Effect of membrane environment at high temperature on delayed rectifier K+ channel in hypothalamus neurons

AIM: To observe the effect of high temperature on the delayed rectifier K⁺ channel(I_K) in hypothalamus neurons METHODS: The kinetic properties of I K were measured by cell-attached mode of patche-clamp technique RESULTS: The conductance, long-term open constant(τ _o2) and open probability(Po) of I_K increased with increase of temperature (P <0.05), while more burst open and multi-order open were recorded Many types of currents occurred after heat stress at 43℃,and voltage-dependent property reduced and even depressed CONCLUSIONS: The activating action of I_K might be affected obviously by high temperature, the coupling between I K and body fever or heatstroke remained to be established.     

GnRH神经元在发情期奶山羊下丘脑中的免疫组化定位

为了研究促性腺激素释放激素(GnRH)在发情期奶山羊下丘脑中的表达特点,采用超敏的免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法研究GnRH免疫反应神经元在发情期山羊下丘脑中的分布。结果显示,GnRH免疫反应阳性细胞主要分布在视上核、视前内侧核、视前外侧核、交叉上核、丘脑外侧区、室旁核后部、弓状核、腹外侧核、结节乳头体核、乳头体内侧核、乳头体外侧核等核团。阳性细胞的形态有圆形、三角形、卵圆形、梭形、多角形、不规则形,有些阳性细胞还具有明显的突起。圆形和三角形细胞直径的大小为5~35μm,卵圆形和梭形细胞短轴和长轴大小分别为5~27μm、15~58μm。免疫反应阳性产物还分布于部分纤维束中,如视束、正中中隆起等。根据细胞中阳性反应的强弱可分为强阳性,如交叉上核;中等阳性,如乳头体内侧核;弱阳性,如前穹窿周核。上述研究结果表明,GnRH在成年奶山羊下丘脑广泛存在。     

鳜下丘脑神经元细胞培养

为了建立可行、高效的下丘脑神经元细胞技术,本研究通过分离鳜下丘脑组织,用Ⅰ型胶原酶将组织消化成单细胞悬液,并用完全培养液进行培养,在培养的第3、4、5和6天观察细胞的形态。结果显示,培养第3天时细胞贴壁量少,胞体小并且呈单个分布;在培养第4天,细胞的数量显著增多,且具有典型的神经元的形态,胞体饱满;第5天神经元胞体的融合度进一步增大,突起增长增粗,许多分支互相交错连接而形成密集的神经纤维网络;第6天细胞活性减弱,开始凋亡。使用CCK-8法检测细胞活性,结果显示,在培养第5天,细胞活性最高;采用荧光定量PCR(RT-PCR)法和免疫荧光鉴定法对神经元细胞进行鉴定,经RT-PCR检测发现,培养的下丘脑细胞可以表达神经元特异基因noggin,经免疫荧光鉴定,下丘脑神经元细胞纯度为95.9%。研究表明,通过此培养方法能够获得纯度较高的鳜下丘脑神经元细胞,为进一步在细胞水平研究鳜的摄食与能量代谢相关机理奠定基础。     

禽类采食量生理调节因子的研究进展

采食量是影响禽类生长最重要的因素之一。认识采食量的调节规律和机制,旨在更有效地调节家禽的采食量,为生产实践提供重要指导。禽类采食量的生理调节机制十分复杂,涉及许多神经通路和体液因子的调节。本文将重点介绍采食量生理调节因子。     

抑制素α亚基在大鼠下丘脑与垂体的免疫组织化学定位

 用链酶亲和素-生物素过氧化物酶复合物（SABC）免疫组织化学方法，使用抑制素α亚基单克隆抗体对注射抑制素α片段及抑制素粗提物后的去卵巢大鼠的下丘脑和垂体进行了免疫组织化学定位。结果表明，在下丘脑与垂体存在抑制素α亚基单克隆抗体的特异性阳性反应位点，并存在剂量与时间上的依赖关系，说明抑制素α亚基可以通过血脑屏障到达下丘脑和垂体，为探讨抑制素α亚基在血脑屏障的转运机制提供了形态学上的依据。     

摩交一代水牛与沼泽型水牛下丘脑细胞构筑的比较研究

[目的]为水牛下丘脑参与生殖生理功能调节的研究提供形态学依据。[方法]应用石蜡切片NISSL染色,采用DMRXAQ550JMS型显微镜及其图象分析系统扫描水牛下丘脑切片。以LEICQWIN图象分析软件对细胞数密度、胞体平均面积、胞体周长、各型细胞的出现率进行研究。[结果]比较摩交一代水牛与沼泽型水牛下丘脑细胞构筑,结果显示,2种水牛下丘脑细胞大小差异较大,巨型、大型、中型、小型细胞在各个核团均有出现,且各自的比例也有明显不同;摩交一代水牛与沼泽型水牛下丘脑内侧部9个核团的神经纤维分布相似,各型细胞的出现率不同;摩交一代水牛与沼泽型水牛相比,在9个主要核团的细胞构筑均有明显差别。[结论]2种不同类型水牛下丘脑细胞存在较大差异,其参与调节2种类型水牛的不同生理生殖功能。     

Intracellular calcium alterations induced by endotoxin and IL-1β in rabbit hypothalamic neurons

AIM: To investigate intracellular free calcium ( [Ca²⁺]i ) alterations in hypothalamus of febrile rabbits induced by endotoxin (ET), and compare with the effect of ET and IL-1β on i in hypothalamic neurocytes from normothermia rabbits. METHOD: The concentration of [Ca²⁺]i was determined by using spectrofluorometer and fluorescent Ca²⁺ probe fura-2 /Am. RESULTS: 1. A minute dose of ET (2 ng/mL) induced a significant rise in [Ca²⁺]i in hypothalamic neurocytes from normothermia rabbits. The rise in [Ca²⁺]i in hypothalamic neurocytes from febrile rabbits induced by intravenous injection of ET was also observed. 2. In hypothalamic neurocytes from normotheria rabbits, IL-1β failed to affect [Ca²⁺]i at concentrations of 100, 500, 1 000ng/mL, respectively. CONCLUSION:The action site of low concentration of calcium that plays a regulatory role during fever seems unlikely to be in cytosolic compartment of hypothalamic neurons. The change of [Ca²⁺]i in hypothalamic neurocytes by ET can not be considered the direct effect of IL-1β.     

青年奶山羊下丘脑催产素神经元分布特点

为了研究奶山羊不同生殖周期中催产素的表达特点,本实验采用超敏免疫组化链霉素抗生物蛋白－过氧化物酶法研究催产素免疫反应物在8~10月龄青年龄奶山羊下丘脑的分布。结果显示：分泌催产素的神经元主要分布在室旁核和视上核,在穹窿周核、腹内侧核、腹外侧核、交叉上核和乳头体上核较多,有少量分布在弓状核、室周核、背内侧核、环核、前连核、下丘脑前核、下丘脑外侧区、乳头体上核、乳头体内侧核。阳性细胞的形态有圆形、卵圆形、多角形;有的阳性细胞突起明显。根据细胞中阳性物质的多少和核团中阳性细胞数量,可分为强阳性、中等阳性、弱阳性核团。提示：催产素广泛存在于青年奶山羊下丘脑中20多个核团,核团之间可能有协同作用。