灵芝lz-8基因乳酸菌表达载体的构建与表达及免疫特性

克隆灵芝Iz-8基因并进行原核表达,通过动物试验检测其生理活性.根据GenBank公布的Iz-8基因的DNA序列设计引物,从灵芝菌丝中提取灵芝总DNA,PCR扩增k-8基因并连接到乳酸菌食品级表达载体pNZ8149,转化乳酸乳球菌NZ3900,于30℃Nisin诱导3h,SDS-PAGE进行蛋白表达分析.将工程菌菌悬液给小鼠灌胃,对其碳廓清试验等免疫指标进行检测.结果表明:扩增到的Iz-8基因序列全长330 bp,构建了原核表达载体pNZ8149-Iz-8,LZ-8蛋白在NZ3900中得到表达.NZ3900/pNZ8149-Iz-8菌悬液对小鼠各项免疫指标有明显的调节作用.     

FMDV P1基因DNA疫苗构建及免疫实验

[目的]构建口蹄疫DNA疫苗[方法]构建以PRV为载体的表达FMDV P1基因的质粒pIESZP1和pUTK3CP1,免疫小鼠并检测了免疫后小鼠的抗体水平.将构建的2个真核表达质粒分别转染Vero细胞,通过PCR、IFA、Western-blot等方法检测目的基因的转录和表达.将正确表达目的基因的DNA质粒肌肉接种3周龄的Balb/C小鼠,采用ELISA和SN方法检测了免疫小鼠体内的抗体水平.[结果]携带有FMDV衣壳蛋白P1基因的DNA质粒能引起小鼠产生特异性的体液免疫反应,两重组质粒诱导小鼠产生抗FMDV的抗体水平无差异.[结论]该研究为含有FMDV P1基因重组PRV以及重组病毒的动物免疫试验以评价基因工程疫苗的免疫效果奠定了基础.     

磺胺二甲嘧啶残留检测免疫传感器的感受器部件研制

试验研究了用于检测磺胺二甲基嘧啶(SM2)残留的免疫生物传感器的最关键组成,即感受器部件的制备方法、最佳检测条件,并对所制备感受器部件的性能进行了测试。利用二醋酸纤维素作为载体支架结构,戊二醛为交联剂,己二胺为制孔剂,制备了最佳条件符合标准的载体膜。采用双盲评分法测定其性能,选取性能良好的载体膜包被SM2抗体制成抗体膜。将酶标抗原和SM2标准品联到抗体膜上,应用溶解氧分析仪测定体系中过氧化氢减少量。结果表明,质控膜和测定膜的电流变化值差异显著(P<0.05),感受器部件反应灵敏,最低检测限达5μg·L-1。     

复方中草药对凡纳滨对虾生长性能和血清非特异免疫因子的影响

以凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei为对象,投喂添加不同水平的复方中草药饲料,研究中草药对凡纳滨对虾生长性能和血清非特异免疫因子的影响。试验共分7组,A—F组饲料中分别添加质量分数为0．5％、0．9％、1．3％、1．7％、2．1％、2．5％的复方中草药,对照组饲料中不添加。饲养试验共进行56d。结果表明：随着复方中草药添加水平的提高,凡纳滨对虾的增重率和特定生长率逐渐增加,仅F组与对照组差异显著（P〈0．05）;饲料系数和成活率各组间均无显著差异（P〉0．05）;增重率与复方中草药添加水平的回归方程为Y=-125．86X^2＋521．93X＋6063（R^2=0．9561）。由方程可知：当复方中草药水平为2．07％时增重率最高;对虾血清中超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶、酚氧化物酶和溶菌酶随着复方中草药添加水平的增加表现出先显著增加然后下降的趋势,E组中4种酶活力均最高;复方中草药对酸性磷酸酶和过氧化物酶活力没有显著影响。     

绵羊精原干细胞移植受体内源性生殖细胞的消除研究

试验拟建立绵羊精原干细胞移植受体内源性生殖细胞的消除技术.将8只5月龄小尾寒羊公羊随机分为4组,各组第2次处理后3周,公羊睾丸活体采样,石蜡切片、HE染色验证处理效果.结果表明,白消安处理公羊可以完全消除内源性精原干细胞和其他生殖细胞.LHRH、LH疫苗处理的公羊,只能使部分精子发生丧失和生殖细胞消除.白消安是精原干细胞移植受体绵羊内源性生殖细胞最有效的消除技术.     

