貂,貉,犬多种免疫球蛋白的研究与应用

利用犬温热，细小病毒性肠炎，犬传染性肝炎，狂犬病等弱毒株，以香菇多糖和动物的核糖，多肽做为免疫增强剂，对异源动物羊，猪，犊牛，家兔进行了免疫应答，筛选出了猪做为异源免疫动物。在免疫增强剂的参与下，完成了多次免疫应答，达到了理想的免疫球蛋白（ＩｇＧ），通过试验摸清了该制剂的免疫程序，确定了生产工艺，经重复性试验，稳定性试验及含量测定，以及临床应用试验和现志应用试验均达以了预期效果，该制剂经冷冻干燥后     

猪流行性腹泻IgA、IgG抗体与PEDV抗原相关性研究

为了研究仔猪所吮乳汁中IgA抗体水平与乳汁中PEDV感染情况,探讨母猪免疫猪流行性腹泻疫苗后乳汁与血清中IgA、IgG抗体水平的相关性,临床采集多家规模化猪场母猪群乳汁、血清样品以及发病仔猪所吮母猪乳汁样品。采用实验室已经建立的IgA、IgG抗体ELISA方法,检测临床上猪流行性腹泻疫苗免疫后IgA抗体与IgG抗体的相关性,同时采用RT-PCR方法检测发病仔猪所吮乳汁中PEDV感染情况。结果表明,免疫猪流行性腹泻活疫苗后母猪乳汁中IgA抗体水平与血清中IgA、IgG抗体水平呈现很好的正相关性;当发病仔猪所吮母猪乳汁IgA抗体检测结果为阴性时,其PEDV抗原检测结果为阳性;乳汁IgA抗体检测结果趋于阳性样品临界值时,其PEDV抗原检测结果亦为阳性。结论:乳汁中低水平的IgA抗体很难有效地保护仔猪抵御PEDV感染;乳汁中IgA抗体与血清IgA、IgG抗体呈现很好的相关性,且乳汁中IgA抗体水平远远高于血清;通过IgG抗体水平可以间接反映乳汁中的IgA抗体水平,在初乳样品采集难度较大的情况下,可用于间接评估猪流行性腹泻免疫保护水平。     

猪流行性腹泻病毒血清IgG间接ELISA检测方法的建立

以大肠杆菌表达系统制备的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)中和抗原S1D(1μg/mL)每孔100μL进行包被,利用HRP-兔抗猪IgG(1∶20 000)建立了检测猪血清中抗PEDV IgG的间接ELISA方法。阴性判断临界值(M+2SD)为0.632,批内和批间检测的平均变异系数分别为2.3%和3.1%,该方法与商品化的PEDV抗体间接ELISA检测试剂盒同时检测50份临床血清样品,均为阳性,上述结果表明该方法可用于PEDV血清IgG的临床检测。     

藏药川西獐牙菜抗小鼠免疫性肝损伤的研究

【目的】探讨川西獐牙菜对卡介苗(BCG)/脂多糖(LPS)所致的免疫性肝损伤小鼠免疫器官脏器指数和血清免疫球蛋白含量的影响。【方法】采用尾静脉注射BCG和LPS构建小鼠(体质量20g)免疫性肝损伤模型。制备川西獐牙菜提取物,按高剂量(5.380mg/只)、中剂量(2.690mg/只)、低剂量(0.538mg/只)灌胃免疫性肝损伤小鼠,连续10d后,取小鼠肝脏、脾脏和胸腺,计算其脏器指数,并取血清,测定其中IgG、IgA、IgM的含量。【结果】川西獐牙菜的各给药组能有效防止BCG/LPS对小鼠各脏器的免疫性损伤,并能影响IgG、IgA、IgM的含量,调节B淋巴细胞网络的紊乱,使异常的免疫状态恢复正常。【结论】川西獐牙菜预防性给药能减轻免疫性肝损伤对小鼠肝脏的破坏,减弱体液免疫功能的亢进,从而起到保肝、抗病、抗损伤的作用。     

