槟榔APV1病毒多克隆抗体制备及酶联免疫检测

槟榔是海南重要的经济作物,APV1 (areca palm velarivirus 1)病毒引起的槟榔黄化病严重危害槟榔产业的健康发展。研发快速精准的APV1病毒检测技术对于防控槟榔黄化病具有重要意义。本研究利用RT-PCR扩增APV1病毒的外壳蛋白(CP)基因序列,构建原核表达载体pET30a-APV1-CP并转化至大肠杆菌,经诱导表达和蛋白纯化获得APV1-CP蛋白。通过注射兔子获得多克隆抗体,经检测其效价为102 400。采用ELISA和RT-PCR分别对槟榔APV1病毒检测,发现两种检测方法大部分的检测结果基本一致。APV1病毒ELISA检测技术对槟榔种苗的检测及槟榔黄化病的防控具有重要的实用价值。     

马疱疹病毒1型gG蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用

为了解新疆马疱疹病毒1型(EHV-1)的流行情况,需要建立一种检测抗体的间接ELISA方法.采用纯化后EHV-1 XJ2015株的gG蛋白作为检测抗原,优化反应条件后建立检测EHV-1血清抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验及商品化试剂盒的应用效果对比.结果表明,该方法仅与EHV-1阳性血...     

禽腺病毒研究进展

禽腺病毒主要采用疫苗免疫与卵黄抗体防治相结合的方式进行防控。通过总结禽腺病毒的分类、传播、病原性、致病性、诊断和防治等方面的研究进展,对我国兽药企业的禽腺病毒疫苗及卵黄抗体研发情况进行简要分析,为禽腺病毒疫苗及卵黄抗体的临床应用及研发布局提供依据。     

进境荷兰郁金香种苗中南芥菜花叶病毒的鉴定

为了防止南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)传入我国,采用血清学、分子生物学、电镜观察及生物学接种等方法对从荷兰进口的郁金香种苗进行了ArMV检测。结果表明:ArMV血清学反应为强阳性;RT-PCR反应扩增出370bp的特异性目标条带;RT-PCR产物与已报道的3个ArMV部分外壳蛋白基因的核苷酸序列同源性为91.00%～93.24%,氨基酸序列同源性为99%～100%;免疫电镜观察到叶片病汁液中含有直径约30nm的球状病毒粒体;该病毒在黄花烟、白肋烟、矮牵牛和昆诺藜等鉴别寄主上引起坏死和褪绿等典型症状,经DAS-ELISA检测,这些接种寄主均呈ArMV血清学阳性反应。故将该病毒鉴定为南芥菜花叶病毒。     

单克隆抗体检测栗疫菌dsRNA的研究初报

 本文利用dsRNA特异性单克隆抗体,采用双抗体夹芯ELISA法,检测了栗疫菌中的dsRNA.结果表明,该法不仅能从栗疫菌低毒力菌株的总核酸粗提液中检测到dsRNA而不受其它核酸的干扰,而且比电泳法简便迅速,在大量筛选含dsRNA的栗疫菌低毒力菌株中具有很大的实用价值。     

上海松江地区犬主要疫病调查分析

应用血清学(酶联免疫吸附试验)方法,对上海市松江区360份犬血清样本进行了5种犬类主要疫病(狂犬病、犬瘟热、犬细小病毒病、犬副流感、A型流感)的抗体检测.经检测,狂犬病、犬瘟热IgG和犬细小病毒IgG的抗体阳性率分别为97.8％、64.4％和85.0％,犬瘟热IgM和犬细小病毒IgM的抗体阳性率为77.8％和11.7％...     

斑马鱼zgc113227多克隆抗体及卵形鲳鲹EVM0008813多肽抗体的制备

【目的】制备斑马鱼zgc113227多克隆抗体和卵形鲳鲹EVM0008813多肽抗体,为后续深入研究斑马鱼zgc113227基因和卵形鲳鲹EVM0008813基因的功能特性提供重要工具。【方法】以卵形鲳鲹EVM0008813基因为查询序列,通过BLASTp搜索获得斑马鱼同源基因zgc113227(NP＿001014341),以同源重组方式构建原核表达载体并转化大肠杆菌B21感受态细胞进行诱导表达,再以诱导表达获得的融合蛋白为抗原免疫日本大耳兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价,然后通过Western blotting鉴定及SDS-PAGE检测zgc113227多克隆抗体特异性,并以高效液相色谱—质谱联用（HPLC-MS）纯化鉴定EVM0008813多肽抗体。【结果】斑马鱼zgc113227和卵形鲳鲹EVM0008813均属于亲水性蛋白,二者的氨基酸序列相似性达58.12%,同时表现为潜在抗原位点多、柔性较强、表面可及性高,且无跨膜结构和信号肽存在。斑马鱼zgc113227和卵形鲳鲹EVM000881的保守结构域均包含5个保守基序（Motif 1～Motif 5）,且发现1个...     

民和县鸡新城疫和禽流感秋季集中免疫抗体检测

本文采用血凝—血凝抑制试验对民和县2020年秋季集中免疫鸡新城疫、禽流感后的鸡进行了免疫抗体检测,结果为:鸡新城疫免疫抗体群体合格率为88.5％,禽流感免疫抗体群体合格率为89％;鸡新城疫、禽流感群体免疫抗体合格率均达到农业部规定的≥70％以上,具有强的保护力;极少数乡镇的禽流感、鸡新城疫免疫抗体合格率较低,存在发生疫...     

规模猪场PRRSV的净化

本文就某三点式布局的现代集约化猪场,在爆发PRRS后,利用对PRRSV的最新研究成果,结合国外的成功经验,因地制宜地制订了PRRSV清除程序。通过猪场的部分清群和全场清洗消毒,以较小的代价,成功地清除了PRRSV,为我国规模猪场的PRRS控制和净化,提供了宝贵的经验。     

水牛感染枯氏住肉孢子虫病血清蛋白与IgG抗体的变化

近年来,国外关于住肉孢子虫病的血清学诊断方法的研究较多。据文献记载,牛、绵羊、猪与鼠感染住肉孢子虫后,先产生血清IgM抗体,但很快消失,随之IgG出现,并维持高效价水平达几个月或更长。酶联免