PCR鉴定沙门氏菌血清分型方法的建立与应用

为建立快速有效、经济适用的沙门氏菌血清型鉴定方法,利用Primer Plex软件设计畜禽中常见沙门氏菌的菌体(O)抗原和鞭毛抗原(H)的引物,优化引物比例和退火温度等反应条件,建立沙门氏菌血清型鉴定的PCR法,并对46株沙门氏菌分离株进行血清型鉴定,同时与传统玻片凝集法和美国CDC的液相芯片(Luminex-x MAP)法进行比较。优化后获得了O抗原中B、C1、D和E1群的多重PCR引物,以及鞭毛抗原H1相抗原基因(fli C)和H2相抗原基因(flj B)的2对引物;建立了一套基于沙门氏菌O和H抗原的多重PCR血清型鉴定法;PCR法和Luminex-x MAP法鉴定出7种沙门氏菌血清型,传统玻片凝集法鉴定出6种血清型;PCR法与传统玻片凝集法和Luminex-x MAP鉴定结果的符合率均为95.65%。本研究建立的PCR沙门氏菌血清型鉴定法简便、快速,预期可在沙门氏菌的血清分型研究中发挥作用。     

2015年至2019年我国进口美棉质量分析

本研究旨在明确2015―2019年进口美国棉花质量变化情况。根据青岛海关技术中心棉花检测实验室检测大数据,分析进口美国棉花（陆地棉、比马棉）品质指标的主体范围,总结不同主体指标各等级分布情况及变化规律;对美棉品级、长度、马克隆值合同品质符合率开展研究,发现不同品质指标不同时间段符合率的高点与低点;结合大数据中单个棉包实际检测数据分布情况,探讨进口美国棉花质量变化趋势。认为：5年中进口美国棉花品质一致性好,主体品质占比大,主体指标范围品质符合率高,受贸易形势影响进口美棉数据分布逐渐由高等级向低等级转变。     

两种奶牛结核病检测方法的比较试验

<正>牛结核病(bovine tuberculosis)是一种人畜共患的慢性传染病,该病的传播流行直接影响着畜牧业生产发展和人类身体健康。要消灭和有效控制牛结核病,就要对该病进行准确的检测。近年来建立在现代分子生物学基础上的PCR技术,在结核病病原检测上得到了广泛应用,并成功地解决了人医临床上所面临的一些棘手问题〔1〕。本文通过结核菌素皮内注射法和牛结核病PCR快速诊断试剂盒对牛结核病进行检测,并将两种检测方法进行比较试     

检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立

选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法.结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5 μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min.对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%.     

间接ELISA 与中和试验检测O 型FMDV 疫苗免疫猪血清抗体的比较研究

血清中和抗体滴度的高低,体现了血清对病毒感染的中和能力,是评价疫苗免疫效果的重要指标.对国内3个大型猪场共120头猪的血清样品分别进行O型口蹄疫病毒ELISA和病毒中和试验,并分别比较两种方法的符合率和阳性检出率.结果表明,两种方法的阳性符合率和阴性符合率分别为77.3％和72.2％,总符合率为75％,均能有效检测猪血清中的口蹄疫抗体水平,但是采用间接ELISA检测血清抗体,存在一定比例的假阳性或假阴性.病毒中和试验更适合进行口蹄疫血清学的检测.     

用眼試驗和皮内試驗綜合診断乳牛結核病

大家都知道,皮内試驗是牛結核菌素接种的主要办法。A.H.馬卡維依斯卡婭(1953年)的研究确定,皮内試驗对成年結核病牛可檢出90%,犢牛为99%。根据М.К.尤斯科維茨的資料(1953年)證明,皮内試驗与剖檢結果有84%-97%是相符合的。眼試驗也是很敏感的,但不及皮内試驗,特别是在幼畜方面。根据A.H.馬卡維依斯卡婭的資料,只有78%的成年牛和35%的犢牛呈現眼反应。在М.К.尤斯科維茨的試驗中,約有36%的結核病犢牛对眼試驗不呈現反应,但是对結核菌素皮内注射却呈現阳性反应。虽然皮内試驗是檢出牛結核病的最可靠的方法,但是它仍有自己的缺点。已經查明,消瘦的結核病牛以及帶有活动性結核过程的牛只对皮内試驗呈現微弱的反应。同时,这样的动物对眼試驗产生一般的变态反应。     

番鸭小鹅瘟病胶乳凝集试验与病毒分离的比较研究

应用GPV胶乳凝集方法（LPA）和病毒分离（VI）检测人工感染病例9份、健康对照6份,临床疑似送检病鸭28份。其中人工感染样品检测LPA和VI符合率为93.3%（14/15）;临床疑似样品检测LPA和VI符合率为89.3%（25/28）;两者总符合率达90.7%（39/43）。LPA方法具有简便（肉眼可判定,不需仪器）、快速（检测抗原20min内）、特异、准确等优点,比VI更适合临床使用。     

不同样本用于猪瘟抗原检测结果的比较

应用IDEXX公司的Herdchek猪瘟抗原检测试剂盒,分别对全血、血凝块样本中的猪瘟病毒抗原进行检测.用另一种试剂盒(C试剂盒)检测血清样本.对来自6个不同背景猪场的250头猪只的不同样本的检测结果表明,采自阴性场的3种样品的检出率均为0,说明2种试剂盒具有良好的特异性.IDEXX公司的Herdchek猪瘟抗原检测试剂盒对采自2个猪瘟阳性场的全血样品的检出率分别为5%和10%,血凝块样本的检出率为4%和5%,而C试剂盒的检出率均为0%.从总体来看,以全血和血凝块作为样品,对已知阴性群的检测符合率为100%,对已知阳性群的检测符合率为93.3%,对未知背景群的检测符合率为100%.基于以上结果,我们认为采用血凝块作为猪瘟抗原检测的替代样品是可行的,但在临床使用时需要保证一定数量的样品,以免造成漏诊.     

奶牛早期妊娠诊断研究进展

奶牛配种(或受精)后不久,必须进行早期妊娠诊断,以便加强怀孕母牛饲养管理,保证顺利分娩或对未孕母牛及时配种,缩短产仔间隔,提高繁殖效率。生产实践中广泛应用的是直肠检查等方法,尽管此法简单易行,不     

三种方法检测猪O型口蹄疫抗体的比较分析

口蹄疫(FMD)是由小RNA病毒科口蹄疫病毒属的口蹄疫病毒(FMDV)引起的以感染偶蹄动物为主的急性、热性、高度接触性传染病。其传播速度快,往往造成大流行,由于难于防治、补救措施少,对养殖业构成严重威胁,严重影响国内、国际贸易,造成巨大的经济损失。世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物疫