鳖源嗜水气单胞菌M-96株表面抗原分析

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印迹技术分析嗜水气单胞菌Ｍ－９６株表面抗原,表明该菌体表面抗原是由分子量为３０ＫＤ、３３ＫＤ、３６Ｋ和３９ＫＤ的蛋白质和脂多糖组成,其中部分对胃蛋白酶敏感。     

中华鳖“烂颈病”病因的初步研究

患“烂颈病”的中华鳖颈部组织逐渐变硬、坏死，呈化脓性溃烂；从典型病鳖颈部病灶上分离、提纯培养得到一株细菌，经细菌学鉴定为致病性嗜水气单胞杆菌；该菌株对健康中华鳖进行人工感染，出现与自然病鳖基本一致的病理症状，接种健康鲫鱼表现出较强的致病性；药敏试验结果表明，该病菌对丁胺卡那霉素、氧氟沙星、恩诺沙星高度敏感；采取3g／m^3水体的漂白粉浓度全池泼洒及在饲料中添加丁胺卡那霉素15mg／kg鳖体重．d，连续用药5d后，能有效地控制病情。     

悉生条件下3株嗜盐古菌对卤虫生长及其抗弧菌感染的影响

嗜盐古菌存在于高盐水体中,是高盐环境微生物种群的重要组成部分。本研究利用从日晒盐场结晶池卤水中分离得到的3株红色嗜盐古菌,分别命名为Haloarcula sp.HG-1、Haloferax sp.KN-4和Halorubrum sp.IT-5。采用悉生实验系统,探讨不同盐度(30、100和150)条件下3株古菌能否作为卤虫(Artemia)的唯一饵料,并比较其作为饵料对卤虫存活、生长和抗鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染能力的影响。结果表明,在盐度30的悉生系统中,投喂3株古菌组卤虫存活率和体长均保持较高水平;鳗弧菌攻毒条件下,卤虫存活率有所下降,其中投喂Haloferax sp.KN-4菌株组卤虫抗鳗弧菌感染能力最强。正常和攻毒条件下,在盐度100和盐度150悉生系统中分别投喂3株古菌,卤虫均保持较高存活率和体长,其中投喂Haloarcula sp.HG-1菌株组卤虫具有最高存活率和最长体长,但攻毒组卤虫存活率和生长普遍优于未攻毒组,这可能与高盐条件下V.anguillarum毒力下降有关。本研究利用"卤虫-古菌"悉生实验系统,证实了3株嗜盐古菌均可作为卤虫的唯一饵料,为卤虫提供营养;利用"卤虫-古菌-致病菌"攻毒实验系统,证实3株嗜盐古菌均可以增强卤虫抗鳗弧菌感染能力。本研究结果为研究古菌在高盐环境食物链中的作用提供了基础数据。     

致病性嗜水气单胞菌及其所致鱼病综述

尽管早在1891年就有因嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染引致蛙“红腿病”的报道,但由于该菌在自然界尤其是水中广泛分布,一般为正常共栖菌,因此长期以来对其致病性并未重视。近年来在我国南方各省淡水养殖鱼类流行暴发性传染病,有报道系为该菌所致败血症。此外在其它水生经济动物、哺乳动物亦有类似发现。人类因之而发生胃肠炎及伤口感染的病例也日渐增多。嗜水气     

嗜水气单胞菌J-1株OmpA融合蛋白的高效表达及免疫原性分析

以嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）J-1株基因组为模板,根据GenBank已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白的基因序列设计1对引物,扩增去除信号肽序列的成熟外膜蛋白OmpA的基因片段,定向克隆至表达质粒pET32a（＋）中,重组质粒经限制性酶切鉴定后测序。结果表明,插入片段长度为948bp,与NCBI上登录的几个相关序列相比,同源性在93．1％-95％之间,缺失4个氨基酸。将重组原核表达质粒pET32a-OmpA转化至大肠杆菌BL21（DE3）,经诱导可表达分子量约57．4kD的蛋白,凝胶薄层扫描显示OmpA在转化菌中表达量占全菌蛋白的50％以上。用兔抗J-1株总外膜蛋白血清进行Western blot,在57．4kD处有明显反应条带。融合蛋白经Ni-NTA树脂柱亲和层析纯化后免疫新西兰兔制备抗血清,ELISA效价达1：12800以上。Western blot检测结果显示,该血清与9株具有代表性的气单胞菌的分子量约35kD的外膜蛋白均有较强反应,说明所表达的融合蛋白不仅保持原有外膜蛋白的免疫原性,而且提示OmpA可能是嗜水气单胞菌的共同保护性抗原。[中国水产科学,2008,15（2）：301—306]     

