Crop uptake of 15N labelled fertilizer in spring wheat affected by application time

Time of nitrogen fertilizer application on crop recovery was studied in a field experiment at Foulumgaard, Denmark, in 2001. A solution of ¹⁵N-ammonium-¹⁵N-nitrate was applied in bands parallel to a single row of spring wheat grown in frames of 30 cm×40 cm. The labelled fertilizer was applied on 16 dates with intervals of 4–5 days from tillering to the start of grain-filling. Crop ¹⁵N recovery increased by 0.47%-point day^?1 when the time of fertilizer application was postponed from tillering until the second node stage (GS32). On the other hand, a decrease in crop ¹⁵N recovery of –0.19%-point day^?1 was recorded from GS47 to maturity (GS85–87). The effect of the 16 application times on ¹⁵N recovery was described by two straight lines having intersection at the time of full expanded flag leaf and ear emergence halfway (GS55). It was concluded that leaf area expansion is important for crop N demand and ¹⁵N recovery.     

Relationships between the primary mineral and the clay mineral compositions of some recent andosols

Relationships between the clay mineralogy and the primary mineral association were studied on seventeen Andosol samples (<3,000 years old) collected from Aomori, Hokkaido, and Iwate. Opaline silica, allophane, and imogolite were predominant in the soils derived from volcanic ashes which contained practically no quartz, while opaline silica, crystalline layer silicates, alumina-rich gel-like materials, and allophanelike constituents were abundant in the soils which contained abundant quartz. There was no positive indication of the presence of allophane in any quartz andesitic Andosols. High contents of finely comminuted amphibole and mica in the quartz andesitic volcanic ashes suggested that the crystalline layer silicates are inherited and are not formed pedochemically from amorphous materials.     

睾丸注射慢病毒生产转基因鸡的研究

【目的】采用睾丸注射慢病毒的方法生产转基因鸡以提高转基因效率,使转基因鸡的批量生产变得简单可行。【方法】用磷酸钙沉淀法包装慢病毒,对慢病毒包装体系中的质粒总量和HN Buffer的pH值进行优化,以包装出滴度较高的慢病毒;然后将慢病毒注射到受精鸡蛋的胚胎中验证其活性;最后,将慢病毒注射到8日龄公鸡的睾丸内,待其性成熟以后,将精液DNA呈阳性的公鸡与非转基因母鸡进行交配生产出转基因鸡。【结果】当90mm培养皿中质粒总量为50μg、HN Buffer的pH值为7.05时慢病毒的包装效率最高,在该条件下包装出的慢病毒滴度高达7.5×107 TU/mL;采用慢病毒胚胎注射途径成功地生产出增强绿色荧光蛋白(enhanced Green Fluorescent Protein,eGFP)转基因鸡;采用慢病毒睾丸注射途径生产的转基因鸡后代中能检测到eGFP目的基因,但未检测到其相关的表达。【结论】慢病毒睾丸注射途径能够将外源基因整合到精原干细胞中,并遗传给后代。     

脂肪酸提取方法对芽胞杆菌种类脂肪酸测定结果的影响

脂肪酸是细菌细胞膜的重要组成物质,受细胞膜上遗传物质的控制,具有灵敏度高、成分高度保守和含量稳定等特点,其碳链长度、双键位置和功能团组合的不同使其成为有效的分类标记。在细菌培养和脂肪酸提取阶段,芽胞杆菌属种类的脂肪酸鉴定结果受到皂化时间和脂肪酸提取试剂量的影响。本研究以球形芽胞杆菌为例,分析了皂化时间、皂化试剂量和甲基化试剂量对脂肪酸鉴定结果的影响。研究结果表明:皂化时间在25~30min的测定效果较好;皂化试剂量为1.0mL、甲基化试剂量为1.5mL时,球形芽胞杆菌的脂肪酸鉴定效果较好。     

Ultramicro-ELISA with a fluorogenic substrate for detection of potato viruses

Summary A double-antibody ELISA is described in which polystyrene-covered polyvinylchloride plates with 10 μl test volume in the wells are used as a solid phase. A fluorogenic substrate, 4-methylum-belliferyl phosphate is used instead of a colorigenic substrate. The plates are loaded with 10 μl samples by using a 50-channel micropipette and fluorescence units read at 0.16 mm thickness with a special measuring device. The practicability and sensitivity of the method are exemplified by the detection of potato viruses X, Y and M (secondary infections) and potato leafroll virus (primary infections), in leaf and tuber extracts. Ultramicro-ELISA is as reliable in detecting the viruses as the standard ELISA. Because of the very small volumes used in the wells, chemicals, antibodies and alkaline phosphatase are reduced by 95% as compared with the standard test.

