北冬虫夏草多糖对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的影响

为探讨北冬虫夏草多糖对四氯化碳(CCl4)所致小鼠肝损伤的保护作用。通过不同剂量北冬虫夏草多糖对CCl4致小鼠急性肝损伤的结构和功能的研究,测定了试验小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性和总胆红素(T-BiL)水平,以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)含量,并对肝脏进行了病理形态学的显微观察。结果显示:各剂量北冬虫夏草多糖能不同程度降低CCl4所致小鼠血清中AST、ALT、ALP活性和T-BiL水平,升高肝脏组织中SOD、GSH的水平,降低肝脏组织中MDA的含量;减轻和改善化学性肝损伤肝组织的病理变化程度和促进其结构和功能的修复。北冬虫夏草多糖对CCl4所致小鼠肝损伤有较好的保护作用。     

金银花对小鼠抗炎作用的观察

目的 探索口服和腹腔注射不同剂量的金银花水煎液及水煎醇沉液对小鼠抗炎作用。方法 采用小鼠耳廓化学致炎和棉球肉芽肿方法测定抗炎效果。结果 给小鼠口服金银花水煎液和腹腔注射金银花水煎醇沉液对小鼠均有一定的抗炎作用,且随着剂量的增加抗炎作用有所加强,大剂量组的效果最佳。     

束缚应激对小鼠小肠5-羟色胺表达的影响

为了探讨束缚应激对小鼠小肠5-羟色胺(5-HT)表达的影响,试验将小鼠随机分为对照组和束缚应激处理组,每日称小鼠体重,并采用免疫组织化学法对小鼠小肠内5-HT免疫阳性细胞进行检测。结果表明:处理组小鼠体重明显降低,小肠内5-HT免疫阳性细胞数显著高于对照组(P<0.05)。说明束缚应激可使小鼠小肠5-HT免疫阳性细胞表达增加。     

不同培养液对小鼠受精卵体外发育的影响

小鼠卵母细胞体外受精后通过比较4种培养液(M16、mCZB、HTF、mCZB*)对小鼠受精后胚胎发育的影响,以期建立最优的体外受精培养液系统。结果表明:受精卵在mCZB*、M16、mCZB、HTF培养液中2-4细胞发育率分别为60.26%、50.00%、48.72%和52.78%。mCZB*比其他3种培养液效果显著(P<0.05),其他3个培养液之间差异不显著(P>0.05)。在mCZB*、M16、mCZB、HTF培养液中囊胚发育率分别为44.37%、27.03%、26.28%和22.22%,各培养液处理组之间差异显著(P<0.05)。本试验提示mCZB*为小鼠体外受精胚胎发育的最佳培养液。     

过氧化氢和甲醛对SPF级大鼠和小鼠繁殖室消毒效果观察

目的比较观察过氧化氢和甲醛对SPF级大鼠和小鼠繁殖室内表面、台面以及空气的消毒效果,选择消毒效果良好的消毒剂。方法采用空气落下菌检测法和表面细菌拭子检测法,对过氧化氢和甲醛熏蒸SPF级大鼠和小鼠繁殖室的消毒效果进行检测观察。结果SPF级大鼠和小鼠繁殖室分别经过氧化氢和甲醛熏蒸消毒后,进行空气落下菌的检测,过氧化氢和甲醛对大鼠繁殖室和小鼠繁殖室空气的杀菌率分别为100%、97.5%和100%、100%;将墙壁、地面和笼架表面的菌落数进行检测,过氧化氢和甲醛对大鼠繁殖室墙壁、地面和笼架的杀菌率分别为100%、99%、100%和95%、100%、99%,对小鼠繁殖室墙壁、地面和笼架的杀菌率均为100%。结论过氧化氢蒸汽消毒是比较理想的消毒方法,很好地控制了SPF级大鼠和小鼠繁殖室环境微生物,安全性高且消毒效果明显。     

