重组伪狂犬病病毒SA215(C)株的构建及其对小鼠的免疫原性

为了研制猪2型圆环病毒（PCV2）基因工程疫苗,以伪狂犬病病毒（PRV）基因缺失疫苗株SA215为病毒载体,通过同源重组,构建了共表达PCV2ORF2基因和绿色荧光蛋白基因重组伪狂犬病病毒SA215（C）株。经PCR、Southern blotting、Western blotting等证实SA215（C）构建正确,并能表达具有活性的ORF2基因蛋白和荧光蛋白。SA215（C）在IBRS-2、ST细胞中的增殖滴度与亲本株SA215相比无显著差异,表明外源基因的插入不影响病毒增殖。用SA215（C）免疫BALB/c小鼠10周后检测免疫小鼠PCV2抗体和PRV中和抗体及细胞免疫反应。结果显示,SA215（C）诱导小鼠产生了PCV2和PRV抗体并出现PCV2的细胞免疫反应。另外,以105TCID50的SA215（C）株接种BALB/c小鼠,接种后28d再接种1次,2次接种后2周,用107TCID50PRVFa和PCV2强毒联合进行攻击,结果免疫小鼠抵抗住强毒的攻击,获得了保护;表明该毒株具有很强的免疫原性,为研制安全、有效的PCV2-PRV二价基因工程疫苗奠定了基础。     

上海嘉定区梅山猪育种中心猪伪狂犬病净化的实践与效果

为贯彻农业部和上海市《中长期动物疫病防治规划》中关于原种猪场猪伪狂犬病净化目标的要求,嘉定区动物疫控中心抓住梅山猪育种中心新场建设的有利契机,适时开展了梅山猪的猪伪狂犬病净化工作实践,通过采用"免疫、检测、淘汰"的疫病净化模式,于2017年终于实现了梅山猪育种中心猪伪狂犬病的成功净化。至今猪群仍维持感染抗体阴性,可为上海市乃至全国其他省市的猪伪狂犬病净化工作提供借鉴。     

猪伪狂犬病毒H株gE基因的克隆及序列分析

参照已发表的扩增伪狂犬病毒gI和gE部分基因的PCR方法,合成了一对引物,以PRV H株细胞毒为模板,扩增出一条约850 bp的片段,并进行克隆和测序。然后与GenBank上国内外其它毒株gE基因进行核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性分析,构建了遗传进化关系图。结果表明,PRV H株与其他15株PRV核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.0%~99.2%和93.2%~98.5%,其中与SH株最近,分别为99.2%和98.5%;进化树分析表明,该毒株与目前国内流行的毒株在同一进化分支内,与国外毒株分属不同分支,说明分离的H毒株与目前国内流行的毒株一致。     

禽业信息

正山东动物疫病防控全面起步面对人畜共患病呈逐年上升趋势,被国家农业部列为布病一类地区的山东省人畜共患病的防控工作正全面起步。布病又叫布鲁氏菌病(brucello-sis),是人畜共患病的一种。笔者从山东省动物疫病预防与控制     

石榴皮多酚纳米乳的制备（英文）

[目的]对石榴皮多酚纳米乳的制备工艺进行研究。[方法]采用滴定法结合伪三元相图法,对影响石榴皮多酚纳米乳形成的各种因素进行了研究,优选了表面活性剂、助表面活性剂和油相。[结果]以蓖麻油聚氧乙烯醚(EL-40)为表面活性剂、无水乙醇为助表面活性剂、肉豆蔻酸异丙酯(IPM)为油相,石榴皮多酚纳米乳的最优配方为:石榴皮多酚4.4%(w/w)、EL-40 34.1%(w/w)、无水乙醇17.1%(w/w)、IPM 5.7%(w/w)、蒸馏水38.7%(w/w)。[结论]采用滴定法结合伪三元相图法制备石榴皮多酚纳米乳工艺可行,石榴皮多酚含量高,达到4.4%(w/w)。     

我国狂犬病研究进展

我国狂犬病研究进展蔡宝祥（南京农业大学动物医学院）狂犬病至今仍是一种广泛分布于世界各地严重威胁人畜健康的传染病。根据国际兽疫局编印的《动物健康年鉴》，在有疫情报告的１７６个国家和地区中，１９８９年有狂犬病疫情上报的达１０５个国家和地区。其中非洲有４２...     

