荧光原位杂交法分析披碱草和圆柱披碱草染色体构成

采用荧光原位杂交(FISH)和基因组原位杂交(GISH)技术,对披碱草和圆柱披碱草的染色体组组成和亲缘关系进行了分析,结果表明：(1)披碱草和圆柱披碱草均为异源六倍体,染色体数为2n=6x=42,染色体组组成为StStYYHH,核型类型分别为2A和2B。(2)两种披碱草属植物的H染色体组起源于大麦属,St染色体组起源于拟鹅观草属的不同物种;Y染色体组与St染色体组有共同的祖先。(3)披碱草和圆柱披碱草都有6个5SrDNA位点,和4个45SrDNA位点;两个物种中有1对染色体上同时含有5SrDNA和45SrDNA位点,但5SrDNA和45SrDNA在染色体上的定位和所在染色体组别不同。(4)重复序列pAs1和pSc119.2在两种披碱草染色体上的分布呈现多态性,主要集中于H组,在St和Y组的分布较少,可作为披碱草属植物的细胞学标记,用于区分H组和其他染色体组。(5)两种披碱草均有染色体易位或重组的变异。     

长期施用沼液对土壤中四环素类及磺胺类抗性基因分布的影响

[目的]探讨长期施用猪粪沼液对土壤环境中抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)分布的影响及其季节变化.[方法]分别在春、夏、秋、冬4个季节采集养猪场周边长期用沼液作为肥料的土壤,同时采集当地未施用过沼液的土壤作为对照,采用荧光定量PCR方法,对土壤中四环素类和磺胺类ARGs进...     

屠宰企业非洲猪瘟PCR自检中常见问题与对策

生猪屠宰企业是非洲猪瘟疫情防控的重要环节,是切断非洲猪瘟传播途径的重要环节,也是保证屠宰企业出厂肉品质量安全主要关卡.目前,我县屠宰企业在开展非洲猪瘟PCR检测过程中,也陆续出现了一些问题,本文对这些问题进行了分析和总结,并提出自己相应对策,供参考.     

杂草稻nrDNA ITS片段的PCR扩增条件优化及测定

对杂草稻的nrDNA ITS片段的PCR扩增条件进行了优化并测定,建立的PCR最优体系为：20μL反应体系含1μL模板DNA,0．125mmoL／L dNTPs,0．5μmol／L正反向引物,1U Taq酶,2．0μL 10×Taq PCR Bufter;退火温度为57℃。这样的条件下充分保证了ITS PCR产物的质量和纯度要求,直接测序结果为600bp左右,与网上结果十分类似,表明结果准确可靠。这些ITS片段的系统学信息将为杂草稻的起源进化提供有力的分子水平证据。     

苦瓜MAP30基因的克隆与载体构建

首先提取苦瓜的基因组DNA,然后根据Genbank中已公开发表的MAP30序列,设计一对特异引物MAP301,MAP302,并增添特异定位于内质网的小肽Kozak序列。采用PCR技术,从苦瓜的基因组DNA中扩增出一分子量为800bp左右的片段,回收克隆测序,结果表明,克隆获得片段与已公开发表的MAP30序列同源性达100%,将阳性克隆进行酶切,获得的目标片段与用同样酶切所获得的植物表达载体pEV1和pEV2大片段连接,酶切鉴定重组子构建成特异表达于果实的载体。     

液体菌种连续定量接种试验

食用菌接种通常是在无菌的环境中进行严格的无菌操作完成的,这不仅要求环境严格消毒,还要使用一整套设备,操作烦琐,工作效率低.为了提高接种效率,降低生产成本,适应规模化、工厂化生产需要,本试验采用液体菌种在开放的空间进行连续定量接种的方法,并与常规接种方法作了比较,现介绍如下.     

利用PCR和间接免疫荧光染色技术检测风信子黄腐病菌

根据风信子黄腐病菌(Xanthomonas hyacinthi,XHA)的fimA基因,合成了1对特异性引物JAAN/JARA ,目的片段为226 bp,用来检测样本中有无目标细菌.用XHA全菌体免疫家兔,获得抗血清,建立了检测风信子黄腐病菌的间接免疫荧光染色检测技术.用上述两种方法对风信子黄腐病菌和人工接种发病样品进行检测.结果表明,这两种方法可以准确、灵敏地检测风信子黄腐病菌及带菌样品,方法简单、快速、实用,可以在口岸检疫中推广使用,以减少风信子黄腐病菌进入中国的风险.     

聚合酶链式反应(PCR)技术检测牛奶中金黄色葡萄球菌

根据金黄色葡萄球菌特异性STAA-Aul基因序列,设计、合成了一对引物,运用聚合酶链式反应(PCR)技术从10头患有奶牛乳房炎的奶牛奶样中扩增得到8个大小为420 bp的DNA产物;阴性样品中未扩增到产物。测定了其中2个DNA片段的核酸序列,确定为金黄色葡萄球菌的STAA-Aul基因。     

县级实验室非洲猪瘟病毒荧光PCR免提取检测操作规范及注意事项

武宣县动物疫病预防控制中心兽医实验室从2020年2月至7月用免提取试剂盒检测了非洲猪瘟病毒感染可疑样品1. 36 万份,结果阳性检出0份.期间检出假阳性3 次,阳性对照组不成立2次,后来经两名实验人员分别用不同厂家的试剂盒进行复检结果均为阴性.笔者认为县级兽医实验室技术人员在非洲猪瘟病毒荧光PCR免提取实验时,实验前准...     

锦州地区副猪嗜血杆菌病流行情况调查与药敏试验

为了解辽宁省锦州地区副猪嗜血杆菌病流行情况,对37个疑似样本进行分离鉴定。采用多重PCR方法进行血清型鉴定,并对分离菌株进行药敏试验,结果分离到23株副猪嗜血杆菌,分别为血清4型11株,5型6株,1、2、14型各1株,不可分型菌株为3株,对头孢噻肟、氟苯尼考、头孢曲松、阿莫西林、阿米卡星高度敏感。