单细胞测序对绒山羊毛乳头细胞的鉴定

【目的】 基于单细胞测序技术探究绒山羊毛乳头细胞标记基因,优化毛乳头细胞体外鉴定的方法,为研究绒山羊毛囊发生发育提供良好的细胞模型。【方法】 运用Seurat单细胞分析法分析陕北白绒山羊胚胎期60、90、120 d皮肤组织的单细胞测序数据。原始数据经质控、过滤、标准化后,采用UMAP方法进行数据降维与聚类分析。通过对比已报道的毛囊相关标记基因,获得完整绒山羊毛囊细胞类群谱系信息。通过基因差异表达分析,筛选绒山羊毛乳头细胞特异性标记基因。利用免疫荧光试验鉴定标记蛋白在绒山羊皮肤组织中的表达与分布情况,进一步筛选毛乳头区域特异性表达蛋白。体视镜下机械分离完整绒山羊毛囊,采用酶消化法分离绒山羊毛乳头区域并在体外培养至细胞分离,最终通过差速贴壁法纯化细胞。待毛乳头细胞纯度较高时,利用免疫荧光试验验证候选标记蛋白在分离细胞中的表达情况。【结果】 从单细胞水平分析了绒山羊毛囊发生过程中涉及的关键细胞转录信息,成功获得绒山羊皮肤中的17个主要细胞类群信息,鉴定出包括真皮细胞谱系、表皮细胞谱系、毛乳头细胞、毛干细胞、内根鞘细胞等绒山羊皮肤结构关键细胞类群,以及周皮细胞、巨噬细胞、肌肉细胞等其他功能细胞类群。筛选获得毛乳头细胞特异性基因427个,包括SOX2、FGF7、APOD、BMP3、HHIP、HEY2和SPON1等,这些基因在绒山羊毛乳头细胞中的表达丰度远高于其他细胞类型,被认为是毛乳头细胞特异性标记基因。组织免疫荧光试验进一步证明SOX2、FGF7与APOD等蛋白在绒山羊毛乳头区域内特异性表达,可用于皮肤组织中绒山羊毛乳头细胞的定位。此外,本研究在成功分离单根绒山羊次级毛囊的基础上,实现了绒山羊毛乳头区域的贴壁培养,成功观测到大量细胞从毛乳头区域逐步迁移分离的过程。细胞免疫荧光试验结果显示SOX2、FGF7与APOD均在绒山羊毛乳头细胞中表达,且SOX2阳性细胞约占毛乳头细胞总量的76%左右,而FGF7和APOD阳性细胞则占98%以上。结合绒山羊皮肤组织免疫荧光定位结果,SOX2、FGF7与APOD等标记可用于鉴定体外分离培养的绒山羊毛乳头细胞。【结论】 利用单细胞测序技术描述了绒山羊主要皮肤细胞的转录组信息,筛选出毛乳头细胞特异性表达基因。经免疫荧光试验证实,单细胞测序鉴定标记基因的方法简单高效,且具备较高准确率。筛选的SOX2、FGF7与APOD不仅为绒山羊毛乳头细胞体内定位提供了有效的标记,而且为多标记鉴定毛乳头细胞提供可能,更为进一步研究毛囊发育相关基因的功能及调控机制奠定重要基础。     

减少鸡病从“水”入手

<正>在养殖的过程中,关注饲料的质量,这是很正确的,只有丰富而全价易消化的饲料才能有更高的产能。但是我们多数忽视了健康养殖的另一重要营养——水,若水源卫生不佳,饮水系统的二次污染,则直接威胁鸡群的健康。因此,减少疾病,不要忽视"饮水"的质量。     

辽宁绒山羊皮肤石蜡切片H.E.染色方法改进

辽宁绒山羊是我国独有的山羊品种,其绒毛和肉都具有很高的价值,堪称我国特有的瑰宝。通过改良辽宁绒山羊品种从而提高产绒质量更是这几年的重要课题。若想改良辽宁绒山羊绒毛的质量则首先要知道绒毛的结构特点,制作石蜡切片是观察研究的方法之一。哺乳动物的毛（发）是由毛囊发育生长的皮肤衍生物。     