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Zusammenfassung Es wird ein Ultramikro-ELISA in der Form eines Doppelantik?rper-ELISA (Clark & Adams, 1977) beschrieben, in dem als feste Phase polystyrolbeschichtete Polyvinylchlorid-Folien mit einem Füllvolumen von 10 μl verwendet wurden. Die Dosierung erfolgte in einem Raster von 5×10 mit einem speziellen 50-kanaligen Mikropipetter. Alle Inkubationsschritte wurden bei Raumtemperatur durchgeführt. Nach dem Ausspülen mit PBS-Tween wurden die Folien 20 Minuten mit Aqua dest. gewaschen. An Stelle des chromogenen Substratesp-Nitrophenylphosphat wurde 0,0005 mol/l 4-Methylumbelliferylphosphat in Diethanolaminpuffer verwendet. Die Reaktionszeit für das fluorogene Substrat betrug 20 Minuten. Ein Abstoppen der Substratreaktion entfiel, da die L?sung nach erfolgter Reaktion mit einem Mikropipetter auf eine im Raster 5×10 gekammerte Glasmessküvette überführt wurde. Die Messung der Fluoreszenzintensit?t erfolgte bei 0,16 mm Schichtdicke in einem speziellen Auswerteger?t. Dieser Ultramikro-ELISA, der zur quantitativen Bestimmung des α₁-Fetoproteins Anwendung findet (Horn et al., 1981; Hoffmann-Blume et al., 1983), wurde in seiner Nachweissicherheit mit einem üblichen Doppelantik?rper-ELISA verglichen (Richter et al., 1979). In die Untersuchungen wurden Blattpress?fte von Pflanzen einbezogen, die mit Kartoffelblattroll-Virus (PLRV), Kartoffel-Virus Y (PVY) und Kartoffel-Virus M (PVM) infiziert waren. Des weiteren wurden das Kartoffel-Virus X (PVX) sowie die Viren PVY und PVM in sekund?rinfizierten Knollen und Bl?ttern von Kartoffelzuchtst?mmen (spontane Freilandinfektionen) nachgewiesen. Zum Nachweis prim?rer Infektionen mit PLRV wurden gesunde Mutterpflanzen der Sorte Adretta an zwei Terminen mit Hilfe von Blattl?usen infiziert. Die mit beiden ELISA-Verfahren erhaltenen Ergebnisse stimmten überein. In Blattpresss?ften konnten die Viren bis zu einer Verdünnung von 10⁵ (PVM), 10³ (PVY) und 10² (PLRV) nachgewiesen werden. In 20 Individuen von Kartoffelzuchtst?mmen wurden mit beiden Verfahren übereinstimmend PVX und PVY in 5 Knollen- und Blattproben festgestellt; PVM wurde in 12 Blatt- und 13 Knollenproben nachgewiesen. Die in Blattproben ermittelten Extinktionen bzw. Fluoreszenzintensit?ten lagen um den Faktor 2–5 h?her als die Werte der Knollenextrakte. In 20 mit PLRV prim?rinfizierten Mutterpflanzen wurden im Rahmen der Blattuntersuchungen Ende Oktober mit beiden Verfahren 10 infizierte Stecklinge ermittelt. Die Ergebnisse wurden durch die Augenstecklingsprüfung, bei der 9 infizierte Pflanzen gefunden wurden, unterstützt. Bei der Untersuchung prim?rinfizierter Knollen wurde nach einer Zwischenlagerung von 2,5 Monaten in 17 von 18 dieser Knollen eine PLRV-Infektion best?tigt. Die anschliessende Augenstecklingsprüfung ergab nur 12 PLRV-infizierte Pflanzen. Eine Abh?ngigkeit vom Infektionszeitpunkt wurde nicht gefunden. Der vorgestellte Ultramikro-ELISA besitzt nach diesen Ergebnissen die gleiche Sensitivit?t wie ein üblicher Standard-ELISA. Bedingt durch die geringen Füllvolumina k?nnen jedoch Chemikalien, Antik?rper und alkalische Phosphatase um 95% der im Vergleich zum Standard ben?tigten Mengen reduziert werden.

