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鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。 相似文献
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本文研究了新疆生产建设兵团农机化推广模式的现状,包括其组织结构、推广策略和民间推广力量。在此基础上,研究分析了兵团农机化推广模式存在的问题,并提出了相应的对策建议。 相似文献
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为了解新疆马疱疹病毒1型(EHV-1)主要毒力基因遗传进化情况并构建TK基因缺失株,本研究以EHV-1 XJ2015株DNA为模板,对其主要毒力基因TK、gI和gE全长进行克隆、测序及生物信息学分析,并扩增TK基因左右重组臂TKL和TKR,构建质粒pUC-TKLR,将扩增后的增强绿色荧光蛋白(EGFP,含有CMV+polyA)插入pUC-TKLR质粒,构建TK基因缺失打靶质粒。TK、gI和gE基因同源性分析结果显示,XJ2015株与国外EHV-1分离株TK、gI和gE基因同源性均较高,分别为99.8%~100.0%、99.6%~100.0%和99.9%~100.0%;与EHV-3分离株同源性均最低,分别为72.9%、59.4%和62.1%;遗传进化分析显示,3个基因均与国外EHV-1同属于一个遗传进化分支,与EHV-9和EHV-4进化关系较近,但与EHV-3进化关系较远,表明XJ2015毒株与国外EHV-1毒株TK、gI、gE基因核苷酸上差异不明显,没有明显的地域性特征,功能基因保守且进化缓慢,同源基因功能相同或相近;经PCR扩增、酶切、测序及转染鉴定,本试验成功构建了用于TK基因缺失的打靶质粒pUC-TKLR-EGFP。通过对EHV-1主要毒力基因的分析及TK基因缺失打靶载体的构建,为新疆地区马鼻肺炎流行病学调查分析、TK基因缺失株的构建提供理论依据。 相似文献
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为进一步建立Ⅰ群血清4型禽腺病毒(FADV-4)的特异性检测方法,根据本实验室分离鉴定的安卡拉病毒的基因组序列,设计针对六邻体蛋白(Hexon)基因的特异性引物,经PCR扩增,连接至p ET-28a中,构建原核表达载体p ET-28a-Hexon。将其转化感受态BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE分析,获得重组蛋白大小为49 ku。Western blot分析纯化后重组蛋白能与FAd V-4阳性血清发生特异性反应。将纯化后的重组蛋白免BALB/c小鼠,制备了六邻体蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定效价表明制备的血清效价大于1∶64 000。 相似文献
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“绿水青山就是金山银山”,习近平总书记这句经典名言,被称为“两山论”。“两山论”是一个崭新的发展理念,也是一条崭新的发展路径。“两山论”着眼于处理好生态保护和经济发展的关系问题,发展经济不能以污染环境、破坏生态为代价,主张向绿色生态型、环境友好型经济转型,实现人与自然和谐共生。 相似文献
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随着改革开放发展的不断深入,我国茶叶产品海外贸易市场准入门槛逐渐下降,越来越多的企业有机会参与到国际市场竞争中,茶叶出口企业从业者商务英语水平日益受到关注。以商务英语培训为基础的企业人才模式创建是当前培训管理的重点,但是我国茶叶企业普遍受传统管理模式影响大,企业员工缺乏必要的商务英语尝试和终身学习理念,企业的语言培训存在一定问题。高校茶艺专业毕业生往往只具备基础的语言沟通能力,无法熟练地融入专业知识,进行商业谈判,在茶叶出口企业发展过程中需要建立与行业趋势匹配的人才培养模式,为企业规模的扩大提供综合应用型人才。本文主要介绍了出口茶叶企业商务英语培训中存在的一些问题,同时提出一些解决这些问题的办法,旨在帮助茶叶出口企业培养更具有国际视野的人才。 相似文献
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兰州市榆中县贡井乡地处榆中北山干旱半干旱地区。贡马井村赢得肉牛专业合作社养殖肉牛316头,近5年来,该合作社以土地入股、流转土地等方式,种植饲用玉米、苜蓿、燕麦等饲草约0.7万亩,年产草及玉米青贮0.4万吨,完全实现了青、粗饲料的自给自足。秋冬季肉牛轮流在玉米、燕麦留茬地放养,节约饲料。牛粪等养殖粪污直接还田,解决了养殖污染问题,"种草养畜"、种养一体化的生态养殖模式基本形成。 相似文献