢沙门氏菌C79-13 (Salmonella pullorum)、巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌及绿脓杆菌等供试菌株均有较强的抑制作用,尤其对抗生素耐药菌株有明显的抑制作用。以雏鸡为实验模型研究重组抗菌肽对金黄色葡萄球菌的体内抗菌活性,结果表明,注射中、高剂量CathL-1抗菌肽试验组(5、10 mg/kg),在试验结束后取肝脏组织匀浆液涂布于TMP平板,未分离到葡萄球菌。各抗菌肽试验组平均增重均高于感染对照组,其中低剂量抗菌肽试验组(2.5 mg/kg)体内抑菌效果虽与普通抗生素相当,但其增重效果尤为明显。     

虎纹蛙皮肤组织cDNA文库的构建及抗菌肽基因tigerinin-HRs的克隆

运用SMART技术成功构建了虎纹蛙(Hoplobatrachus rugulosus)皮肤组织全长cDNA文库。根据蛙科动物抗菌肽的信号肽保守序列设计简并引物,以PCR法成功从文库中随机挑选的阳性克隆中筛选出2个抗菌肽cDNA序列,命名为tigerinin-HR1和tigerinin-HR2。这2个抗菌肽cDNA序列是首次从虎纹蛙皮肤组织中克隆出的抗菌肽编码基因。     

饲粮中添加抗菌肽对肉鸭增重及血清尿素氮、总蛋白水平的影响

240只1日龄肉鸭随机成分4组,每组设3个重复,对照组用基础日粮,试验组在基础日粮上每千克分别添加1、2、3mL抗菌肽制剂。结果显示:1)2、3mL/kg添加量组增重效果显著(P<0.05),3mL/kg添加量组最佳;净肉率升高,达到显著水平(P<0.05),其中主要是胸肌率上升;腹脂率降低但差异不显著(P>0.05);料重比无显著变化(P>0.05)。2)血清总蛋白浓度差异不显著(P>0.05),但尿素氮浓度下降,2、3mL/kg添加量组达显著水平(P<0.05),3mL/kg添加量组最低。     

抗菌肽对断奶仔猪生长性能、腹泻率、抗氧化性及免疫功能的影响

试验研究不同剂量抗菌肽对断奶仔猪生长性能、腹泻率、抗氧化性和免疫功能的影响.选择120头断奶仔猪,随机分为4组(A组、B组、C组、D组),每组3个重复,每个重复10头仔猪.试验各组分别在基础日粮中添加0、0.1％、0.5％、1.0％抗菌肽.预试期7d,正式试验期28 d.结果 显示,与A组相比,B组仔猪的末重、平均日增...     

抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用

旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L^-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na⁺、K⁺)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL^-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示：与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。     

饲料中添加天蚕素抗菌肽对南美白对虾免疫功能、抗病力的影响

本研究以南美白对虾为研究对象,探究饲料中天蚕素抗菌肽的合适添加量。在饲料中依次添加不同浓度水平（0%、1%、2%、3%、4%和5%）的天蚕素抗菌肽,配制为6种配合饲料,用以投喂南美白对虾,饲养周期8周。结果显示：与对照组相比,饲料中添加天蚕抗菌肽对南美白对虾增重率、蛋白质沉积率和特定生长率有显著影响（P＜0.05）,高水平天蚕素抗菌肽会抑制南美白对虾的增重率和特定生长率,南美白对虾的饵料系数显著下降,但对南美白对虾存活率和摄食率无显著影响（P＞0.05）|随着饲料中天蚕素抗菌肽的添加水平不断增加,3%组南美白对虾的ACP、POD和SOD含量达到最大水平,与对照组有明显差异（P＜0.05）|随着饲料中天蚕素抗菌肽的添加水平的不断上升,3%组南美白对虾的淀粉酶、脂肪酶和胃蛋白酶含量最高,与对照组存在明显差异（P＜0.05）。结果表明,饲料中添加天蚕素抗菌肽显著提高南美白对虾的增重率和特定生长率,提高南美白对虾的生长发育速度,从而增强机体免疫力,提高南美白对虾的抗病能力。 [关键词]天蚕抗菌肽|南美白对虾|抗病力|免疫功能