犬乳腺上皮细胞的分离鉴定及培养方法优化

为建立一种快速分离犬原代乳腺上皮细胞的培养方案，本研究旨在从健康泌乳金毛犬的乳汁中分离原代乳腺上皮细胞，接种于两种不同的培养基后传代培养，探讨不同培养基下细胞的生物学特征，提供犬乳腺上皮细胞简单便捷的分离措施及适宜的培养方法。选取泌乳一周的金毛犬在无菌条件下收集乳汁，离心处理后得到乳腺上皮细胞，分别用完全培养基和基础培养基接种培养，经形态学对比观察，间接免疫荧光检测角蛋白8(Cytokeratin 8)表达情况，绘制两种培养基培养下的第3代乳腺上皮细胞生长曲线；探讨完全培养基培养的第6代乳腺上皮细胞的冻存复苏活力。结果表明:1)乳汁分离可得到大量细胞团块，分别接种两种培养基后都会出现“煎蛋样”贴壁细胞，消化传代后两者均有Cytokeratin 8的高度表达；2)接种于基础培养基的细胞前期以聚集在一起的圆形单克隆细胞团块为主，传至第4代仅有少量细胞存活，细胞随着培养时间增加而状态变差，死亡细胞增多；接种于完全培养基的细胞整体呈“鹅卵石铺路样”成片生长，随着传代次数增加细胞状态稳定，细胞生长曲线呈现“S”形；3)完全培养基培养的第6代乳腺上皮细胞冻存复苏后能快速贴壁并分裂增殖。综上，乳汁分离法成功分离犬乳腺上皮细胞，且与基础培养基相比，完全培养基可以更好地维持细胞活性，促进细胞增殖分裂，且不影响细胞冻存后复苏的活力，为后期快速分离犬乳腺上皮细胞提供较优的培养方案。     

围产前期补饲酵母硒对奶牛乳汁代谢物的影响

本研究旨在揭示围产前期补饲酵母硒对牛乳代谢组分的影响，从乳汁代谢物的角度阐述酵母硒的生物学功能。选择20头健康荷斯坦妊娠后期奶牛，随机分为对照组与试验组，每组10头。对照组奶牛饲喂基础饲粮，试验组于预产期前21 d在基础饲粮中添加0.15 g/kg DM酵母硒，分娩当天停止添加。在分娩当天和产后第21天采集2组奶牛的乳汁，基于超高液相色谱-串联质谱技术对乳汁代谢物进行检测。采用主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析和单因素统计分析（t检验、差异倍数）方法分析对照组与试验组在分娩当天和产后第21天乳汁中代谢物的差异性；以变量投影重要度（VIP）>1和P<0.05为条件筛选差异代谢物，并对筛选出的差异代谢物进行聚类分析和通路富集分析。结果表明：补饲酵母硒后，分娩当天的乳汁中共筛选出20种差异代谢物，其中L-苯丙氨酸、α-乳糖、半乳糖-1-磷酸及磷酸羟基丙酮酸等能量相关代谢物显著上调（P<0.05），差异代谢物主要参与的代谢通路为半乳糖代谢[通路拓扑分析的影响值（Impact值）>0.1且P<0.05]；分娩第21天的乳汁中共筛选出20种差异代谢物，其中白三烯A4...     

母猪乳汁不足的信号和催乳方法

在养猪生产中，母猪会出现乳汁不足的现象，这会严重影响仔猪的健康和生长发育，甚至出现弱仔、死亡。本文介绍一些行之有效的催乳方法，供各猪场参考。