兽药细菌内毒素凝胶检查法应注意的几个关键环节

<正>细菌内毒素检查法又称鲎试验法(Bacterial Endotoxin Test or LAL Test),是1964年由美国Lev-in和Bang发现,并在1968年建立的一种定性或定量检测微量细菌内毒素的体外分析方法。细菌内毒素检查包括两种方法,即凝胶法和光度测定法,     

大肠杆菌内毒素多克隆抗体的制备与纯化

为制备大肠杆菌内毒素多克隆抗体,应用大肠杆菌内毒素作为抗原免疫5周龄家兔,辛酸-硫酸铵法和葡聚糖凝胶层析法分离提纯抗血清,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳方法鉴定多抗纯度,紫外分光光度计测定抗体蛋白含量,ELISA法检测抗血清效价与交叉反应;大肠杆菌内毒素抗体含量和效价分别为6.95mg/ml和1:12800;成功制备出抗大肠杆菌内毒素多克隆抗体,为大肠杆菌内毒素病诊断试剂盒的研制奠定基础。     

褪黑素对内毒素血症山羊肝线粒体功能的影响

为探讨褪黑素对内毒素血症山羊肝线粒体功能的影响,将48只山羊随机分为4组,生理盐水组（saline,SL组）、内毒素组（LPS组,1 mg&#183;kg^-1）、褪黑素组（MT组,1 mg&#183;kg^-1）和褪黑素保护组（MT＋LPS组）。各组分别在处理后第3和第6小时各宰杀6只羊,取肝组织,提取肝线粒体和肝线粒体DNA（mtDNA）,检测线粒体膜电位（MMP）、ATP酶（ATPase）活性及心磷脂（CL）和肝线粒体DNA氧化产物8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷（8-OH-dG）含量。结果显示,与生理盐水组相比,内毒素血症时山羊肝线粒体MMP显著下降,ATPase活性抑制,CL含量显著减少,8-OH-dG水平明显增加;而与内毒素组比,褪黑素保护组山羊肝线粒体MMP明显升高,ATPase活性恢复,CL含量明显增加,8-OH-dG水平显著降低。结果提示,褪黑素能减轻内毒素诱导的山羊肝线粒体损伤,保护肝线粒体功能。     

兔舍中气载内毒素的测定

本试验采用ANDERSEN-6级和AGI-30(AGI=All Glass Impinger)空气微生物样品收集器分别对三个不同兔场环境中气载内毒素及革兰氏阴性菌含量进行了测定,并对二者在数量上的关系进行了探讨.此外,还对兔舍内环境中气载内毒素和气载革兰氏阴性菌的来源进行了初步分析.结果表明,兔舍内气载内毒素含量介于22～774 EU/m3空气之间;气载需氧革兰氏阴性菌含量在0.39～10.3×102CFU/m3之间,没有检测出专性厌氧的革兰氏阴性活菌.在三个兔场中,革兰氏阴性菌含量与内毒素含量之间存在弱的正相关(rA=0.23;rB=0.29;rC=0.24),所以不能通过测定气载革兰氏阴性细菌含量来估计气载内毒素的含量.通过对气载内毒素来源的分析,可以推测饲料和粪便可能是其主要的来源.     

生大黄与清蒸大黄的大承气汤对血清内毒素、NO和TNF-α含量变化的影响

为研究生大黄(Rheum officinale Baill.)与清蒸大黄的大承气汤对血清内毒素、NO和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量变化的影响,将105只实验动物随机分为生大黄与清蒸大黄的大承气汤组、阳性对照组、空白对照组及模型组,按20 mL/kg的剂量给药后,测定血清内毒素、一氧化氮和肿瘤坏死因子的含量,比较生大黄与清蒸大黄的大承气汤对小鼠血清内毒素、一氧化氮和肿瘤坏死因子含量的影响。结果表明,生大黄与清蒸大黄的大承气汤组都能增加ABP小鼠血清NO含量;生大黄与清蒸大黄的大承气汤组都能降低ABP小鼠血清内毒素和TNF-ɑ含量。生大黄与清蒸大黄的大承气汤对血清内毒素、NO和TNF-ɑ的含量均有不同程度的影响,这些变化与生大黄与清蒸大黄的大承气汤作用相对应,且大黄蒽醌类成分含量的变化在一定程度上对大承气汤的功效存在着一定的影响和共性关系。     

中药抗内毒素损伤血管内皮细胞的作用

内毒素对血管内皮细胞的损伤是多种疾病包括大肠杆菌病致病的根本原因,能介导多种细胞,特别是激活单核巨噬细胞,使其合成和释放各种细胞因子,再通过旁分泌或体循环作用于其它组织细胞,引起全身炎症反应综合征,严重者导致休克、多器官功能衰竭和死亡.虽然现在预防和治疗内毒素损伤的方法和途径多种多样,但还没有一种非常有效的手段.而作为天然物品的中药,有很多种类可以抗内毒素损伤,并且具有低毒低副作用等优点,有可能成为今后防治内毒素损伤的重要研究方向.     

低剂量脂多糖应激对高瘦素血症母马和去势公马反应的影响

本试验旨在研究脂多糖应激条件下,高瘦素血症对动物血液学和激素系统各项参数的影响。选择16头马,其中8头(4头母马,4头去势公马)诊断有高瘦素血症(血浆平均瘦素含量10.0～15.5ng/mL),8头血浆瘦素平均含量2.4ng/mL(4头去势母马)和5.5ng/mL(4头公马)。采用单次交叉试验设计,成对动物或被灌注脂多糖(35ng/kg体重,溶于500mL生理盐水中,灌注30min)或被灌注生理盐水,灌注后24h监测生理学指标和血成分组成。两次试验间隔期8d。与生理盐水灌注组相比,内毒素灌注提高了动物的直肠内温度、心率、呼吸率、血浆中总蛋白含量和血细胞压积。瘦素水平、内毒素处理和时间对心率(P=0.039)、呼吸率(P=0.018)和血浆总蛋白含量(P=0.054)存在交互作用。内毒素灌注后,降低了血中白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数(P0.001)。瘦素水平和性别对血小板数量存在相互作用。灌注内毒素提高了血浆中瘦素水平(P=0.013)。性别和处理时间对血浆中皮质醇和催乳素存在交互作用,而血浆中生长激素含量(P0.001)只受灌注后时间的影响。结果表明,在本试验条件(瘦素水平较低)下,瘦素水平及其与之相关的2型糖尿病症状对血液学和激素系统影响较小。     

牛蹄叶炎的研究进展

为了了解牛蹄叶炎病研究进展现状,对国内外牛蹄叶炎发病原因,发病机理,发病症状与防治等方面的研究进行了归纳总结,以期为以后的工作提供科学依据.