抗菌肽CM与haFGF改构体融合基因的构建与表达

构建重组改构体aFGF28-154和抗菌肽CM基因的融合基因,使其在大肠杆菌系统中融合表达,以期获得具有靶向FGFR高表达肿瘤细胞的抗肿瘤融合蛋白.利用PCR引物延伸的方法拼接得到带有G4S铰链的天蚕素-蜂毒素杂合肽CM与aFGF28-154的融合基因,插入大肠杆菌表达载体pET20b中,构建表达质粒pET-CM-aFGF28-154,并转化至大肠杆菌BL21(DE3),氨苄青霉素抗性筛选重组转化子.IPTG诱导4 h后,菌液经超声破碎,以包涵体形式表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的18%.将包涵体溶解并通过差速离心除去部分杂蛋白,透析复性并用Heparin Sepharose CL-6B亲和层析,目的蛋白得到初步纯化,为进一步研究蛋白的生物学活性奠定了基础.     

天蚕素抗菌肽对817肉杂鸡生长性能及免疫功能的影响

试验旨在研究天蚕素抗菌肽对817肉杂鸡生长性能和免疫功能的影响。选取1日龄817肉杂鸡900羽,随机分为5个处理组（对照组、抗生素组及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组）,每组6个重复,每个重复30羽。对照组饲喂基础日粮,抗生素组在基础日粮中添加150 mg/kg金霉素,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮中添加100、200和300 mg/kg天蚕素抗菌肽,试验期42 d。结果显示,Ⅱ、Ⅲ组能显著提高1~21日龄817肉杂鸡的平均日增重（P<0.05）,显著降低料重比（P<0.05）;显著提高21、42日龄817肉杂鸡的胸腺、法氏囊和脾脏指数（P<0.05）;显著提高42日龄肉杂鸡的ND抗体水平和T淋巴细胞转化率（P<0.05）,表明在日粮中添加天蚕素抗菌肽能提高817肉杂鸡的生长性能和免疫功能,在本试验条件下,适宜的添加量为200 mg/kg。     

我省召开天蚕素抗菌肽应用论坛

2010年10月24日上午,由国家饲料工程技术研究中心与湖南省饲料工业协会联合主办,北京中农颖泰生物技术有限公司、长沙市福农生物科技有限公司联合承办的“天蚕素抗菌肽信息及技术研讨会”在长沙蓉园宾馆胜利召开。     

牡丹江市野生蚕资源分布与开发利用现状

牡丹江市森林资源丰富,森林覆盖率达到62.3%,气候温暖湿润,是黑龙江省森林环境和植物生长环境最好的地区之一,也是全省野蚕资源最丰富的地区之一,对现有的野生柞蚕、天蚕及栗蚕资源分布及利用现状进行分析,对开发利用这些珍贵的资源,为人类生活和健康服务具有重要意义。     

徐州市滨湖花园小区植物景观设计分析

本人选取近年新建的居住区滨湖花园作为研究对象,调查方法采用现场逐步记录的方法调查植物材料和植物配置方式,并通过对典型场景取样摄影以及实测绘图的方法来完成。通过分析,得出结论：园林树种的多样性仍需提高,尤其增加季相植物种类,重视多年生草本植物的应用。完善并拓宽种植设计的设计方法,给人以丰富的感觉体验。重视绿化的生态设计和构建多样化的园林空间。     

天蚕素对肉仔鸡生产性能及免疫功能的影响

本试验在基础日粮中添加天蚕素、免疫多糖、圆葱寡糖和维吉尼亚霉素,对肉仔鸡的生产性能、免疫器官及功能的影响进行了研究。结果表明,添加天蚕素的试验组与添加免疫多糖、圆葱寡糖和维吉尼亚霉素的对照组在肉仔鸡体重和饲料报酬方面无显著性差异(P>0.05)。28d时天蚕素试验组的脾脏重和脾脏指数、胸腺重和胸腺指数显著高于免疫多糖组和维吉尼亚霉素组(P<0.05),表明天蚕素对肉仔鸡免疫器官的影响与圆葱寡糖一致,高于免疫多糖和维吉尼亚霉素。28 d时添加天蚕素组、免疫多糖组和圆葱寡糖组的ND抗体效价显著高于添加维吉尼亚霉素组(P<0.05);添加天蚕素与圆葱寡糖组的白细胞数显著高于免疫多糖组(P<0.05),极显著高于添加维吉尼亚霉素组(P<0.01)。表明天蚕素、圆葱寡糖和免疫多糖具有促进免疫细胞生长,增强肉仔鸡免疫功能的作用。     

致倦库蚊天蚕素CecB2基因的原核表达及蛋白纯化

构建致倦库蚊(贵阳株)天蚕素B2(CecB2)基因原核表达载体,并原核表达获得重组蛋白。定向克隆CecB2成熟肽序列至原核表达载体pET32a(+)上,将成功构建的pET32a-CecB2重组表达质粒转化大肠埃希菌Rosetta中经IPTG诱导表达,对IPTG诱导浓度和诱导时间优化后表达所得目的蛋白采用镍离子亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western blot检测鉴定表达蛋白。结果表明,成功构建原核表达载体pET32a-CecB2,IPTG浓度和时间优化结果为IPTG浓度为0.05mmol/L,诱导时间为3h。SDS-PAGE检测获得大小约25ku的可溶性纯化蛋白,Western blot鉴定纯化蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生抗原抗体结合反应。说明所构建原核表达载体pET32a-CecB2能在大肠埃希菌中可溶表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。     

天蚕素类抗菌肽抗菌性能测定及其性质研究

利用天蚕素类抗菌肽产品（有效成分为10％）检测其抗菌性能及各项抗菌性质,为今后将其应用于饲料工业打下基础。结果表明：该产品对于大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈分剐为11mm、10mL、14．5mm,三者最小抑菌浓度（MIC）分剐为4500ug／mL、3500μg／mL、3500μg／mL,此外,该产品耐热性和耐酸性效果较佳,在100℃水浴15min后或pH值为1．0仍表现出对金黄色葡萄球菌的抗性。据此试验,推荐其在试验动物日粮中添加量为3500μg／mL。     

天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生长性能和猪瘟及伪狂犬抗体水平的影响

为探明断奶仔猪饲粮中添加天蚕素抗菌肽替代吉他霉素对断奶仔猪生长性能、腹泻和猪瘟及伪狂犬病抗体的影响。选择杜×大×长三元断奶仔猪120头,随机分为2个处理,每处理6个重复,每重复10头猪。对照组饲粮为基础饲粮中添加50%吉他霉素140mg/kg和10%硫酸粘杆菌素540mg/kg,试验组饲粮为对照饲粮用天蚕素抗菌肽(预混料专用型)160mg/kg替代吉他霉素。试验期为44d。结果表明:试验组仔猪平均日增重比对照组提高了4.94%(P>0.05),而料重比和腹泻率比对照组分别降低了5.13%(P<0.05)和18.66%(P>0.05);试验组仔猪血清中猪瘟抗体阻断率、阳性率和合格率分别比对照组高出117.53%(P<0.05)、499.88%和30%,而2组间猪伪狂犬病抗体水平没有差异(P>0.05);试验组仔猪每kg增重饲料成本比对照组降低了0.38元。由此可见,天蚕素抗菌肽替代吉他霉素与硫酸粘杆菌素配伍使用可提高断奶仔猪饲料转化率、猪瘟抗体水平和经济效益。