青虾源维氏气单胞菌双重PCR检测方法的建立

根据NCBI已发表的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)促旋酶B亚单位基因gyrB和编码细菌RNA聚合酶σ70因子基因rpoD的保守序列设计引物,建立了一种快速检测青虾源维氏气单胞菌的双重PCR检测方法。结果显示:青虾源维氏气单胞菌gyrB和rpoD基因PCR扩增产物大小分别为815 bp、554 bp,而对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、哈维弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)、需钠弧菌(Vibrio natriegens)、非O1霍乱弧菌(non-O1 Vibrio cholerae)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)扩增结果皆为阴性;灵敏性试验结果显示该方法检测到的最低菌体DNA量为1.8×10^-2 ng/μL,且10份送检样本检测结果与传统细菌分离鉴定结果相一致。结果表明,双重PCR检测方法特异性好、灵敏性高,适用于...     

中国碳交易政策的减排有效性分析——双重差分法的应用与检验

文中基于2005～2016年中国30个省市的面板数据,采用双重差分法分别分析了碳交易政策对二氧化碳排放量和二氧化碳排放强度的影响,并对双重差分法评价碳交易政策的适用性进行了检验。研究结果表明:1)碳交易政策对降低地区二氧化碳排放量和二氧化碳排放强度都产生了显著且持续的促进作用。2)碳交易政策满足使用双重差分研究的同质性与随机性假设,碳交易政策具有减排效应的评估结果是科学有效的。     

西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用

【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L~(-1)和8.0 mmol·L~(-1);最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品c DNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。     

龟鲍曼不动杆菌和摩氏摩根菌双重PCR诊断方法建立

为建立龟源致病性鲍曼不动杆菌和摩氏摩根菌双重PCR诊断方法,应用鲍曼不动杆菌rpoB基因和摩氏摩根菌gyrB基因的特异性引物,对单重和双重PCR反应的退火温度、引物浓度、MgCl2浓度、dNTP浓度等进行优化.试验结果显示,鲍曼不动杆菌rpoB基因和摩氏摩根菌gyrB基因引物分别进行PCR扩增后,均获得特异性条带,与预...     

猪后海穴注药治病效果好

后海穴位于猪的肛门上方,尾根的下方正中窝处.在此穴位对症注射药物,能刺激猪的神经系统,促进血液循环,调节体液,而达于病变部位,发挥针刺的神经刺激及药物治疗的双重作用;而且通过神经传导见效快,对治疗生猪胃肠道及泌尿生殖系统疾病有很好效果.     

取消农业税政策对农民收入的影响研究

2006年,全国各个省份完成了农业税改革,取消对农业税的征收,减轻了农民负担.对农业税从古至今的演变过程直至最后的终结进行了梳理,农业税是地方及中央财政的重要保障,同时严苛税赋给当地居民的生活增添了沉重负担.为了客观深入探究两者之间的内在关联,搜集整理了30个省份2001-2007年的统计数据,运用双重差分估计的方法,...     

科技发展对生态伦理的双重效应

科技是人类认识和改造自然的对象化的知识力量.它作为当代社会生产力的第一要素以及社会变革的首要推动力,它将对人们的道德水平、人与自然和谐、社会有序发展等生态伦理产生重大的积极效应.而生态伦理指的是人与人、人与社会、人与自然和谐有序的关系.但是,科技发展在给生态伦理带来巨大积极效应的同时,也会带来一些消极效应.我们要合理地运用科技发展,限制这种消极效应带来的不良后果.积极地良性利用科技,实现生态伦理的和谐发展.     

新型免疫佐剂--免疫刺激复合物(ISCOM)的研究进展

免疫刺激复合物(immunostimulating complex,ISCOM)是由抗原物质与由皂树皮提取的一种糖苷QuilA及胆固醇按1：1：1混合后自发形成的一种具有较高免疫活性的脂质小泡。每个小泡直径40nm,约含10～12个分子的蛋白质。ISCOM是一种全新的抗原递呈系统,对机体有免疫增强作用,具有佐剂和抗原递呈的双重功能。应用于多种细菌、病毒和寄生虫病的疫苗,具有产生“全面”免疫应答的效力,可长期增强特异性抗体应答。     

不同亚型猪流感病毒双重RT-PCR快速检测

参照已发表的文章合成4对引物,分别能特异扩增出H1、H3、N1和N2片段,应用同时鉴别3个血清亚型H1N1、H1N2和H3N2的双重RT-PCR快速鉴别诊断猪流感的方法。从临床病料中检测出阳性后进行病毒分离鉴定,符合率为100%,表明该方法具有很高的使用价值。     

羊梭菌病快速鉴别PCR方法的建立及初步应用

根据GenBank已公布的产气荚膜梭菌和腐败梭菌的α毒素基因序列,分别设计并合成针对2种α毒素基因的特异性引物,通过扩增条件的优化,建立快速鉴别产气荚膜梭菌和腐败梭菌的双重PCR方法。特异性试验显示,产气荚膜梭菌和腐败梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期目的条带,而大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌则均未能扩增出相应条带。灵敏度试验结果显示,产气荚膜梭菌和腐败梭菌基因组DNA最低检测量分别为17.95pg/μL和1.261pg/μL。应用该方法对样品进行检测,其中5份为产气荚膜梭菌阳性。成功建立了特异性强、敏感性高的双重PCR方法,可以有效进行产气荚膜梭菌和腐败梭菌的快速鉴别,对羊梭菌病病原快速鉴定及流行病学调查具有重要意义。