家畜胚胎干细胞的分离培养和鉴定

家畜胚胎干细胞的分离培养和鉴定工作对于研究和利用家畜胚胎干细胞具有重大意义。本文对文献中报道的各种分离、培养和鉴定方法进行了综述 ,并介绍了几种主要家畜的胚胎干细胞在近十余年间的研究进展情况。     

日研究人员利用虹鳟鱼精原干细胞培育卵子

日本东京海洋大学副教授吉崎悟朗率领的研究小组，成功地将雄性虹鳟鱼的精原干细胞移植到雌性幼虹鳟鱼体内，并最终使其发育成为卵子。这一技术将来可能在保护濒危物种方面发挥积极作用。     

哺乳类精原干细胞体外培养影响因素

精原干细胞为体内天然干细胞，如能体外培养建系或建立其长期培养系统，将会极大地促进精原干细胞移植，转基因等技术的实际应用，也会给体外研究细胞的发育分化提供很好的材料，影响精原干细胞外存活，增殖的因素很多，该文主要综述了基本培养基的选择、血清和添加剂，激素和维生素的应用及SCF、LIF、bFGF等生长因子的作用等，以期促进精原干细胞的研究。     

神经干细胞的研究进展

神经干细胞广泛存在于胚胎及成年哺乳动物神经系统中.本文就近年来神经干细胞的研究进展作一简要综述.     

法美联手从胚胎干细胞首次培育出生殖细胞

法国国家科研中心和美国宾西法尼亚大学的科研人员在《科学》发表文章宣布 ,他们已成功将老鼠胚胎干细胞 (ES细胞 )转化为卵细胞。这是科学家首次在试管中从 ES细胞培育出生殖细胞。此成果不仅将为解决不育、操纵细胞性特征和开展生殖生物学机理及生理学基础研究带来新的前景 ,而且将使生物学家有可能从干细胞中得到无数卵子 ,以完善治疗性克隆技术。　　据报道 ,研究人员从出生 3～ 5 d的老鼠身上提取胚胎干细胞 ,然后选出所有能转化为雌性细胞的 ES细胞 ,利用一种特殊荧光试剂通过荧光跟踪其表达情况。他们在观测 ES细胞变化时发现 :…     

由体外受精囊胚获得ICR小鼠ES细胞

收集鼠卵母细胞和精子，采用体外受精技术，获得早期胚胎。体外培养胚胎至囊胚，分离内细胞团，获得ICR小鼠的ES细胞。结果不但获得了来自体外受精囊胚的ICR小鼠ES细胞，而且表明用体外受精方法获得的小鼠早期胚胎的数量明显大于常规方法，且比较稳定。ICR小鼠ES细胞的获得，为研究小鼠的ES细胞分化提供了条件。     

兔胰腺干/祖细胞的分离培养和鉴定

采取1～9日龄的实验仔兔胰腺,1 mg/mLⅣ型胶原酶消化,低糖DMEM培养.细胞铺满后进行传代20代以上冻存.对2～3代的细胞进行免疫组化染色,诱导向β细胞分化并进行高糖刺激胰岛素分泌.结果表明,兔的胰腺干/祖细胞具有较强的增殖能力;免疫组化染色表现为PDX-1、CK19、nestin和胰高血糖素阳性;分化诱导2 d后,双硫腙染色（DTZ）20%阳性,6 d后迅速增加到80%;高糖刺激诱导细胞具有胰岛素释放能力.通过免疫组化染色和诱导细胞胰岛素分泌实验证明分离的是兔胰腺干/祖细胞.首次报道兔胰腺干/祖细胞分离培养方法.     

牛胚胎干细胞建系研究进展及存在问题

牛胚胎干细胞具有重要的生物学意义和广阔的应用前景。回顾了牛胚胎干细胞的研究进展，阐述了牛胚胎干细胞生物学特征与表面抗原标志、建系方法和技术路线，系统分析了影响牛胚胎干细胞分离克隆的各种重要因素，并对目前建系中所面临的主要问题进行了探讨。     

人类胚胎干细胞与小鼠囊胚嵌合的探讨

【目的】探讨人类胚胎干细胞(Human embryonic stemcells,hESCs)能否在小鼠胚胎环境中生存并参与其各个组织器官的分化,为hESCs与小鼠囊胚嵌合的可行性研究提供依据。【方法】将154枚受精后3.5 d(3.5days postcoitum,3.5 dpc)ICR品系小鼠囊胚随机分为3组:试验组(注射hESCs)、模拟注射组(注射针仅刺破透明带及滋养层细胞,但不注射细胞和溶液)及对照组(未注射),于注射后培养24 h统计囊胚完全孵化率。将稳定转染增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的含有9~15个hESCs的小细胞团块,显微注射入3.5 dpcICR品系小鼠囊胚腔内,注射后分别于3,24,48,69,77,94和116 h,在普通荧光显微镜下观察EGFP阳性细胞的定位与动态分布情况,并将嵌合体胚胎移植入假孕母鼠子宫内,分别于移植后第4天和第6天处死孕鼠,普通荧光显微镜下观察EGFP阳性细胞在整个小鼠胚胎中的分布情况。【结果】注射后24 h,试验组和模拟注射组的囊胚完全孵化率分别为73.6%和77.1%,均极显著高于对照组(38.3%)(P<0.01),有88.9%(32/36)的胚胎中的hESCs迁移并定位在小鼠内细胞团(ICM)及其临近的滋养层细胞上;体外培养48 h后,EGFP阳性细胞数进一步减少;116 h后,只有1枚胚胎仍残留3~4个EGFP阳性细胞,且散在分布于ICM克隆之外。体内发育试验结果显示,将43枚注射后的嵌合体囊胚移植入6只代孕母鼠子宫内,获得了22枚脱膜,有17枚脱膜中含有胚胎,其中形态正常胎儿14枚,没有胚胎含有EGFP阳性细胞。【结论】hESCs很难与小鼠囊胚正常嵌合。     

山羊骨髓间充质干细胞生物学性能鉴定及诱导分化为心肌细胞的研究

 研究了关中奶山羊骨髓间充质干细胞的分离、培养和生物学特性，并在体外诱导分化为心肌细胞表型。结果表明，山羊MSCs具有很好增殖能力；能够耐受反复冷冻和解冻；表达细胞表面标志CD44、CD105、CD166，弱表达CD34、CD106，而不表达CD14、CD45。该类细胞用5-氮胞苷诱导分化后，能够表达心肌α-actin，并呈PAS染色阳性。