抗猪伪狂犬病毒免疫球蛋白(Ig)研制试验与检测结果

本试验用配有佐剂的伪狂犬病毒抗原,按特定基础免疫与强化免疫程序接种关中毛驴,用两次盐析法沉淀提取抗猪伪狂犬病毒Ig,其中对提纯工艺所涉及的pH值,温度,硫酸铵浓度等进行探索比较,继之对单位体积内的蛋白浓度,酶标抗体效价和稀释度进行了标化,同时对质量检测进行了平行性分析,本实验以陕西关中毛驴作为免疫反应供浆动物;研制用于预防和治疗抗猪伪狂犬病免疫球蛋白(Ig)生物制剂获得理想结果[1,4].经8省(区)、市试用后,深受用户和兽医防疫部门的一致好评和欢迎.     

香豆素化合物体内外抗狂犬病病毒的效果

狂犬病是由狂犬病病毒(rabies virus,RABV)引起的一种以侵害中枢神经系统为特征的高度致死性人兽共患传染病,虽然人类尝试了多种方法用于治疗狂犬病,但到目前为止,狂犬病一旦出现临床症状,死亡率仍高达100%,因此,寻找有效的抗RABV药物仍是亟待解决的问题。已有研究显示香豆素化合物(coumarin,CM)具有一定的抗病毒作用,但其对RABV的作用目前尚没有研究。首先以BHK-21细胞为模型,通过SRB、直接免疫荧光(DFA)和病毒滴度等方法,在体外筛选具有良好抗RABV作用的CM,进而从直接灭活、阻滞吸附、不同时间点对病毒抑制效果等方面探讨CM体外抗RABV的作用机制。随后构建RABV感染动物模型,观察筛选获得的CM是否可以挽救病毒感染小鼠。结果显示,CM-3(9种CM分别标记为CM-1～9)可以有效抑制RABV在宿主细胞内的复制,但不能直接灭活病毒,也不能阻滞RABV对宿主细胞的吸附;其在RABV感染48h内均可以显著抑制病毒复制,最高抑制率可达60.0%。另外,结果显示在RABV感染后3～12h内用药,CM-3的抑制效果更为显著,抑制率均为50.0%以上;随后,通过体内试验证实CM-3(50mg/kg)可将感染小鼠的存活率由0%提高至12.5%。综上,结果提示,CM-3可能通过感染后抑制病毒复制的方式发挥抗RABV的作用,而此类结构的CM有可能作为潜在的药物用于狂犬病的治疗。     

构建动物间免疫屏障消除人患狂犬病隐患

狂犬病是由狂犬病毒引起的人兽共患传染病,人的狂犬病为我国甲类法定传染病,病人发病后几乎全部死亡。笔者认为：狂犬病流行病学特点决定了控制动物狂犬病流行是控制人狂犬病疫情的基本策略。关键要建立健全动物狂犬病免疫接种制度,改善犬只免疫现状,在动物间形成有效的免疫屏障。     

带毒传代工艺在狂犬病细胞苗生产中的应用

狂犬病细胞苗的传统生产方法是取长成“ ”的BHK21细胞单层，弃去生长液(血清含量100mL／K)，按1．5万mL细胞培养瓶每瓶40mL的量接毒旋转，使毒液浸润整个细胞面，37℃旋转吸附40～60min，加入2000mL维持液(含血清30mL／L)，37℃旋转培养48h后，调pH至7．2～7．4，继续培养至96～120h，冻毒，收获细胞培养物。传统方法的生产成本高，劳动强度大，种毒使用量大。2004年笔者采用带毒传代工艺生产狂犬病细胞苗，效果较为满意。