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21.
利用PCR法鉴定产SLT-IIe大肠杆菌 总被引:3,自引:0,他引:3
类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体( Shigalike Toxin Ⅱ Variant, S L TⅡv or S L TⅡe),是仔猪水肿病的主要致病因子。根据 S L TⅡe 基因序列,合成一对针对 S L TⅡe 操纵子基因保守区的寡核苷酸引物,建立了聚合酶链式反应( P C R)扩增方法。通过对产 S L TⅡe 毒素大肠杆菌菌株 T B1、产 S L TⅡ毒素大肠杆菌菌株 933 W 和产 S L TⅠ毒素大肠杆菌菌株 H30 的试验,结果表明用所设计的引物建立的 P C R方法可特异性鉴定产 S L TⅡe 大肠杆菌。用此法对本实验室从患水肿病仔猪肠道分离的 15 株大肠杆菌进行了鉴定,结果可从 15 个菌株的 12 株中扩增到 S L TⅡe 的特异性保守序列基因片段,而其它菌株未见此保守序列的基因片段。 相似文献
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23.
经Co^60γ辐照和草酸复合处理获得的变异体。电镜切片观察表明,变异体的细胞壁比野生型薄,单位面积上微纤丝数量较多。堆积较紧密,角质层变得粗糙,细胞核内RAN增加,核基质的网架纤维也有变化。变异体的过氧化物酶活性,多酚氧化酶活性,苯丙氨酸解氨酶活性均比野生型强。 相似文献
24.
在坛紫菜栽培群体中发现一棵红色块与野生色块相嵌的颜色变异叶状体,在实验室进行红色藻块的体细胞再生克隆培养,获得了纯红色变异体。与野生型相比,红色变异体在叶状体的形态、颜色、生长速度、成熟、藻胆蛋白及叶绿素含量等方面均存在着明显的差异。红色变异体的颜色呈铁锈红色,体形宽大,生长速度明显快于野生型,培养400多天仍不成熟。与野生型相比,它的叶状体活体吸收光谱除各吸收峰的峰值有变化外,第4个吸收峰的峰顶(藻蓝蛋白的吸收峰)向短波方向移动了约3 nm,表明其藻红蛋白的结构有可能发生了改变。另外,它的藻红蛋白(PE)和叶绿素a的含量均显著增加,但藻蓝蛋白(PC)的含量有所下降,使得PE/Chl. a和PC/Chl. a的比值较高, 但PE/PC比值较低。培养400 d的红色变异体的体细胞再生体中,正常叶状体和畸形叶状体的百分数分别为78.49%和19.81%,根丝细胞苗占1.7%,未见细胞团出现,说明该变异体的不成熟是由叶状体的细胞分化严重延缓所致。 相似文献
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26.
盐生植物根际细菌B268的鉴定及其抑菌抗盐活性 总被引:1,自引:0,他引:1
为了挖掘耐盐生防菌资源,从盐生植物短枝木麻黄Casuarina equisetifolia L.根际分离获得1株生防细菌B268。采用多相分类法对B268进行鉴定;利用活菌计数和平板对峙法测定菌株的抑菌活性;利用antiSMASH数据库对抗菌物质合成基因簇进行预测;基于氯化钠(NaCl)梯度下的生理活性以及功能基因表达水平检测,分析盐胁迫对菌株生防性状的影响;通过水培试验评估菌株对黄瓜耐盐性的促进作用。结果表明:菌株B268为同种贝莱斯芽孢杆菌群的一个新种系型,在3% (W/V) NaCl下最适生长,生长范围0~15% (W/V) NaCl。共预测到13个抗菌物质合成基因簇,并对9种供试病原菌具有拮抗活性,其中,青枯病菌处理8 h后出现负生长,苹果树腐烂病菌、交替链格孢、胶孢炭疽菌和番茄早疫病菌的平板抑制率均大于60%。在盐梯度培养条件下,B268的胞外嗜铁素和吲哚乙酸浓度分别在1%和3% (W/V) NaCl时最高,而平板溶磷指数保持稳定;吲哚乙酸合成基因dhaS、植酸酶基因phyC在1% (W/V) NaCl,而嗜铁素合成基因dhbC在3% (W/V) NaCl时表达水平最高。接种B268后,水培黄瓜苗对80 mmol/L NaCl胁迫不敏感,对 120 mmol/L NaCl胁迫形成抗性,叶部可溶性糖含量提高46.4%,丙二醛含量降低67.2%。研究表明,B268是1株嗜盐生防菌,具有广谱抗菌活性,且促生活性对盐表现出耦合响应性,在植物盐害、病害生物防治以及盐土生物修复方面具有研发潜力。 相似文献
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28.
应用pGEX原核表达载体构建了牛朊蛋白的1个正常重组蛋白和3个单氨基酸变异体的原核表达质粒,即pGEX-BoPrP(93~241)、pGEX-BoPrP(93~241)(S154N)、pGEX-BoPrP(93~241)(A129V)和pGEX-BoPrP(93~241)(Q234R)。经转化E.coli BL21(DE3).均表达了预期大小约为42.4ku的融合蛋白。在优化的诱导表达条件下,各重组菌可产生表达量占细菌总蛋白量30%~45%的融合蛋白。经免疫印迹检查,所有融合蛋白均可与抗牛单克隆抗体4C11反应。表明,单氨基酸突变并不影响单抗4C11的识别表位。 相似文献
29.
小麦近缘野生种抗除草剂Dalapon变异体的筛选 总被引:3,自引:0,他引:3
为了发掘小麦近缘野生种抗除草剂资源,用在培养基中添加除草剂的方法对几个小麦近缘野生种细胞系进行了变异体筛选。结果表明,从黑麦草T ove中筛选到了抗4.32 mm ol.L-1D alapon的愈伤组织,该浓度下愈伤组织存活率为0.56%;从长穗偃麦草R 123中筛选到了抗2.88 mm ol.L-1D alapon的愈伤组织,存活率为0.59%;从黑麦草N apoleon和卵穗山羊草Y 100中均筛选到了抗1.44 mm ol.L-1D alapon的愈伤组织,存活率分别为0.49%和0.56%;方穗山羊草A e42的抗性水平最低,为0.72 mm ol.L-1,愈伤组织存活率为0.33%。对存活愈伤组织进行细胞水平上的鉴定表明,其仍然保持对D alapon的抗耐性;从不同浓度D alapon下筛选到的存活愈伤组织均得到了有抗性的再生植株。在种子水平上对纤毛鹅观草进行筛选,得到了0.195%的抗性植株。 相似文献
30.