芸豆凝集素受体在小鼠生殖细胞上的分布及作用研究

[目的]探讨芸豆凝集素（PHA）受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布及作用。[方法]应用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的芸豆凝集素作为分子探针,确定其PHA受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布。通过不同浓度PHA处理精子和卵母细胞,研究PHA预处理对精子获能和顶体反应,以及对卵母细胞FITC—PHA染色的影响。l结果]PHA受体主要表达于小鼠精子整个尾部区域和顶体反应后的头部质膜,2mg／mlPHA预处理有抑制顶体反应的作用;卵母细胞透明带和细胞膜都有PHA受体的存在。不同浓度PHA处理卵母细胞对其透明带阿FTIC—PHA染色影响不大,但对其细胞膜染色有较大影响,且不同浓度之间差异明显。[结论]芸豆凝集素受体是小鼠精子和卵母细胞受体的重要组成部分,且在精卵质膜融合过程中发挥重要作用。     

文昌鸡FSHR基因多态性及其对繁殖性状的遗传效应

【目的】寻找与文昌鸡繁殖性能相关的遗传标记。【方法】以促卵泡素受体(FSHR)基因作为影响鸡繁殖性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术结合测序分析,对FSHR基因所有外显子及部分内含子区域进行单核苷酸多态性(SNPs)检测,收集文昌鸡繁殖性能指标,分析FSHR基因多态性与繁殖性状的关系。【结果】共发现4个区域存在SNPs位点,分别为:区域4中exon 4编码区43bp处的T→C突变,但没有导致翻译后氨基酸序列的改变;区域2中exon 2编码区5′端-49bp处的C→T突变;区域6中exon 6编码区3′端+12bp处的A→G突变;区域9中exon 8编码区3′端+38bp处的G→T突变。对以上4个区域不同基因型与繁殖性状的相关性分析表明,文昌鸡FSHR基因第4外显子呈现的3种基因型(CC/CD/DD)多态性,与文昌鸡300日龄产蛋数及平均联产天数显著相关(P<0.05)),而且CD杂合基因型的300日龄产蛋数及平均联产天数显著高于其他基因型(P<0.05)。【结论】FSHR基因可作为影响文昌鸡产蛋数的候选基因。     

瓯江光唇鱼的卵巢和卵母细胞发育研究

采用常规生物学调查方法和组织切片技术,对瓯江光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)各期卵巢和卵母细胞的组织学结构特征及繁殖期进行了系统的研究。结果表明：瓯江光唇鱼卵母细胞发育可分为5个时相,其卵巢发育可分为6个时期。Ⅰ期卵巢透明,呈细线状;Ⅱ期卵巢以第Ⅱ时相卵母细胞为主;Ⅲ期卵巢以第Ⅲ时相卵母细胞为主,只有少量第Ⅰ和Ⅱ时相卵母细胞,此期伴有液泡和卵黄颗粒的出现;Ⅳ期卵巢呈长囊状,卵巢中卵粒清晰可见,以第Ⅳ时相卵母细胞为主,此期卵黄颗粒增多,核移位;V期卵巢为成熟期的卵巢,卵细胞游离。Ⅵ期卵巢处于衰退期,此时卵巢松弛,体积缩小。瓯江光唇鱼的繁殖期为每年5-8月。进入繁殖期的5-6月的卵巢以Ⅳ期为主,7-8月的卵巢有Ⅲ或者Ⅴ期卵巢。在繁殖期内5-8月平均成熟系数分别为2.75％、8.54％、3.25％和1.44％。瓯江光唇鱼的产卵类型属于连续产卵类型,在同一繁殖期内可以反复产卵数次。     

猪卵母细胞冷冻技术研究进展

综述了猪卵母细胞的冷冻保存方法和解冻方法,同时对保存效果、影响保存的因素、保护剂的选择等进行探讨。最后,展望了猪卵母细胞冷冻技术的应用前景。     

猪卵母细胞体外成熟培养的研究

本研究对比了不同浓度的猪卵泡液、激素、卵泡直径对猪卵母细胞体外成熟培养的影响.结果表明:①在TCM199+10％ FCS为主的基础培养液中添加浓度为10％的猪卵泡液比添加0、5％、20％能显著(P＜0.05)提高卵母细胞的成熟率;②再添加50 ug/ml的激素FSH对猪卵母细胞的成熟效果最好,显著(P＜0.05)高于LH、PMSG试验组;③来自于卵泡直径为4～7mm的卵母细胞成熟率显著高于(P＜0.05)直径≤3mm和≥8 mm卵泡的卵母细胞的成熟率.     

牛卵母细胞发育的超微结构研究

本实验根据卵细胞的数量及分布、透明带的变化,卵泡大小等把牛卵母细胞的整个发育过程分为六个阶段,在超微结构的水平上进行了研究。随着卵母细胞的发育,高尔基体、线粒体、滑面内质网、皮质颗粒等细胞器数量不断增加,且逐渐迁移到皮质区。卵母细胞成熟时。高尔基体及粗面内质网消失,皮质颗粒开始在质膜下呈线状排列,而线粒体又向胞质中央区扩散。直径2毫米以上卵泡卵母细胞中,少嵴圆形线粒体一律转变为带帽线粒体,核仁发生致密化。此外,牛卵母细胞中有带有界膜的、均匀分布的囊泡。皮质颗粒成团发生和分布也是牛卵母细胞的特点之一。实验事实证明,皮质颗粒的形成与滑面内质网关系更为密切。     

哺乳动物卵巢中的细胞凋亡及其调节

细胞凋亡是近几年细胞生物学研究的热点。卵巢中发生的生殖细胞减少、卵泡闭琐和黄体退化都与细胞凋亡密切相关。就上述三个过程中的细胞凋亡进行了概述 ,并简要介绍了新近发现的几种因素对卵巢细胞凋亡的调节。     

牛卵巢的保存与卵巢内卵母细胞采集的研究

利用屠宰牛的卵巢,研究了卵巢内(Interior Ovary,IO)卵母细胞的回收方法与影响IO卵母细胞回收数量的因素,以及卵巢保存方法对卵母细胞体外受精后卵裂率与体外发育能力的影响.结果表明抽吸采取表面卵泡卵母细胞以后,用间隔1.6 mm的4个刀片平行排列构成的切割刀,纵横切割秦川牛卵泡期卵巢,其卵母细胞回收数量最高.两次回收平均每个卵巢可获得26.45个A、B级可用卵,较单纯抽吸采卵(5.15个)提高了约4倍.刀距增宽或缩小都会降低卵母细胞的回收数量.牛品种不同对IO卵母细胞的回收数量有显著影响,以中国荷斯坦牛最多(34.25个/卵巢),秦川牛次之(21.75个/卵巢),山丹牛最少(8.25个/卵巢).牛繁殖状态不同对IO卵母细胞的回收数量有显著影响,以卵泡期最多(21.75个/卵巢),黄体期和妊娠期次之(分别为11.75、10.75个/卵巢),老龄退化期最少(4.25个/卵巢).回收的IO卵母细胞直径和透明带外径分别达(126.9±9.98) μm和(151.85±10.39) μm,均较表面卵母细胞(分别为136.05±6.09 μm和160.80 μm±4.23 μm)要小的多(P＜0.01).卵巢保存温度25～29℃与30～37℃对IO卵母细胞体外受精后卵裂率与6～8细胞胚发育率无显著影响(P＞0.05),但保存时间则有显著影响,超过6 h会显著降低卵裂率和6～8细胞胚发育率(P＜0.05).