1株同时携带tet(X6)和tet(X3)的禽源印地不动杆菌比较基因组学分析

为了研究动物园禽类散养场分离菌对替加环素敏感性及其耐药机制,2019年从某市动物园禽类散养场采集的1只健康珍珠鸡粪便样品中分离获得分离菌,通过常规细菌分离纯化、革兰染色镜检和全自动细菌鉴定仪鉴定,以及序列比对确定该菌株为印地不动杆菌(LYS68A)。采用微量肉汤稀释法测定菌株对8种抗菌药物的敏感性,并通过全基因组测序和比较基因组学分析该菌株的耐药特征。药敏试验及PCR检测发现,尽管该菌株对多西环素和替加环素高度敏感,但却携带对替加环素耐药的tet(X3)基因。进一步全基因组测序发现菌株LYS68A未携带耐药质粒,其染色体上共携带tet(X3)、tet(X6)、floR、sul1、aadA2、dfrA12、aph(3’)-I、mphE和sul2等9个耐药基因,构成了一个29 252 bp的多重耐药区并以一个整体插入到基因组tRNA-Gly的上游。耐药基因tet(X6)的基因环境(hp-tet(X6)-α/βhydrolase-GMP synthase)与2020年在1株奇异变形杆菌中发现的tet(X6)的基因环境同源性高达99%,推测其是通过ISVsa3和假定蛋白(hp)之间的热点区域(...     

青海野生中国沙棘根际解钾菌的分离、鉴定及其促生能力比较

【目的】从青海野生中国沙棘(Hippophae rhamnoides subsp.sinensis)根际土中筛选出具有解钾能力的菌株,并比较其促生能力,为高原地区高效生物菌肥的研发提供依据。【方法】利用纯化培养方法从中国沙棘根际土中分离解钾菌;通过形态观察、生理生化检测及16S rDNA序列比对鉴定菌株;对解钾菌的解有机磷、解无机磷、解钾、降解纤维素的能力进行测定;将解钾菌接种于空心菜幼苗以验证其促生效果。【结果】K15、K50和K65三株解钾菌均为乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)。培养3 d后,3株解钾菌溶解有机磷的浑浊圈直径为3.75～7.13 mm,解有机磷菌液中磷的质量浓度为5.12～11.33μg·mL^-1;溶解无机磷的透明圈直径为3.25～5.31 mm,解无机磷菌液中磷的质量浓度为3.39～6.63μg·mL^-1;解钾的黄色光圈直径为17.53～25.17 mm,解钾菌液中K⁺质量浓度为4.87～7.15μg·mL^-1;降解纤维素的透明圈直径为8...     

一株分离自太湖有机聚集体上的有机磷降解细菌的鉴定及其降解特性研究

水体中磷的循环与再生依赖于微生物的分解作用,因此对水体中有机磷分解细菌的研究是弄清水体磷循环的关键所在.本研究从太湖有机聚集体上分离纯化出一株能对有机磷(卵磷脂)进行降解的菌株,命名为pjj-1.从形态、生理生化、Biolog和16S rDNA序列等方面,对该有机磷降解细菌pjj-1进行了鉴定.结果显示,其为不动杆菌属中的琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii),该菌株与已报道琼氏不动杆菌的16S rDNA核苷酸序列有99.5%的同源性.对其降解有机磷特性的研究结果表明,该菌株在pH=7.5、温度30℃、透气性好的条件下表现出对卵磷脂有较好的降解性能.在pH中性、30℃条件下该菌株对不同形态有机磷的降解速率分别为:甘油磷酸钠(0.045 mg·L-1·d-1)卵磷脂(0.019 mg·L-1·d-1)微囊藻残体(0.011 mg·L-1·d-1),表明该菌株对水体中的有机聚集体存在相当的分解能力,对小分子有机磷的降解性能更为明显.     

坚持扶贫开发不动摇

10年扶贫开发使桓仁县发生了巨大的变化。扶贫开发体现了人间的真情和社会主义大家庭的温暖，激发了桓仁人民改变家乡面貌的热情和斗志。扶贫开发密切了党群、干群关系，党和政府的形象在广大农民中进一步树立起来。实践证明，扶贫工作是城乡结合，消灭贫富差距，构建和谐社会的一个主要措施。必须坚持扶贫开发工作不动摇，落实中央扶贫政策不动摇。     

下呼吸道不动杆菌感染47例临床分析

目的：观察不动杆菌下呼吸道感染的临床特点、危险因素和对抗生素的敏感性。方法：回顾性分析47例患者的临床资料。结果：47例中36例（76.6％)为60岁以上患者，43例(91．5％)患有基础病，37例(78．7％)为院内感染。感染的危险因素是患有各种基础病、免疫功能低下、各种侵入性操作、不合理使用抗生素等。药物敏感试验结果显示，敏感率大于50％者仅有亚胺硫霉素、氟喹诺酮类及阿米卡星。结论：不动杆菌下呼吸道感染，多发生予60岁以上患者，常患有各种基础病，以院内感染为主，细菌时药现象严重，应合理使用敏感性抗生素。     