γ-氨基丁酸·黄芪多糖复方对肉雏鸡生长及免疫性能的影响

[目的]研究γ－氨基丁酸和黄芪多糖联合施用对肉雏鸡生长和免疫作用的影响。[方法]选用200只健康肉三黄鸡雏鸡,随机分为复方I、Ⅱ、Ⅲ和黄芪多糖及空白对照5个处理组,试验为期42d,观察γ－氨基丁酸和黄芪多糖复方对三黄鸡雏鸡的生长性能及免疫功能的影响。[结果]基础日粮中添加复方3组均能不同程度地提高雏鸡总增重和平均日增重,降低料肉比,与对照组相比差异显著;复方3组和黄芪多糖组在首免后第14天的ND抗体效价与空白对照组相比差异显著,二免后第7、14天差异极显著;T淋巴细胞转化试验显示,复方3组和黄芪多糖组对4周龄雏鸡细胞免疫功能有增强作用,与空白对照组相比差异显著。[结论]γ－氨基丁酸和黄芪多糖共同添加对于改善和提高肉雏鸡的生长和免疫性能有良好的促进作用。     

应用Dot-IGS快速检测牙鲆腹水病病原的研究

[目的]建立一种简便快速检测迟钝爱德华氏菌的斑点免疫金染色诊断方法。[方法]选用硝酸纤维素膜作固相载体,以胶体金标记羊抗兔IgG,根据棋盘试验,确定Et免疫血清和金标抗体最佳工作浓度,以出现明显清晰斑点者判定为阳性。[结果]迟钝爱德华氏菌呈阳性,温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、河流弧菌、溶藻弧菌、鳗弧菌、腐败希瓦氏菌、产碱普罗威斯登菌、阪崎肠杆菌和大肠杆菌均呈阴性。[结论]Dot—IGS方法简便、特异、快速、结果直观,便于在基层推广使用。     

鱼类感染刺激隐核虫的免疫保护机制

刺激隐核虫病是海水名优鱼类养殖中的常见寄生虫病,鱼类感染该病后,自身会产生一系列的免疫保护反应。笔者综述了刺激隐核虫诱导鱼类发生免疫保护、免疫反应机制以及刺激隐核虫疫苗的研究现状,以期为防治该病提供理论依据。     

沙枣多糖对免疫抑制小鼠的调节作用

[目的]研究沙枣多糖(EAPS)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。[方法]以环磷酰胺(Cy)作免疫抑制剂建立小鼠免疫抑制模型,进行免疫脏器指数的检测、碳粒廓清试验、血清溶血素形成和迟发型超敏反应,探讨沙枣多糖对免疫功能低下小鼠的影响。[结果]沙枣多糖能明显提高正常小鼠脾脏指数、胸腺指数及免疫抑制小鼠脾脏指数;增强正常小鼠和免疫抑制小鼠单核巨噬细胞系统吞噬功能,恢复免疫抑制小鼠迟发型超敏反应,促进溶血素的生成。[结论]沙枣多糖可对抗Cy所致的免疫抑制,明显增强小鼠免疫功能。     

微量元素对动物机体免疫功能的影响

<正>1锌锌是动物机体必需的微量元素之一,参与机体重要的物质代谢过程,对所有生命系统的正常运行都是必要的。锌是生物体内许多酶、蛋白质、核糖等的组成成份或激活因子,参与DNA、RNA、蛋白质、糖类、脂类的代谢,参与细胞免疫和体液免疫,维持动物中枢免疫器官和外周免疫器官的结构和功