牡蛎中GⅡ型诺如病毒巢式RT-PCR检测方法的优化与评价

为了解决目前巢式PCR法检测牡蛎样品中GII型诺如病毒时存在的非特异性扩增、假阴性等问题,本研究对NCBI数据库中在线获得的所有GII型诺如病毒序列进行系统分析,重新设计出针对GII型诺如病毒检测的通用型巢式PCR引物(NG2OF/NG2OR),并从基因型覆盖度、特异性、灵敏度和实际样品检测的稳定性几个方面对新设计的引物进行评估。结果显示：(1)新引物的特异性好,只对GII型诺如病毒进行有效扩增,且不受牡蛎样品本底的影响。(2)新引物灵敏度高,最低可检测至26.4个拷贝。(3)在对92个牡蛎样品进行检测时,新引物的阳性检出率为28.3%,比经典引物高出7.5%。因此,新建立的GII型诺如病毒巢式PCR检测方法在检测牡蛎样品时特异性更强,灵敏度更高,为牡蛎中诺如病毒的检测提供了一种新的、可靠的技术手段。     

养好乳用犊牛的关键

<正>良好犊牛的培育能够提高牛群品质与生产水平,可从牛群中获得健康的个体,是力争实现全活全壮、不断扩大牛群数量的保证。所以养好犊牛,加强这一时期的饲养管理,是提高乳用牛成活率、充分发挥生产性能、获得更高经济效益的关键。     

中药卵黄免疫球蛋白复合制剂防治仔猪大肠杆菌性腹泻

产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)是仔猪腹泻病的最常见病原。该菌引起的仔猪腹泻对仔猪成活率和后期增重都具有严重影响,成为制约养猪业发展的重要疾病。研制用于防治该病的中药卵黄免疫球蛋白复合制剂具有重要的实用价值。本研究用ETEC K88菌株C83907对120日龄待开产蛋鸡进行免疫,收集高免蛋制得特异性卵黄免疫球蛋白粉。将中药提取物、卵黄免疫球蛋白粉、大豆低聚糖按4.5∶4.5∶1.0(质量比)制成中药卵黄免疫球蛋白复合制剂。选用3日龄和21日龄的杜×长×大三元杂交早期断奶仔猪,人工感染C83907大肠杆菌,口服中药卵黄免疫球蛋白复合制剂进行保护试验。结果显示:3日龄仔猪服用中药卵黄免疫球蛋白复合制剂后,平均日增重接近不攻毒对照组(P0.05),但显著高于卵黄免疫球蛋白组、普通卵黄粉组、攻毒阳性对照组和中药组(P0.05);仔猪死亡率中药卵黄免疫球蛋白复合制剂组显著小于卵黄免疫球蛋白组和纯中药组(P0.05)。21日龄仔猪服用中药卵黄免疫球蛋白复合制剂组,平均日增重高于纯中药组(P0.05),卵黄免疫球蛋白组平均日增重显著高于纯中药组(P0.05)。临床应用效果显示,喂以6 g和10 g中药卵黄免疫球蛋白复合制剂组与抗生素治疗组的治愈率差异不显著组(P0.05),卵黄免疫球蛋白组和纯中药组治愈率差异不显著(P0.05);喂以6 g和10 g中药卵黄免疫球蛋白复合制剂组的治愈率均显著优于单一使用纯中药组和卵黄免疫球蛋白组(P0.05)。表明中药与卵黄免疫球蛋白联合应用具有增效作用,为防治产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)引起的仔猪腹泻提供了新途径。     

基于G1赋权法的油气管道应急预案质量评价

在构建油气管道应急预案质量评价指标体系的基础上,鉴于常见的层次分析法(AHP)对指标赋权所存在的不足,采用G1法对各个指标进行权重赋值,给出了应急预案质量评定分值的求取方法、评判等级划分及其不同的应急预案质量完善策略。研究结果对如何评价油气管道应急预案的质量提供了方法指导,同时对应急预案的维护与修订提供了决策支持。     

