应用生物素标记的NDV－cDNA探针检测感染尿囊液中NDV－RNA的初步研究

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＮＤＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体──Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后,即成ＮＤＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＮＤＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ,而不与ＩＢＤｖ－ｄｓＲＮＡ、ＡＩＢｖ－ｓｓＲＮＡ、ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ－ｄｓＤＮＡ,ＦＰＶ－ｄｓＲＮＡ及ＡＩＬＶ－ｄｓＤＮＡ发生交叉杂交反应。试验结果表明：尽管该探钎含有编码Ｆｏ蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把ＮＤＶ的强、弱毒株区分开。这说明ＮＤＶ强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对ＮＤＶ来说具有特异性,这就为ＮＤＶ的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。     

猪链球菌快检法通过鉴定

一种只需4小时即可知道结果的猪链球菌病2型的检测方法——猪链球菌多重PCR检测法，在京通过专家鉴定。这标志着我国已经掌握猪链球菌的快速检测方法。该方法把检测时间由原来的4天减少到4个小时，它由中国检验检疫科学研究院和江苏检验检疫局联合攻关研制。     

荧光PCR快速诊断一起新城疫

2005年1月底．广东省某规模养殖场的鸡出现了张口喘气、呼吸困难，有呼噜声、咳嗽，排黄绿色粪便等症状．部分鸡还有神经症状。发病约450只．发病率为1．2％。三天后鸡只陆续出现死亡．两天内死亡50只左右。解剖病死鸡，可见：喉头、气管粘膜明显出血，小肠轻度炎症。回肠、直肠、泄殖腔粘膜出血。临床无法确诊。经实验室快速诊断．为新城疫感染。     

牛传染性鼻气管炎的诊断与综合疗法

牛传染性鼻气管炎是牛的一种急性、热性、接触性传染病。其特征是鼻道，气管粘膜发炎．出现发热．咳嗽．流鼻液和呼吸困难等症状．有时伴发结膜炎．阴道炎．龟头炎．脑膜炎或肠炎．也可发生流产。本病呈世界性分布．其病原体是疱疹病毒科的牛疱疹病毒Ⅰ型。由于本病目前缺乏特效药物．病畜死亡率较高．给养殖业造成重大的经济损失．笔者在实践中，根据中医理论对本症进行辩证论治．取得了较好的疗效。     

正确使用疫苗要注意的问题

(一)免疫对象与使用的疫苗应相符如鸡新城疫(ND)Ⅰ系苗一般用于2月龄以上鸡或经ND弱毒苗初免后的鸡。不看免疫对象，随意使用疫苗，不仅造成疫苗的浪费，有时还可能产生一些意想不到的不良后果。     

中国内地部分地区发牛亚洲Ⅰ型口蹄疫疫情

2005年5月27日，中国国家首席兽医官、农业部兽医局局长贾幼陵在国务院新闻办举行的新闻发布会上介绍了中国内地亚洲Ⅰ型口蹄疫疫情情况。2005年4月上旬，山东省泰安市岱岳区和江苏省无锡市惠山区两个奶牛场相继发生亚洲Ⅰ型口蹄疫疫情，农业部已于5月13日向联合国粮农组织和世界动物卫生组织进行了通报，我国国内媒体14日已有相关报道。5月上旬，     

乳牛布鲁氏菌病病原DNA快速检测技术的研究

在国内首次建立了乳牛原乳中布鲁氏菌外膜蛋白(OMP)25ku基因套式聚合酶链反应(nested—PCR)检测技术。结果显示，本方法的特异性好，只能扩增布鲁氏菌DNA，而不能扩增同样能引起乳牛流产的鹦鹉热衣原体、弓形虫、胎儿弯杆菌DNA；乳样的检测灵敏度达50CFU／mL，重复试验35次，可重复性和稳定性均十分理想；对4批331头凝集试验阳性(24份)或阴性(307份)乳牛的乳样用本方法检测，符合率为100％。在48h内即可获得诊断结果。本方法同样可用于血液或其他流产病料中布鲁氏菌DNA的检测。     

PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株人工单独感染3头3周龄仔猪，并用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2头3周龄仔猪，每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现，并用HerdChek IDExx试剂盒测其血清抗体。PRRSV PCV2联合感染猪分别在感染后1、3周剖杀，PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1、2和3周剖杀，对全部试验猪的肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM)．用PAM进行抹片，同时用肺组织直接进行触片做间接免疫荧光(IIF)检测。结果表明，用所获得的3株单克隆抗体均检测到人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外，用IIF检测7头临床疑似PRRS病猪的PAM抹片。其中沭阳县的2头猪呈现阳性反应；对这2头猪的肺组织进行病毒分离。在盲传到第4代时Marc-145细胞上产生明显的细胞病变，进一步证实用所获得的3株单克隆抗体检测临床样品的结果准确而可靠，且获得的3株单克隆抗体均可通过IIF用于检测猪肺组织中的PRRSV抗原。     

安徽省鸡免疫抑制性疾病的流行病学调查

采集了安徽省6个主要养鸡地区65群鸡的185只病鸡共986份组织样品，对可引起免疫抑制性疾病的5种最常见病毒进行了PCR检测。结果，传染性腔上囊病病毒（IBDV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）、马立克氏病病毒（MDV）、禽白血病病毒（ALV）和网状内皮增生症病毒（REV）的群阳性率和个体阳性率分别为73．08％和40．91％、46．15％和25．95％、41．54％和17．84％、18．46％和7．57％、13．85％和4．86％，其中被检鸡之二重或多重混合感染的总阳性率为24．33％。调查结果证实，免疫抑制性疾病在安徽省的商业鸡群中普遍存在，并与鸡群疾病多而复杂、损失大相关。