嗜水气单胞菌UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶基因的克隆表达及酶的性质

通过水生动物源性嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila,Ah）强毒株J-1株与弱毒株MR-1株抑制差减杂交得到gneJ差减片段,该片段与创伤弧菌（Vibrio vulnificus）和人源嗜水气单胞菌的UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶基因有较高的同源性。扩增完整的gneJ基因,进行分布检测并将其克隆至质粒pET32a（＋）,在大肠杆菌（Escherichia coli）BL21中进行异源表达,SDS-PAGE结果显示,重组表达蛋白的分子量约59．7kD,与理论推测值基本相同。酶活性分析表明,该重组蛋白可将UDP-乙酰葡萄糖胺转化为UDP-乙酰半乳糖胺,确证gneJ基因编码蛋白为UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶。Western Blot分析显示,嗜水气单胞菌J-1株胞外产物的兔抗血清可识别该重组蛋白,表明该蛋白与天然蛋白有相同的抗原性。以重组蛋白为免疫原,对小鼠进行动物保护实验,结果显示,该重组蛋白对小鼠有60％的保护率,证明UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶可作为亚单位疫苗的侯选成分。     

嗜线虫致病杆菌代谢物拮抗大豆疫霉

测定嗜线虫致病杆菌（Xenorhabdus nematophilus）发酵液对大豆疫霉（Phytophthora sojae）菌丝生长、孢子囊形成及萌发的影响，采用种子和土壤处理的方法研究了发酵液对幼苗发病率的作用。结果表明：发酵液对大豆疫霉（Phytophthora sojae）菌丝生长有较强的抑制作用，50ml/L发酵液能完全抑制菌丝的生长，6ml/L发酵液的抑制率仍达68.86%；发酵液能强烈抑制大豆疫霉的孢子囊形成，10ml/L-100ml/L的发酵液处理孢子囊8天后的抑制率分别达97.04%和99.19%，5ml/L发酵液仍达到82.74%的抑制率；发酵液对孢子囊的萌发有一定抑制作用，处理后48小时，6ml/L-100ml/L发酵液的抑制率达72.94%－88.56%；发酵液浸种结果表明，发酵液浓度为25ml/L-50ml/L对大豆种子萌发均没有显著影响。用浓度为50ml/L的发酵液处理种子，播种后9天，病株减退率可达79.8%，但12天调查，病株减退率仅达34.4％。发酵液处理带菌土壤能有效减轻大豆幼苗的发病率，50ml/L发酵液处理的病株减退率为76.3%，化学农药甲霜灵处理的病株减退率为84.0%。     

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的研究概况

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的研究概况李焕荣,陆承平（北京农学院动物科学系,北京１０２２０６）（南京农业大学动物医学院,南京２１００９５）嗜水气单胞菌等气单胞菌是鱼类［３３］、冷血动物及包括人在内的温血动物的重要病原菌［５,１２,１３］．在自然界中分布极广...     

鲈细菌性类结节病的病原及血液病理研究

2002年5月从患细菌性类结节病的濒死鲈体内分离到一株细菌02517-1，经人工感染试验及API 20E系统鉴定，认为该病原菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。血液生理生化指标检测显示，与健康鱼相比，患病鱼的红细胞、白细胞、血糖、蛋白质、尿素、胆固醇等显著下降，而谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST、乳酸脱氢酶LDH等血清酶类活性增强，说明经嗜水气单胞菌感染后，鲈在营养物质代谢、抗病力、消化、呼吸、排泄等方面的生理功能受到严重损害。药敏实验结果表明：复方新诺明、卡那霉素、庆大霉素、氟哌酸等4种化学疗剂及地榆、乌梅、木瓜、五味子等4种中草药对该种病原菌有较强的抑菌作用。