猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及其M蛋白截段基因编码氨基酸的生物学分析

利用PK-15细胞从四川省某猪场发病死亡的7日龄仔猪肠系膜淋巴结和脱落的肠黏膜材料中分离获得1株病毒,PCR检测证实为猪流行性腹泻病毒,命名为SC-405.对其M截段基因克隆后进行测序,结果显示该基因长664bp,编码221个氨基酸;序列分析并通过NCBI做序列比对,与其他已知的GenBank公布的序列同源性为97％～99％;氨基酸序列有突变,同源性为95％～99％;系统进化树表明该病毒跟序列号为AEQ29504、ACA81419、AEE38481序列的亲缘关系比较近;用DNAStar Protean模块对该基因编码的蛋白进行主要的抗原指数、二级结构、蛋白质骨架柔性、表面可及性等参数进行预测,并在线预测该蛋白的亲水性及跨膜区,确定该截段基因的B细胞抗原优势表位可能分布在Leu12-Asn14、Lys36、Trp100 Thr113、Val196-Asp202和Asp215-Glu217这些区段.     

动物组织中四环素类抗生素残留的ELISA检测研究——土霉素抗体的制备

四环素类抗生素属小分子半抗原物质 ,必须与大分子物质结合才能产生免疫原性。本试验采用重氮化法合成土霉素 牛血清白蛋白 (BSA OTC)及土霉素 鼠血清白蛋白 (RSA OTC)人工抗原 ,用紫外扫描对其进行鉴定。以BSA OTC免疫家兔制备抗血清 ,以RSA OTC为包被抗原 ,采用双向免疫扩散法和ELISA方法对抗血清进行鉴定。结果表明用重氮化法合成的人工抗原对四环素类药物有特异的抗原抗体反应 ,抗血清效价达 1 2 8× 1 0 5,完全能够满足四环素类药物残留的ELISA检测要求     

PRRSV重组N蛋白的抗原性分析及其特异性抗体制备

利用大肠杆菌表达技术和亲和层析法纯化出重组PRRSV N蛋白 ,用间接ELISA法和Western blot分析 ,证明其具有较好的抗原性。将该纯化蛋白采用大剂量长程免疫法免疫家兔 ,制备了兔抗重组N蛋白抗体 ,用Western blot分析和竞争抑制试验证明其具有很高的特异性 ,ELISA效价达 1∶32 0 0以上。     

牛病毒性腹泻疫苗和猪瘟疫苗对牦牛病毒性腹泻的田间免疫效果

由于牛病毒性腹泻病毒与猪瘟病毒之间存在共同抗原和交叉免疫,选择A、B两组各15头牛病毒性腹泻病毒检测为阴性的牦牛,分别注射牛病毒性腹泻疫苗和猪瘟疫苗,在不同时间段（第7、14、30、60、90、180天）采集两组牦牛血清,应用酶联免疫吸附试验检测抗体,结果显示两种疫苗都可以使牦牛机体产生抗体,并且牛病毒性腹泻病毒疫苗比猪瘟疫苗整体抗体水平高,     

北京地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻病血清学调查

对北京郊区6个未进行牛病毒性腹泻病（BVD）免疫牛场的546份奶牛血清样品,使用牛病毒性腹泻抗体ELISA试剂盒进行检测,并对其中3个牛群进行牛病毒性腹泻病毒（BVDV）血清抗原筛查。共检出阳性血清514份,总阳性率94.1%,其中5个牛场的场内血清抗体阳性率在95%以上。牛病毒性腹泻持续性感染牛（PI牛）筛查的3个牛群均有阳性牛检出。结果表明,北京地区规模化奶牛场存在牛病毒性腹泻感染和接触史,应采取净化措施进行控制。     

口蹄疫双佐剂灭活疫苗免疫动物抗体持续期的研究

一、材料与方法1.疫苗佐剂:法国SEPPIC公司生产的206佐剂成品,双佐剂自行配制。2.口蹄疫病毒抗原:O型和Asia-1型病毒,按生产规程灭活后制备成疫苗用抗原。3.主要检测试剂盒:液相阻断     

间接ELISA检测抗传染性法氏囊病病毒抗体方法的建立

采用原核表达的传染性法氏囊病毒(IBDV)核衣壳蛋白VP2作为诊断抗原,建立检测IBD血清抗体的间接ELISA方法.抗原最佳包被量为每孔174.67ng,待检血清最佳稀释度为1:40,待检血清样品的D492nm≥0.43Dpos+0.57Dneg判为阳性,反之判为阴性.对采自安徽省部分地区的979鸡血清样品进行检测,IBDV抗体阳性率为39.73%.结果证实,间接ELISA法用于IBDV血清抗体的监测具有良好的特异性,是一种快速简便的血清学方法,值得在基层推广应用.     

O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态的LPB-ELISA检测

分别按一次免疫、首免后第15d加强免疫和首免后第60d加强免疫程序，对3组试验牛（每组牛20头）用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA（LPB-ELISA）测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果，首免后第15d加强免疫牛和第60d加强免疫牛抗体水平较高，50％保护牛所占比例分别为56．3％和63．1％，完全受保护的牛所占比例分别为34．3％和29．5％。第60d加强免疫牛的保护率要高于第15d加强免疫牛和一次免疫牛的保护率。结果表明，首免后第60d加强免疫是最理想的免疫程序。     

ELISA技术在犬病毒与抗体检测中的应用

<正>ELISA即酶联免疫吸附测定,是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性、特异性较高的试验技术。比较常用的ELISA方法有双抗体夹心法和间接法。