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合成含靶向生长抑素(Somatostatin,SS)前体基因的siRNA转录模板的发夹结构,插入pSilencerTM2.1-U6载体构建重组质粒2.1-S。提取小鼠下丘脑组织总RNA,PCR扩增获得SS前体基因cDNA,构建真核表达载体pcDNA3.1-SS、pEGFP-SS。将2.1-S分别与pcDNA3.1-SS、pEGFP-SS共转染入细胞中瞬时表达,检测SS前体基因表达变化。结果显示,重组质粒在E.coli(DH5α)内扩增,酶切及测序鉴定证明siRNA转录模板完整,正确地插入到pSilencerTM2.1-U6质粒中,重组质粒pcDNA3.1-SS与pEGFP-SS经测序序列完全正确。转染细胞在mRNA水平及蛋白水平均检测到2.1-S对SS前体基因表达的抑制。这表明,SS基因靶向siRNA稳定表达载体能在哺乳动物细胞中表达,并对靶基因呈抑制作用。 相似文献
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《沈阳农业大学学报》2009,40(2)
沈阳农业大学动物学学科在2005年获得硕士学位授予权,2007年首批招生。学科本着基础研究和应用紧密结合的原则,采用现代生物学技术对动物细胞与分子生物学、动物疫病快速检疫、动物疫苗等方面进行比较深入细致的研究。 相似文献
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弓形体又称弓浆虫病,是由刚第弓形虫寄生于猪牛、羊、猫等动物细胞内引起的以高热、呼吸及神经症状、繁殖障碍为特征的原虫病,猫是传播弓形虫病的最主要感染来源,猫粪中的弓形虫卵囊可保持感染力达数月之久,卵囊可被某些食粪甲虫、蝇、蟑螂和蚯蚓机械性地传播,猪摄食了被卵囊污染的饲料、饮水而被感染。 相似文献
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弓形体病是一种在自然界广泛传播并可以感染多种动物的疾病,寄生于猪、牛、羊、猫等多种动物细胞内,是一种人畜共患的原虫病。该病一年四季均可发生,夏季多发,一般在季节交替时多发,各种年龄猪均可感染,尤其是以3~5月龄的仔猪多发,而且发病最为严重。该病可以通过母体胎盘感染,可引起怀孕母猪发生早产、流产、产出发育不全的仔猪或死胎。该病可通过昆虫如蝇类、蚊虫叮咬均可引起传播,污染的饲料、饮水、病猪排泄物及咳嗽时空气飞沫也可传播病原,不 相似文献
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对各种微量电泳方法的利用要求实验才对他(她)的特定的问题有适当的研究,这些选择中所涉及到的一些因素多半是微量样品的大小,酶的浓度,特定酶染色剂的灵敏性,在选定的凝交和缓冲液条件下满意的同工酶谱,是否同工酶被显微镜光密度计定量。材料的价值和工作人员在方法上的取舍。利用动物细胞克隆的微量电泳能够进一步地开展许多技术要求得严格的领域的研究工作。 相似文献