结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响

研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡的影响。根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv2031c基因;克隆至慢病毒表达载体plex-EGFP中,经酶切和测序鉴定后,获得plex-Rv2031c-EGFP重组慢病毒载体;将重组慢病毒质粒分别与辅助质粒共转染至293T细胞中,转染48h后收集慢病毒,并侵染RAW264.7细胞;侵染48h时收集细胞,用流式细胞术检测各试验组巨噬细胞的凋亡率;提取细胞总RNA并反转录成cDNA,PCR检测Rv2031c基因在细胞中的表达情况;同时,使用细胞裂解液提取细胞总蛋白,Western blot检测Rv2031c蛋白表达水平。结果表明,成功构建了Rv2031c的慢病毒表达载体plex-Rv2031c-EGFP;构建了过表达Rv2031c的慢病毒Rv2031c-lv;感染Rv2031c-lv的RAW264.7细胞的凋亡率为41.8%,而对照组EGFP-lv感染的RAW264.7细胞其凋亡率为30.0%;PCR结果表明Rv2031c在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达;Western blot结果显示Rv2031c蛋白在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达。该研究成功构建了结核分支杆菌Rv2031c的慢病毒表达载体并验证了其对RAW264.7细胞凋亡的影响,为结核分支杆菌在机体内潜伏期感染的药物研究奠定了基础。     

高产奶牛饲养管理技术

<正>高产奶牛是指泌乳量非常高、乳成分好、乳脂率和乳蛋白含量高的奶牛,整群平均泌乳量高于7500kg以上。同时高产奶牛还应具备健康的体质、旺盛的食欲、发达的消化系统和健全的泌乳器官。1高产奶牛的生理特征1.1采食和反刍时间长由于高产奶牛比低产奶牛所需的养分高,其采食和反刍的时间也相应延长,瘤胃蠕动的次数也随之增加。1.2饮水量大由于高产奶牛的采食量较大,其助消化的用水量也相应加大,而维持泌乳所需的水分随之增加。因而,必须保证高产奶牛每天有足     

浙江省“一标一品”助力共同富裕的路径思考与初步探索

浙江省近年来通过探索“一标一品”融合发展路径,即通过农产品地理标志登记保护、绿色食品质量认定融合发展推动区域特色产业,结合自身发展优势,做好与全省发展规划的有机衔接。本文通过总结梳理近年来浙江省在农业区域特色产业中推进农产品地理标志和绿色食品融合发展的实践做法,以及助力乡村振兴、推动共同富裕的传导机制,分析了在此过程中遇到的主要问题和得到的经验启示, 提出进一步推进“一标一品”融合发展的对策建议。     

黄桃锦香“Y”形整形技术探讨

对湖州黄桃锦香“Y”形整形技术进行调查和研讨。结果表明,“Y”形比开心形整形黄桃成熟早1~3 d,风味甜,可溶性固形物含量14.1%;优果率高,达88.4%,比开心形提高7.3百分点;产量高,667 m²产量1 643 kg,效益提高3 665元。黄桃“Y”形整形管理方便,修剪难度小,通风透光好,病虫害防治、套袋、采摘容易,果实品质好,可在湖州市积极推广。     

缬氨酸影响小鼠C2C12细胞脂肪沉积的研究

畜禽肌内脂肪(IMF)含量影响肉质风味、口感、嫩度、色泽等指标.调节IMF含量改善肉质成为研究重点.通过添加不同浓度(0、0.15、0.30、0.45、0.60及0.75 mmol·L-1)缬氨酸,检测脂肪合成相关重要信号分子SREBP-1c蛋白表达与成熟情况,检验脂滴生成和细胞增殖情况,探究缬氨酸如何影响小鼠成肌细胞(C2C12)胞内脂肪沉积.结果表明,体外培养36 h后,0.45 mmol·L-1缬氨酸处理C2C12,可显著促进SREBP-1c蛋白成熟、表达和细胞增殖,一定程度促进脂滴沉积;添加0.45 mmol·L-1缬氨酸和75μmol·L-1棕榈酸后C2C12细胞中SREBP-1c蛋白含量显著上调,进一步促进细胞内脂质沉积,C2C12细胞增殖未受抑制.综上,缬氨酸可通过正向调节SREBP-1c相关信号通路,参与C2C12细胞内脂肪沉积或转运.研究首次证实缬氨酸可促进小鼠C2C12细胞脂肪沉积及增殖,为进一步探究缬氨酸在脂肪沉积过程中作用提供新见解,也为缬氨酸提高畜禽肉质研究提供基础和依据.     

