龟鲍曼不动杆菌和摩氏摩根菌双重PCR诊断方法建立

为建立龟源致病性鲍曼不动杆菌和摩氏摩根菌双重PCR诊断方法,应用鲍曼不动杆菌rpoB基因和摩氏摩根菌gyrB基因的特异性引物,对单重和双重PCR反应的退火温度、引物浓度、MgCl2浓度、dNTP浓度等进行优化.试验结果显示,鲍曼不动杆菌rpoB基因和摩氏摩根菌gyrB基因引物分别进行PCR扩增后,均获得特异性条带,与预...     

中药对鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验

为了探讨中药对鲍曼不动杆菌的体外抑菌效果,筛选出针对鲍曼不动杆菌具有较好体外抑制作用的中药。以临床分离的鲍曼不动杆菌为试验菌株,试验采用水煎法提取中药的有效成分,牛津杯法测定中药对该菌的抑菌圈大小,肉汤二倍稀释法测定中药对该病原菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,鲍曼不动杆菌对苏木、连翘、夏枯草、乌梅、紫花地丁高度敏感;鲍曼不动杆菌对黄芩和青皮中度敏感;鲍曼不动杆菌对诃子、女贞子、板蓝根、苦参、马齿苋、桔梗、防风、郁金香、蒲公英、厚朴、香附、荆芥、石榴皮、艾叶、知母、龙胆草、栀子耐药;苏木对该菌的抑菌效果最好,MIC和MBC均为31.3 mg/mL。本结果为开发中药相关产品以及防治由鲍曼不动杆菌引起的细菌性疾病提供了参考。     

龟致病性维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌双重PCR检测方法的建立

应用2对特异性引物,通过对反应条件和体系的优化,成功建立了能快速检测维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌两种病原的双重PCR方法。研究结果表明,该方法特异性强,仅对龟鳖维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌有扩增,而对其他龟鳖常见病原无扩增;该方法对维氏气单胞菌最低检测核酸质量浓度为1.75×10-3 ng/μL,对鲍曼不动杆菌最低检测核酸质量浓度为3.96×10-3 ng/μL,检出率较传统检测方法高。该研究所建立的双重PCR方法灵敏度高、特异性好,可为临床龟鳖维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌感染的诊断和流行病学调查等提供帮助。     

河南省五例鸡奇异变形杆菌和鸡鲍曼不动杆菌的敏感性检测

2011年从64株河南省不同地区养鸡场的鸡源致病菌中分离出1株鸡鲍曼不动杆菌和4株鸡奇异变形杆菌,并采用微量稀释法测定氨苄西林、头孢噻呋、庆大霉素、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星等13种药物对受试菌的最小抑菌浓度。结果显示：鸡源奇异变形杆菌对药物的敏感性有差异,其中Cpro菌对13种受试药均高度敏感;Epro菌仅对氨苄西林耐药;Apro菌已对多西环素、恩诺沙星和加替沙星耐药;而Dpro菌已同时对庆大霉素、氟苯尼考、恩诺沙星和加替沙星耐药。鸡鲍曼不动杆菌对多数药物的敏感性较高。仅对头孢哌酮呈现中介．对氟苯尼考和恩诺沙星呈现耐药,说明尽管目前兽医临床鲍曼不动杆菌对常见药物的敏感性较高．但仍应引起人们的重视．     

两株鱼源琼氏不动杆菌的分离、鉴定和耐药特性分析

为探明史氏鲟感染性疾病的病原,并为生产中防治该病提供依据,本实验自患病鱼分离到2株细菌SX01和SX02,对2分离株开展了人工感染实验、形态学和理化特性检测及分子生物学鉴定,并用PCR法检测了部分耐药基因。研究结果表明,分离株对异育银鲫具有一定的致病力,96 h的半数致死浓度LD₅₀为1.02×10⁹ cells/mL;革兰氏染色阴性,球杆状,氧化酶实验、动力阴性,接触酶阳性,形态学和理化特性符合不动杆菌属的特征;其16S rRNA基因序列与已发表的琼氏不动杆菌完全同源,RNA聚合酶β亚单位编码基因rpoB序列与琼氏不动杆菌相应序列同源性达99%以上,确认2分离株为琼氏不动杆菌;自分离株中检测到了广谱性β-内酰胺酶编码基因TEM-1和氨基糖苷类乙酰胺转移酶基因Aac(3)Ⅱ,解释了该菌对2类抗生素药物的耐受性,提示了该菌可能来源于临床菌的污染,养殖行业和食品卫生中必须引起重视。     