大豆细胞周期G1/S期阻滞对镉胁迫的应答调控机制

选取对Cd抗性不同的两个大豆品种为试验材料,采用培养皿双层滤纸法培养幼苗,分别添加不同Cd浓度溶液处理,Cd浓度设为0～2.5 mg/L处理4 d,通过对幼苗根尖细胞周期和相关基因表达的研究,旨在探讨Cd胁迫下大豆细胞周期G1/S期阻滞调控的应答机制。结果表明,不同的Cd浓度处理均能引起大豆幼苗根尖DNA的损伤,造成基因组的不稳定性,Cd处理后‘辽豆10号’细胞周期阻滞在G1/S期,而‘沈农豆20’则是阻滞在G2/M期;DNA损伤检验点基因ATM和ATR的表达量与Cd浓度呈明显的倒U型剂量-效应关系;DNA错配修复基因MSH2和MSH6的表达量与Cd浓度呈明显的倒U型剂量-效应关系。Cd胁迫引起DNA损伤被MRN蛋白复合体识别,从而诱导ATM激活,然后ATM通过磷酸化p21抑制CDK在cyclin-Cdk/PCNA复合体中磷酸化,使转录活化因子E2Fa不能脱离Rb控制,失去转录活化因子的作用,从而使细胞被阻断在G1/S期。     

浅谈变频器多段速控制原理

变频器可以实现电动机多段速控制,本文以西门子G120变频器为例,详细介绍了变频器多段速控制的原理及参数设定方法 。     

柴胡皂苷硅胶柱层析分离方法的研究

为探讨柴胡单体皂苷的分离条件,采用超声波提取,正丁醇萃取,硅胶GH柱层析分离,层析检测方法。结果表明乙酸乙酯：95%乙醇（8：2）分离出三个单体化合物,说明硅胶柱层析可用于柴胡皂苷的制备性分离。     

狂犬病病毒核蛋白和糖蛋白基因的克隆及其腺病毒穿梭载体的构建

用狂犬病病毒CVS毒株经小鼠脑腔攻击后从发病鼠脑组织中提取总RNA，用带接头的特异性引物分别扩增出了狂犬病病毒核蛋白(N)基因和糖蛋白(G)基因。将N基因和G基因分别克隆入质粒载体pMD18-T后，对筛选的含有N基因和G基因的重组质粒进行了全基因序列测定和分析。随后将狂犬病病毒N基因和G基因分别从其各自的克隆载体上双酶切消化，同时亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV。经卡那霉素抗性和酶切筛选，最终成功构建了含有N基因和G基因的重组穿梭载体pAdTrack-CMV-N-G。     

欧洲鳗鲡血清免疫球蛋白纯化及其结构分析

应用亲和层析技术提纯欧洲鳗鲡免疫球蛋白（Ig）,并对欧鳗Ig的结构和抗原性进行分析。层析结果表明：Ig蛋白呈现一个锐形曲线,蛋白峰与抗原活性峰高度重叠。SDSPAGE分析表明：欧鳗Ig重链分子量为68 kD,轻链有3条,分子量分别为21 kD、23 kD和26 kD。凝胶电泳结果显示：在非变性非还原条件下,欧鳗Ig有790 kD和350 kD 2条蛋白带,在变性非还原条件下有790 kD、593 kD和350 kD 3条蛋白带。Western-blotting试验证实：兔抗欧鳗Ig能识别欧鳗Ig的多种不同聚合体和Ig的重链,但不能识别Ig的轻链。结论：欧鳗Ig在自然条件下可能以四聚体和二聚体的形式存在,这与其它硬骨鱼的Ig形式有差异。欧鳗Ig链间二硫键不健全,在SDS作用下可解聚产生多种不同分子量的聚合体,首次揭示欧鳗Ig的轻链有3种异型。     

DF_(11G)型机车常见故障原因及应急处理方法

针对DF11G机车型乘务员在处理机车故障时对发生故障的原因研判不全,给安全生产带来隐患的问题,介绍了DF11G型机车常见故障判断方法及发生故障时,尤其是运行途中机车乘务员如何应急处理的有效方法,以提高乘务人员故障处理能力,减少因检修不当造成的机破发生。