鱼源致病菌皮特不动杆菌Ap-W20的全基因组序列及其毒力特征分析

皮特不动杆菌是一种新兴的鱼源致病菌,为了对该菌的致病机理进行研究并为该菌引起的鱼类疾病防治提供技术储备,实验选取皮特不动杆菌菌株Ap-W20进行了全基因组测序,并对其毒力特征进行了分析。结果发现,Ap-W20全基因组序列总长为4 399 705 bp,GC含量为38.78%,共预测到4 230个编码序列(CDS),存在4个质粒,GenBank数据库登录号为CP027658～CP027662。ANI分析结果证实,Ap-W20属于皮特不动杆菌,且ApW20与已知人源皮特不动杆菌AP₈82(96.69%)和环境源皮特不动杆菌PHEA-2(96.55%)相似度较高。Ap-W20与AP₈82、PHEA-2的比较基因组学分析发现,Ap-W20中的基因岛、前噬菌体和质粒数量最多,这很可能与它们各自的分离环境和致病力有关。通过与毒力因子数据库(VFDB)比对,在Ap-W20全基因组中预测到286个毒力基因,主要与黏附和抗吞噬等有关。Ap-W20中还存在Ⅰ、Ⅱ和Ⅵ型分泌系统、多套双组分调控系统以及细菌素合成基因簇等,表明鱼源皮特不动杆菌可能存在复杂的致病机制。...     

两株不动杆菌属细菌的鉴定和耐药特性

采用常规方法对从海洋环境中分离到的两株多重耐药性细菌--JS12和D7012进行分离培养,以16S rDNA序列、形态学特征、培养特征和生理生化特征进行分类鉴定;用39种抗生素药物进行药敏试验,并使用碱变性法提取质粒DNA.结果JS12被鉴定为Acinetobacter johnsonii;D7012被鉴定为Acinetobacter sp.,在进化树中与Acinetobacter baumannii亲缘关系最近,但16S rDNA序列同源性未达到种的水平.39种抗生素中,JS12耐药16种,D7012耐药29种;它们都含有质粒DNA,大小约为5kb.来自海洋环境的非临床多重耐药株警示了滥用抗生素的严重后果,同时可以作为模型,提供耐药基因定位及耐药机制多样性的新视野.     

大豆卵磷脂和乐果有机磷降解菌的分离鉴定及酶活性比较

【目的】明确2株有机磷降解菌Yj2和Yj3对大豆卵磷脂和乐果有机磷的降解特性及酶活性。【方法】利用16S r DNA鉴定从大豆土壤中分离得到的Yj2和Yj3菌株,在菌株最佳生长条件下,测定了不同磷源时菌体的酶活性并分级纯化了有机磷降解酶。【结果】Yj2为醋酸钙不动杆菌Acinetobacter sp.,其最佳生长碳源为葡萄糖,氮源为硫酸铵,p H为8;Yj3为芽孢杆菌Bacillus sp.,其最佳生长碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,p H为9。大豆卵磷脂为磷源时,Yj3的菌体生长情况稍优于Yj2。乐果为磷源时,Yj2的菌体生长情况稍优于Yj3;72 h内Yj2酸性和碱性磷酸酶活性整体高于Yj3,而有机磷降解酶活性低于Yj3。硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析分别从Yj2和Yj3菌体中成功分离纯化了有机磷降解酶,SDS-PAGE结果显示纯化的蛋白均为单一条带。Yj2硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的7.77倍,硫酸铵沉淀为粗酶的1.35倍。Yj3硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的5.07倍,硫酸铵沉淀为粗酶的1.53倍。【结论】菌株Acinetobacter sp.Yj2和Bacillus sp.Yj3都具有降解大豆卵磷脂及乐果有机磷的特性,对有机磷降解起主要作用的是酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及有机磷降解酶,它们在2株菌株对大豆卵磷脂和乐果降解过程中所起的作用有明显差异。可从Yj2和Yj3菌体分离纯化获得提纯倍数较高的有机磷降解酶蛋白。     

黑山羊醋酸钙不动杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为确诊南宁某养殖户黑山羊死亡的病因,取病死黑山羊的肝、脾和心血进行了细菌分离培养。通过形态学鉴定、生化试验、16S r DNA测序分析、小鼠攻毒试验、药敏试验和耐药基因检测等方法,对分离到的疑似致病菌进行鉴定及药敏特性观察。结果显示,分离菌为醋酸钙不动杆菌,可引起80%的小鼠死亡(4/5),表明该分离菌株对小鼠有较强的致病性。药敏特性发现该菌对青霉素类、头孢菌素类、呋喃类等4种抗生素耐药,对磺胺类、氯霉素类及多粘菌素类等5种抗生素呈中敏;对喹诺酮类、氨基糖苷类及大环内酯类等9种抗生素敏感。检出磺胺类、四环素类及氯霉素类等的14个耐药基因。结果表明,分离的醋酸钙不动杆菌毒力较强,有多重耐药性,对养殖业有一定的危害,要引起重视。