仔猪的饲养管理措施

仔猪饲养管理分两个阶段四个关键时期,两个饲养管理阶段是哺乳仔猪饲养管理阶段和断乳仔猪饲养管理阶段,四个关键时期是初生关键时期,开食、补料关键时期,断乳前独立生活准备时期,断乳仔猪饲养时期。1哺乳仔猪饲养管理阶段1.1哺乳仔猪生长发育和生理特点（1）生长发育快、物质代谢旺盛。仔猪出生后强烈生长,物质代谢旺盛,对营养物质的需要,无论在数量上还是质量上的要求都高,对营养不全的反映敏感。因此供给仔猪以全价的平衡日粮十分重要。     

奶牛乳房炎的治疗

正(一)乳房炎的预防措施1.加强饲养管理。对牛舍和牛体要保持清洁,牛床应有干净的垫草,牛舍及运动场要规范化,经常清扫、消毒,对褥草和粪便要做到无害化处理,可有效保护乳房和提高产奶量。2.规范挤奶。挤奶时卫生条件差和操作不规范,均可造成奶牛乳头的损伤,使乳头感染。要认真做好乳房和挤奶用具的消毒,乳房的消毒可采用乳头药浴法,常用药品有4%次氯酸钠、0.3%~0.5%洗必     

乙撑亚胺和亚硝乙脲不同浓度药液对当年鲤养殖指标的影响

<正> 材料和方法本试验是于1976年在哈萨克的一个渔场进行的。试验分二批进行,以当年鳞鲤为材料,取自2尾雌鱼和2尾雄鱼。第一批试验是将成熟的精液分别在浓度0.005%、0.0025%、0.0012%和0.0006%的乙撑亚胺(Зти-лнимин)药液中浸浴60分钟。第二批试验     

浅谈鸡新城疫病的预防和控制

<正>鸡新城疫又叫亚洲鸡瘟,它是一种由病毒引起的高度接触性急性传染病。主要特征为呼吸困难、下痢、神经机能混乱、黏膜和浆膜出血。主要侵害鸡和火鸡,其他禽类也可感染。1.病原鸡新城疫病的病原是新成疫病毒,它属于副黏病毒。对热抵抗力比较强,通常100℃1min,37℃几天后乃具有感染性。同时还耐低温。温度越低生存时间越长,对消毒液抵抗力越弱。2.流行特点火鸡、鹌鹑等禽类对本病都有易感性,其     

奶牛乳房炎的预防及防治

乳房炎为奶牛常见疾病之一,也是对奶牛生产危害性最大的一种疾病。据统计,临床性乳房炎占奶牛总发病的1/3,因其造成奶产量的下降,病乳废弃,严重者,乳区化脓、坏疽、萎缩,以致失去泌乳能力,其淘汰率占总淘汰的9%～10%,给养殖场和农户     

新型节水养猪专利技术问世

畜禽养殖场是用水大户和污染大户,随着新型节水养猪专利技术的问世,这一局面有望得到改变。北京清泉湾养猪有限公司高级顾问万熙卿和湖北荆州六福泉畜牧公司董事长苏泽民,历时近两年合作研究的猪用节水饮水装置日前获得国家知识产权局实用新型专利的授权通知(专利     

奶山羊如何高效养殖

(一)高产奶山羊辨别1.根据乳房形状判断。乳房紧缩型,乳房紧小呈球状,乳头短而细小、不便挤奶、产奶量低;松弛型,乳房松弛下垂到腓节或腓节以下、乳头短粗与乳房边限不明显、形似一个长袋,容积大、产奶量较高,但山羊行走不便、易被树茬划破而引起乳房发炎;圆大型,乳房丰满且对称、前面延伸到腹部、中间充塞于两股之间,后面突出于后肢的后方,上与腹部紧贴,乳头大小适中、稍伸向前方、乳头与乳房有明显界限,这是较理想类型。