牛蛙腐皮病病原菌分离鉴定及药敏试验

[目的]明确浙江嘉善某养殖场引起牛蛙腐皮病的致病菌,并探究益生菌与牛蛙腐皮病病原菌间的相互作用,为今后利用益生菌防控牛蛙腐皮病的发生提供技术支持.[方法]通过常规的细菌分离纯化、人工回归感染试验、生理生化特性鉴定及16S rDNA序列扩增,确定引起牛蛙腐皮病的致病菌;根据药敏试验筛选抗菌药物,并从生物防控的角度探究枯草芽孢杆菌等益生菌与致病菌间的相互作用.[结果]从患病牛蛙的内脏及体表溃烂处共分离获得9株疑似致病菌株,经人工回归感染试验确定菌株NWt-2为引起牛蛙腐皮病的致病菌;综合其形态学特征、生理生化特性及分子生物学鉴定结果,可确定菌株NWt-2为布韦不动杆菌(Acinetobacter bouvetii).菌株NWt-2对丁胺卡那、庆大霉素、哌拉西林、头孢氨苄和硫酸阿米卡星等5种抗菌药物高度敏感,对青霉素、复方新诺明、诺氟沙星、氟苯尼考、复方磺胺嘧啶、盐酸林可霉素和盐酸大观林可霉素等7种抗菌药物不敏感(耐药).浓度为105 CFU/mL的枯草芽孢杆菌和紫色杆菌对菌株NWt-2有一定的抑制作用,抑菌圈直径分别为1.45±0.46和0.97±0.38 mm.[结论]布韦不动杆菌是引起浙江嘉善养殖牛蛙发生腐皮病的致病菌,可选用丁胺卡那、庆大霉素、哌拉西林、头孢氨苄和硫酸阿米卡星等抗菌药物进行防治.鉴于枯草芽孢杆菌对布韦不动杆菌具有一定的抑制效果,在当前病原菌对抗菌药物普遍存在耐药性的情况下,选择枯草芽孢杆菌等益生菌进行生物防控具有可行性.     

一株高效石油降解菌的筛选及降解能力初探

为了有效降解石油开采过程中产生的含油污泥中的石油,达到油泥资源再利用的目的,选育高效石油降解菌,为石油污染生物修复提供菌种资源和技术支持。通过连续富集传代培养,从页岩油泥中分离出一株高效石油降解菌YH1-1,经过形态学、生理生化以及16S rRNA序列分析,鉴定YH1-1为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)。该菌在温度30℃、初始培养pH值7.0条件下降解质量浓度50 g/L的油泥,经气相色谱(GC)分析,28 d降解率可达87%,说明该菌可有效降解石油烃。因此,醋酸钙不动杆菌YH1-1在开发研制石油污染生物修复菌剂方面有较好的应用前景。     

井冈霉素、多菌灵和不动杆菌A2混用对水稻纹枯病病菌的抑制作用

为探索能够高效防治水稻纹枯病的方法,以水稻纹枯病菌强致病菌株A111为供试菌株,通过室内平板试验测定井冈霉素、多菌灵和不动杆菌A2混用对水稻纹枯病菌的抑制作用。结果表明,井冈霉素对水稻纹枯病菌的毒力较大,其EC_(50)为0.026 4 mg/L;多菌灵的EC_(50)为0.183 5 mg/L。研究发现,井冈霉素处理后的水稻纹枯病菌菌落呈不规则形态生长,菌丝和菌核的干质量随药剂浓度增加明显下降;而多菌灵处理后的水稻纹枯病菌菌丝生长缓慢,菌丝和菌核的干质量降低程度低于井冈霉素。而井冈霉素、多菌灵与不动杆菌A2混用后对水稻纹枯病菌的抑制作用均高于单独使用时的效果。由此可见,将井冈霉素和多菌灵与不动杆菌A2混用能够更好地防治水稻纹枯病,为杀菌剂和生防菌的混用奠定了理论基础。     

一株异养硝化细菌的分离鉴定及其在垃圾渗滤液中的应用

【目的】针对垃圾渗滤液废水中存在氨氮含量高、脱氮效率低等问题,从垃圾渗滤液生化反应池的活性污泥中富集、分离出 1 株能降解氨氮的异养硝化菌。【方法】对所分离菌株进行形态学观察、生理生化鉴定、16S r DNA 基因序列比对和构建系统发育树;同时研究不同接种量、培养基初始 p H、温度、摇床转速以及碳源种类等因素对该菌株脱氮效果的影响;将该菌株接种于垃圾渗滤液中,对其异养硝化作用进行评估。【结果】所获得的异养硝化菌为不动杆菌属 (Acinetobacter sp.),命名为 XJ-1。经过单因素优化,菌株 XJ-1 能在以乙酸钠为唯一碳源的培养基中生长,并进行异养硝化,当接种量为 6%、初始 p H 为 7.5、温度为 30 ℃、摇床转速为150 r/min 时,菌株 XJ-1 的氨氮降解率最高;将菌株 XJ-1 接种到灭菌后的垃圾渗滤液中,在最佳条件下培养 96 h,氨氮(NH₄⁺-N)的初始浓度由 545.91 mg/L 降至 317.58 mg/L,降解率达 62.82%,且中间产物亚硝态氮(NO₂^-     

芦荟仙人掌为何卖不动

笔者日前到广东省梅州市梅县梅南镇轩坑村“彩虹特色农业示范园”采访,这里引种有大片优良品种的新型蔬菜——芦荟和仙人掌。目前已到了收获的时节,河滩沙地上到处是翠绿茁壮的芦荟和仙人掌,很有特色和情调。可是,“彩虹”的老板谢瑞彩面对这样的特色情调却一点也高兴不起来,因