双重RT-PCR同步检测马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒

根据马铃薯A病毒全基因序列和马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白区序列分别设计PVA和PLRV的特异性引物,应用双重RT-PCR同步检测马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒,分别得到300bp和222bp大小的扩增片段.试验从反转录、PCR等方面对双重RT-PCR同步检测2种病毒进行了探索和优化.结果表明反转录反应中dNTPs浓度、2种病毒下游引物浓度比例以及PCR反应中Mg2+浓度对双重RT-PCR同时检测PVA和PLRV有较大的影响.     

双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒

[目的]研究建兰花叶病毒（CymMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）双重一步法RT—PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT—PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946bp扩增产物务带;且双重一步法RT—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两务与单一RT—PCR产物相对应的清晰务带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85％以上,证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。     

企业主导的"双重属性"的农业技术推广服务的运行研究——以湖南浏阳马家湾村为例

农业技术本质属性决定其推广的模式和方法,企业主导的"双重属性"(兼具公共物品与私人物品的属性)的农业技术推广因其收益外溢所引起的一系列问题,会给企业主导的"双重属性"的农业技术推广带来重重阻力.以湖南浏阳马家湾村为典型案例,分析企业主导的"多功能生物活性垫料养猪零排放及配套技术"推广中的困境,并分别从采纳者农户和推广者...     

一个四翼超混沌系统在图像加密技术中的应用

采用双重加密算法将一个能够产生真正的四翼混沌吸引子的四维超混沌系统应用于图像加密技术,系统的每一个方程里都含有一个三次的交叉乘积项,系统信号的频谱带宽也较宽,可以进一步提高密钥系统的安全性.一方面,经过双重加密后的明文与密文之间没有直接联系,无法通过选择特殊的明文、密文对的办法破解密钥序列;另一方面,在每一重加密过程中,明文与密文之间都含有非线性运算,能够更有效地抵御选择明文攻击.该算法将明文在任何位置像素值的影响扩散到了密文的所有像素,提高了密文对明文的敏感性,促进了复杂混沌系统在信息加密技术中的应用研究.     

H1、H3亚型猪流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速、准确地检测H1和H3亚型猪流感病毒（swine influence virus,SIV）的方法,根据H1和H3亚型SIV血凝素（hemagglutinin,HA）基因保守序列,分别设计2对特异性引物和2条TaqMan探针,建立双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法敏感性高,可检测到最低拷贝数为10²拷贝/μL;重复性良好,重复孔Ct值的变异系数均在5%以下;特异性好,除H1和H3亚型SIV外,H4、H5、H7、H9亚型SIV、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒检测均为阴性;在田间样品中成功检出1株H1和1株H3亚型SIV,检出率为1.16%。该方法准确、快速、灵敏、特异,可为H1、H3亚型SIV的快速鉴别检测及流行病学调查提供有效的技术手段。     

某猪场PRRSV与PCV2双重感染的诊

2017年2月,贵州某猪场发生以仔猪皮炎和持续性腹泻为特征的临床病例。为查明病因,送检发病保育仔猪2头于实验室进行病原诊断。根据流行病学情况、临床症状、病理解剖与PCR/RT-PCR检测,确诊该猪场送检保育猪存在猪蓝耳病病毒与猪圆环病毒2型的双重感染。     

一例黄鳝嗜水气单胞菌病的药敏试验

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)属于弧菌科、气单胞菌属,普遍存在于淡水、污水、淤泥、土壤和人类粪便中,部分致病株对人和动物有致病性。本试验从2010年某淡水养殖场的发病黄鳝中分离出嗜水气单胞菌,并经过常规细菌学鉴定和双重PCR鉴定确定为携带气溶素基因的强毒菌株,而且经过黄鳝和小鼠回归试验进一步确认该病由强毒菌株嗜水气单胞菌引起,并根据药敏试验成功控制病情。     

我对2010年禽病形势的预测

光阴似箭,日月如梭。不经意间,2009年匆匆逝去,2010年已经到来。回眸2009年,我国养禽业经受了国际金融危机和疾病困扰双重挑战,玉米、豆粕等饲料原料价格大涨,鸡苗和毛鸡价位下滑摇摆,禽流感、新城疫、肾型传支等家禽传染病甚嚣尘上,使广大养鸡     

不同栽培品种生大豆对大鼠内脏器官形态和肠道组织学的影响

摘要：选用50±2日龄的Wister大鼠60只,随机平均分6组,,分别饲喂以吉林小粒6、吉林30、吉林45、吉农7、丰交7607栽培品种生大豆和全脂膨化大豆（对照组）为主要蛋白源的日粮,30天解剖大鼠,内脏器官称重,肠道测量长度、制作切片。结果表明：胰腺重量、空肠隐窝深度和空肠绒毛长度和隐窝深度比值对照组与实验组差异显著（p＜0.05）, 各品种生大豆日粮对大鼠抗营养影响为吉林小粒6＞吉林30＞丰交7607＞吉林45＞吉农7。