活性氧参与脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7活化诱导凋亡

研究活性氧(ROS)与脂多糖(LPS)诱导后巨噬细胞活化诱导凋亡的关系。体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用不同浓度LPS诱导细胞,添加100μmol/L H2O2增加细胞内ROS,或用姜黄素(7.5μmol/L)降低细胞内ROS;流式细胞术分析细胞凋亡、线粒体膜电位(MMP)和ROS。结果显示,RAW264.7细胞凋亡和细胞内ROS水平均随LPS浓度增加而增加,高浓度的LPS导致MMP下降;与LPS(8μg/m L)单独作用组比,H2O2增加ROS,并导致凋亡细胞百分率增加;姜黄素降低LPS诱导的细胞凋亡,同时减少细胞内ROS。表明活性氧参与LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7活化诱导凋亡。     

CIRP对冷应激小鼠血清生化指标、相关细胞免疫因子及能量代谢的影响

将45只6周龄体质量(18±2)g SPF级雄性SD小鼠随机分为5组(n=5),常温对照组5只(A组);低温对照组冷刺激4、8h各5只(B组);冷诱导RNA结合蛋白(cold-inducible RNA binding protein,CIRP)过表达组冷刺激4、8h各5只(C组),注射CIRP过表达慢病毒液0.1mL;CIRP干扰组冷刺激4、8h各5只(D组),注射CIRP干扰病毒液0.1mL;阴性对照组冷刺激4、8h各5只(E组),注射空载体病毒液0.1mL。A组置于常温(21±0.1)℃条件下饲养,后4组置于低温(4±0.1)℃环境饲养,分别在4h及8h后通过摘除眼球的方法采取血液。采用ELISA法检测血清中IL-1、IL-2、IL-6、GSH-PX、SOD、T-AOC、MDA、丙酮酸、PFK-1、LDH的含量。结果显示:(1)冷应激处理后,小鼠血清中相关细胞因子水平出现明显变化,人为的致使CIRP在小鼠体内出现不同的表达对血清中相关细胞因子的影响差异显著(P0.05);(2)冷应激处理后,小鼠血清中氧化还原指标GSH-PX、SOD、T-AOC、MDA变化非常明显,人为的致使CIRP在小鼠体内出现不同的表达对血清中相关氧化还原指标的影响差异极显著(P0.01);(3)冷应激处理后,血清当中能量代谢相关指标无明显变化,人为的致使CIRP在小鼠体内出现不同的表达对血清中相关能量代谢指标的影响差异不显著(P0.05)。结果表明:在不影响动物机体能量代谢的情况下,CIRP可以有效地抑制细胞内氧自由基的生成,从而提高小鼠抗氧化能力,以及调节动物机体的相关免疫因子,对小鼠抵抗低温应激起到积极地保护作用。     

Preliminary Study on NF-κB Signaling Pathway Regulating Brucella Intracellular Survival Molecular Mechanisms

By the infection of Brucella virulent strain and attenuated strain in mice macrophage RAW264.7,the assay was aimed to explore the relationship between NF-κB signaling pathways and Brucella virulent strain and attenuated strain in intracellular survival.Use different MOI Brucella (2308,RB51,16M and M5) to infect mice macrophage RAW264.7,after 0,4,8 and 24 h infected,cracking cell and collecting supernatant,we detected the effect of Brucella on activation of NF-κB signaling pathway by Western blotting.Different concentrations of NF-κB signaling pathway inhibitor were incubated with mice macrophage RAW264.7,with different multiplicities of infection (MOI) of Brucella infecting cells,ELISA kits to detect the expressions of TNF-α,IL-1β and IL-6 cytokine;At the same time,count the number of intracellular bacteria of CFU.The results showed that rough cattle Brucella strains RB51 could strongly activate NF-κB signaling pathway,smooth cattle Brucella strains 2308 was weak in the activation;At the same time,the activation of NF-κB signaling pathway was concentration dependent.When the MOI was 80,infection time was 8 h,NF-κB activation degrees of rough cattle Brucella strains RB51 and smooth cattle Brucella strains 2308 were the strongest,and this pathway was involved in producing TNF-α and IL-6;NF-κB signaling pathway inhibitor BAY11-7082 affected Brucella intracellular survival.So rough cattle Brucella strains RB51 intracellular survival and NF-κB signaling pathway activity were closely related.The results laid the foundation for the further study of Brucella intracellular pathogenesis,also provided scientific basis for the research of new drugs to Brucella,and prevention and treatment of brucellosis.