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41.
将噬菌体与细菌孵育25min提取噬菌体感染细菌的总RNA,通过逆转录的方法获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到目的片段,以pET-15b为载体构建重组质粒pET-15b-lysK并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达金黄色葡萄球菌噬菌体K裂解酶基因lysK,表达产物蛋白经镍柱纯化后,测定LysK的裂解活性、裂解谱,并免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,成功诱导表达可溶性LysK并获得重组蛋白,酶谱试验证明LysK对金黄色葡萄球菌具有裂解活性,LysK比噬菌体K裂解谱广。制备的兔多克隆抗体能够与LysK发生特异性反应且具有较高效价,为后续进行LysK体内治疗研究打下了基础。 相似文献
42.
试验从鸡场周围环境中采集土样,在伊红美蓝培养基平板上分离纯化大肠杆菌,然后以其为宿主,分离相应的噬菌体,并研究其生物学特性。结果表明,共分离到大肠杆菌4株,经16S rDNA鉴定为埃希氏大肠杆菌。其中,以大肠杆菌LY4为宿主分离纯化到1株烈性噬菌体,负染经电镜观察该噬菌体由多面体头部及尾部组成,噬菌斑直径为2.5~3.8 mm,效价2.0×1010 PFU/mL,最佳感染复数为0.0001;在温度-20~37 ℃、pH 5.0~10.0范围内该噬菌体表现出良好的稳定性,但在人工胃液(pH 1.2)条件下,即可导致死亡;测定其一步生长曲线,该噬菌体潜伏期为20 min,裂解能力强,以上特性表明该噬菌体在鸡舍环境治理中具有潜在的应用价值。 相似文献
43.
1株肠炎沙门氏菌噬菌体的污水分离及生物学特性研究 总被引:2,自引:2,他引:0
Using double-layer plate method, a phage against Salmonella enteritidis was isolated from sewage water, and its biological characteristics were studied. The plaques of isolated phage were transparent with clear boundary, and were about 2 mm in diameter at 12 h. The morphological properties of phage were examined by electron microscope, and showed that the phage had an isometric polyhedral no-enveloped head with diameter of about 54 nm, and a long noncontractile tail with size of about 110 nm. The test of optimal multiplicity of infection showed when MOI equaled 2, the number of phage offspring was higher. One-step growth kinetics was determined according to the results of one-step growth experiment, which showed that the latent period was about 10 min, the rise period was about 100 min, and the average bust size was about 61. The phage against S.enteritidis was successfully isolated from the sewage water in this study, which would provide materials for the further biological control researches of S.enteritidis using corresponding phage. 相似文献
44.
45.
单增李斯特菌溶源性噬菌体的诱导及鉴定 总被引:2,自引:2,他引:0
利用丝裂霉素C诱导获得单增李斯特菌溶源性噬菌体,并确定其核酸类型。PCR及其扩增产物的序列测定检测原噬菌体,透射电子显微镜观察丝裂霉素C诱导获得的溶源性噬菌体颗粒,DNase I、RNase A和绿豆核酸酶分别消化噬菌体基因组,确定噬菌体的核酸类型。结果显示,38株单增李斯特菌分离株中的16株在tRNAArg位点携有原噬菌体,其中1株可诱导出噬菌体颗粒,该噬菌体为长尾噬菌体,核酸为dsDNA。噬菌体的成功诱导为噬菌体及其功能基因的开发利用奠定了基础。 相似文献
46.
47.
48.
49.
治疗性噬菌体制剂研究进展 总被引:9,自引:0,他引:9
细菌性疾病一直是困扰养殖业发展的主要问题之一,治疗的常用方法是使用抗生素,但随着耐药菌的大量出现,抗生素已无法达到理想的治疗效果,噬菌体制剂作为一种新的治疗手段已受到越来越广泛的关注。虽然噬菌体制剂的早期研究工作并不理想,而且一度被认为是没有前途的,但近期的研究表明,噬菌体制剂不但有许多抗生素无法比较的优势,而且只要对其进行正确的处理,是可以在治疗中发挥其应有的作用的。国外某些研究机构已开始研制噬菌体制剂,有些国家的噬菌体制剂已经应用于临床治疗并取得了比较理想的治疗效果。 相似文献
50.
用小单孢菌40027菌株作为指示菌,分离得到噬菌体ΦHAU8的抗性菌株,通过高压脉冲电泳(PFGE)和Southern杂交试验表明:ΦHAU8 DNA已整合到小单孢菌40027菌株染色体的500 kb的AseⅠ片段中;该抗性菌株为噬菌体ΦHAU8的溶源菌,命名为LXH8. 相似文献