功能性非编码RNA调控反刍家畜乳脂代谢的研究进展

乳脂既是影响鲜奶质量的关键因素,又是奶牛育种的主要目标性状。为探索乳脂形成规律及其调控的理论和途径,收集国内外最新文献资料,阐述功能性非编码RNA对反刍家畜乳脂代谢的表观遗传学调控。结果表明:1)乳脂合成过程中PPARγ是至关重要的调控因子,在牛上miR-29s、miR-454、miR-34b和miR-27a均与其存在结合位点,分别在启动子区和3’-UTR等位置发挥重要功能,进而影响牛乳腺上皮细胞(BMECs)甘油三酯(TAG)的合成。2)众多调控山羊乳脂代谢的microRNA,其靶基因很多都来自过氧化物酶体增殖物激活受体家族,提示该家族对山羊乳脂合成和分解代谢起着关键调控作用。3)miR-27a目前在反刍家畜牛和羊中均已被鉴定出通过调控PPARγ来抑制TAG的合成及相关成脂基因的表达。4)lncRNA和circRNA调控反刍家畜乳脂代谢机制方面的研究相对较少,主要侧重于lncRNA和circRNA对乳脂的调控是通过microRNA间接作用于成脂基因,对基因的表达具有积极效应。综上,lncRNA、circRNA和microRNA调控乳脂代谢的研究仍在继续,具体的作用机制还有待更深入的研究和探索,进一步为反刍家畜乳脂调控机制研究提供新思路。     

黑麦草替代日粮精料提高猪乳总固形物和乳脂含量

浙江大学动物科学学院陈雪君等，以长嘉母猪为对象．探讨黑麦草替代日粮精料及添加脂肪对母猪产奶量、奶成分的影响。母猪妊娠前期（前90d）用黑麦草替代40％和50％精料，妊娠后期与哺乳期替代率30％，并添加10％的脂肪粉。结果表明：由黑麦草部分替代日粮精料母猪奶产量有降低趋势，但与对照相比差异不显著护〉0．05）；乳成分中乳蛋白、乳脂含黄不受影响，但显著（P〈0．05）降低乳固形物含量。添加脂肪粉虽然显著（P〈0．05）降低了母猪产奶量，但提高了乳总固形物和乳脂含量，其乳蛋白含量不受影响。     

奶牛乳脂降低综合征发病机制研究进展

乳脂是牛奶中受日粮影响最大的成分。乳脂降低综合征的发病机制主要包括日粮因素造成乳脂合成前体物不足和瘤胃氢化异常产物抑制乳腺脂肪酸合成等。本文就乳脂降低综合征发病机制的研究进展进行综述,为充分认识和控制乳脂降低奠定理论基础。     

微生态制剂对奶牛生产性能及乳体细胞数的影响

研究表明,反刍动物在饲喂微生态制剂后对瘤胃发酵环境的改善,增强有益微生物的生物活性,提高机体对饲料的消化利用能力,增强免疫力,提高抗病力、产奶量和乳脂率,促进犊牛瘤胃的发育,提早断奶,防治下痢等有显著效果。     

不同粗饲料组合混合日粮对奶牛泌乳性能的影响

本试验通过给奶牛饲喂不同粗饲料组合的TMR日粮,探讨日粮中不同粗饲料组合对奶牛泌乳性能的影响.结果表明,日粮鲜重的精粗比从30∶70提高到40∶60后,奶牛的干物质采食量有显著地增加（P＜0.05）.随着精料比例增加,其能量水平、蛋白含量和乳蛋白率增加.同时,蛋白含量和产奶量都有所提高.在试验二组中用青贮代替了全贮,提高了奶牛的采食量和泌乳性能.说明,奶牛全混合日粮（TMR）可以提高日粮养分表观消化率、产奶量和改善乳蛋白质水平.青贮饲料的蛋白质的降解和利用更容易被瘤胃微生物降解和吸收,从而提高奶牛的泌乳性能,取得较高的经济效益.