Purification and analyses of the specificity of two putative diagnostic antigens for larval cyathostomin infection in horses

Cyathostomins are important equine gastrointestinal parasites. Mass emergence of mucosal stage larvae causes a potentially fatal colitis. Mucosal stages are undetectable non-invasively. An assay that would estimate mucosal larval stage infection would greatly assist in treatment, control and prognosis. Previously, we identified two putative diagnostic antigens (20 and 25 kDa) in somatic larval preparations. Here, we describe their purification and antigen-specific IgG(T) responses to them. Western blots confirmed the purity of the antigens and showed that epitopes in the 20 kDa complex were specific to larval cyathostomins. No cross-reactive antigens appeared to be present in Parascaris equorum or Strongyloides westeri species. Low levels of cross-reactivity were observed in Strongylus edentatus and Strongylus vulgaris species. Use of purified antigens greatly reduced background binding in equine sera. These results indicate that both antigen complexes may be of use in a diagnostic assay.     

低聚木糖对淮南麻鸡血清免疫学的影响

研究了在玉米—豆粕基础日粮中添加低聚木糖对淮南麻鸡血清免疫学影响。结果表明:低聚木糖能提高血清中免疫球蛋白含量(P>0.05);低聚木糖提高了血清中IgG、IgA和IgM的含量,并且IgA和IgM达到了差异显著水平(P<0.05);150mg/kg为低聚木糖最适的添加剂量。     

紫外分光光度法测定猪血中提取免疫球蛋白IgG含量的可行性研究

[目的]探讨紫外分光光度法测定猪血中IgG含量的可行性.[方法]采用饱和硫酸铵法从新鲜猪血中提取IgG,并采用紫外分光光度法测定提取猪血中IgG含量.[结果]将从猪血中分离的免疫球蛋白IgG于40℃下静置40 min,pH为7.4时,获得最多IgG的硫酸铵浓度为30％ ～ 35％.[结论]紫外分光光度法可用于测定猪血中IgG含量,该方法数据稳定,线性关系好,准确性高,操作简便,适合推广.     

牦牛分娩前后乳腺分泌物的生化组成特点

分析了麦洼牦牛分娩前后乳腺分泌物的生化组成,并与常乳进行了比较.牦牛分娩前乳腺分泌物中含有丰富的IgG;γ-GT、NAGase、AKP等的活力一般显著高于初乳和常乳,而LP活力、乳糖含量和CN比例低于常乳.分娩前12d～1d的样品中均检测到显著量的β-LG,而α-LA含量很低.     

犬血清IgG的纯化、抗体制备及其鉴定

[目的]探讨犬血清IgG的纯化方法。[方法]采用硫酸铵盐析法结合SephadexG-200凝胶柱层析提取纯化犬血清IgG,利用SDS-PAGE电泳和免疫印迹法鉴定所得产品的纯度和免疫活性。[结果]获得的纯化犬血清IgG的SDS-PAGE图谱中存在2条蛋白条带,表明获得了高纯度的犬血清IgG;重链分子量为58kD,轻链分子量为27kD,IgG分子量为170kD。特异性检测发现犬血清IgG重链和轻链都能与鼠抗犬血清IgG抗体结合,表明纯化犬血清IgG具有免疫原性和反应原性。[结论]硫酸铵盐析法结合SephadexG-200凝胶柱层析可获得纯度高、活性好的纯化犬血清IgG,为犬血清IgG相关的免疫学试验提供了高质量的免疫材料。     

抗猪瘟免疫球蛋白在猪初乳中变化规律研究

以猪瘟弱毒疫苗免疫空怀母猪,待母猪分娩后,分别收集10d内的乳汁,以建立的间接ELISA法检测猪瘟IgA、IgG、IgM水平,并观察各种抗体动态变化规律。试验结果表明,猪初乳中的IgA、IgG、IgM抗体效价均在分娩当天达到最高值,随后迅速下降,7d后抗体水平与常乳基本一致(>0.05)。对照组母猪仅在分娩当天检测到较低的抗体水平。