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41.
本试验所用的两个亲本均具有春性,一个是合成的B.napus(P1),另一个是双低品种Jaguar(P2)。前—个亲本是用二倍体物种B.alboglabra(B.deracea的一种类型,CC,2n=18)与B.rapa品种黄沙逊(AA,2n=20)杂交后,通过胚培养和染色体加倍而获得的。该品系的染色体记数证实, 相似文献
42.
杏种子与种胚的超低温保存研究 总被引:3,自引:0,他引:3
含水量为6.9%带有内果皮的种子,以-5Cmin^-1速率降至-80℃,放入LN2,在室温缓慢解冻,成活率可达91.5%。去掉内果皮含水量为7.1%的种仁,以上述方式保存,成活率也可达到88.2%。含水量是超低温保存杏种子最重要的因素。研究表明:冰冻保护剂DNSO对杏种子的超低温保存影响不大。含水量为4.8% ̄8.1%去掉子叶的种胚超低温保存后TTC染色成活率为82.8%,并能在MS培养基上发育为 相似文献
43.
44.
哺乳动物体细胞克隆技术是近年来发展起来的高新技术,体细胞克隆绵羊——多利的诞生已引起了世界的轰动,笔者就关于马的体细胞克隆技术、重组卵母细胞的体外构建、激活、培养和应用前景等作一综述。 相似文献
45.
利用远缘杂交创造核果类果树新种质的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
以桃、杏、李、樱桃、杏梅等果树的 1 4个品种为亲本 ,3年来共进行了 80余个组合的远缘杂交试验 ,探讨了核果类果树远缘杂交的亲和性 ,并对远缘杂种幼胚进行了胚抢救。结果表明 ,铃铛花期授粉的坐果率显著高于初花期授粉 ;同一杂交组合 ,正反交坐果率差异显著 ,母本对远缘杂交亲和性影响很大 ,选择自交亲和或自然坐果率高的种或品种做母本容易克服远缘杂交的不亲和性 ;适宜场强的静电场、He -Ne激光处理及60 Coγ射线与He -Ne激光联合处理花粉 ,均能显著提高花粉离体萌芽率 ,用上述处理的花粉进行的远缘杂交坐果率也明显高于对照 ;60 Coγ射线单独处理则降低了花粉离体萌芽率 ,远缘杂交的坐果率也低于对照 ;对远缘杂种幼胚及时地进行胚抢救 ,并诱导形成多丛芽 ,是克服核果类果树远缘杂种不育性的有效方法。研究并筛选出了李、樱桃胚萌发与生长、多丛芽诱导与增殖以及生根培养等最佳培养基配方。目前已将欧洲甜樱桃×中国樱桃、大石早生李×泰安巴旦水杏及凯特杏×总统李等一批核果类果树远缘杂种定植于露地 ,其中欧洲甜樱桃与中国樱桃的种间杂种是国内外首次获得 相似文献
46.
结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP10基因的克隆、鉴定及其原核表达 总被引:3,自引:0,他引:3
以人型结核分枝杆菌 H37RV株基因组 DNA为模板 ,应用 PCR法对 ESAT- 6和 CFP10基因进行扩增 ,产物经纯化后与载体 PMD18- T连接、转化及酶切鉴定 ,亚克隆到原核表达载体 PGEX- 6 P- 1,构建原核重组表达质粒 ,转化入大肠杆菌 BL2 1中 ,以 1mmol/L IPTG诱导 ,进行 SDS- PAGE电泳。结果表明 ,ESAT- 6和 CFP10基因表达的融合蛋白相对分子质量分别为 32 0 0 0和 36 0 0 0 ,与实测相符。重组结核杆菌分泌蛋白 ESAT- 6和 CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下了基础 相似文献
47.
根据环形泰勒虫TaA1272-1株裂殖体表面抗原(TaSP)基因的序列设计了1对引物,用PCR扩增出该基因长为393bp的高免疫原性区片段(SBxp)。将扩增产物连接到pGEM-T Easy载体上,转化入大肠埃希氏菌JM109中进行克隆。随后将重组质粒pGEM-SBxp和表达载体pGEX-4T-1分别以BamHⅠ、XhoⅠ酶切后,将酶切的目的片段SBxp亚克隆到原核表达载体中构建了重组表达载体pGEX-4T-1-SBxp,并将其转化到BL21宿主菌中。提取重组质粒经BamHⅠ、XhoⅠ酶切、PCR鉴定和测序确证后,阳性克隆用IPTG诱导表达。收集不同时间的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western blotting检测。结果,SBxp基因在大肠埃希氏菌中成功表达,其表达产物为分子质量43ku的融合蛋白,该产物能被牛环形泰勒虫阳性血清所识别。 相似文献
48.
phyA基因的克隆及其新型表达载体的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
直接以黑曲霉菌株F246基因组为模板,对植酸酶基因phyA的成熟肽(分子长度为1347bp)进行了PCR扩增,再将PCR产物克隆入pMD18-T质粒,经DNA测序鉴定正确后,亚克隆入表达载体pET30a^ 和pMG36e,成功构建了phyA基因2种新型表达载体。植酸酶phyA基因2种新型表达载体的构建,为进一步获得大量、高活性植酸酶以及研究和开发新型微生态制剂打下了基础。 相似文献
49.
对从含有鸡毒霉形体H3株TM-1基因的大肠埃希氏菌DH5α中提取的质粒,进行EcoR Ⅰ和Sα/Ⅰ双酶切,获得了大约为786bp的目的片段。将此片段与经EcoRⅠ和Sαl Ⅰ双酶切的线性原核表达载体pET-30a-1连接。转化宿主菌BL21(DE3),筛选阳性克隆。提取质粒,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其插入正确,从而构建成了重组表达载体。阳性克隆用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析,证明其分子质量约为29ku;Western-blotting分析表明,该蛋白可被鸡毒霉形体阳性血清识别,具有生物学活性。 相似文献
50.
根据已发表的大肠埃希氏菌F18ab菌毛F亚单位(FedF/ab)的基因(fedF/ab)序列,设计了1对引物,利用PCR技术从大肠埃希氏菌F107/86、YCED1、YCED2、C、D和12F株中分别扩增获得了一段序列,并克隆至pGEM—T载体,获得了重组质粒TF107F、TYCED1F、TYCED2F、TCF、TDF、T12FF。经琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析,6个重组质粒的大小均为903bp,与fedF/ab基因大小一致。其中大肠埃希氏菌F107/86、YCED1、C和12F株的fedF基因序列完全相同;只有YCED2株在第181位碱基处存在1个C→T的无义变异差异,D株在第655位碱基处存在1个T→C变异差异并在氨基酸水平出现1个S→P变异。结果表明,所克隆的序列均为F18ab菌毛F亚单位的基因。 相似文献