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Résumé Dans ce travail est décrit une méthode Ultramicro-ELISA avec le principe du double anticorps-ELISA (Clark & Adams, 1977). La partie réceptrice solide se compose de feuilles en polyvinylchloride additionnée de couches en polystérole avec une capacité de 10 μl par alvéole. La sensibilisation des plaques qui correspondent à une grille de 5×10 alvéoles, est effectuée avec une micro-multipipette à 50 canaux. L'incubation a lieu à température ambiante. Après rin?age des plaques avec le PBS-Tween le lavage est effectué durant 20 minutes avec de l'eau distillée. A la place du substratp-nitrophénylphosphore on utilise une solution de 4-methylumbelliferylphosphore 0,0005 mol/l avec un tampon de diethanolamine. La durée de réaction du substrat fluorescent est de 20 minutes. Un stoppage de la réaction est superflu, étant donné qu'une fois la réaction obtenue, la solution est prélevée avec une micro pipette et versée sur une grille-cuvette en verre avec 5×10 champs. La mesure de l'intensité fluorescente est effectuée avec un appareil spécial sur une couche de 0,16 mm. Cet ELISA Ultramicro-test utilisé pour la détermination quantitative de la protéine α-1 Feto (Horn et al., 1981; Hoffmann-Blume et al., 1983) a été comparé sur sa fiabilité avec un double anticorps-ELISA courant (Richter et al., 1979). Les examens comprenaient des jus de feuilles de pommes de terre contaminées par PLRV, PVY, PVM. On a également détecté le PVX, PVY et PVM, infections secondaires de tubercules et feuilles de clones de pommes de terre. Pour la détection des infections primaires de PLRV, des plantes-mères saines de la variété Adretta ont été infectées à deux dates à l'aide de pucerons. Les résultats obtenus avec les deux méthodes ELISA concordent dans tous les essais. Dans le jus de feuilles, les virus ont été détectés jusqu'à une dilution 10⁵ (PVM), 10³ (PVY) et 10² (PLRV). Sur les 20 clones examinés on a décelé avec les deux méthodes 5 cas de PVX et PVY dans les échantillons de tubercules et feuilles. PVM a été détecté dans 12 cas sur les feuilles et 13 fois sur les tubercules. Les extinctions, c'est-à-dire les intensités fluorescentes, sont 2 à 5 fois plus élevées à partir de jus de feuilles que sur du jus de tubercules. Sur 20 plantes qui présentaient une infection primaire, on a obtenu par des analyses foliaires des boutures à fin octobre, 10 individus infectés avec chaque méthode. Ces résultats ont été confirmés par des tests d'indexage qui ont donné 9 individus infectés. Lors de la détection d'infections primaires, après entreposage des tubercules pendant 21/2 mois, on a obtenu 17 tubercules positifs sur 18 contaminés de PLRV. L'indexage d'oeilletons a permis de déceler 12 individus malades sur ce même matériel. On a pas observé de différence selon l'époque d'infection de la plante-mère. Cela avait cependant été démontré lors d'une étude plus conséquente (Richter et al., 1983). Selon les résultats obtenus avec les virus de la pomme de terre PVX, PVY et PVM d'infections secondaires, ainsi que du PLRV d'infections primaires l'ultramicro-test ELISA offre la même sensibilité que le test ELISA standard. En raison des petits volumes des plaques, les substances chimiques, anticorps et phosphatase alcaline, peuvent être réduites de 95% comparativement avec la méthode traditionnelle.

     

Antiradical properties of sorghum (Sorghum bicolor L. Moench) flour extracts

Epidemiological studies support the belief that whole grains are protective against several chronic diseases. The health benefits of whole grains are attributed in part to their unique phytochemical composition. Major phytochemicals in grains include various classes of phenolic compounds, flavonoids and coumarin derivatives, etc. Phenolic compounds present in grains possess antioxidant properties that are associated with the health benefits of grains and grain products. Sorghum is one of the main staple cereal grains in hot dry tropics and ranks fifth among cereal crops in the world. Although sorghum is rich in phenolics and tannins which are proven anticancer and cardioprotective constituents, human consumption of sorghum is limited. To our knowledge, there is limited literature on the profile of antioxidant phytochemicals in the local white variety of sorghum. Hence, the objective of this study was to investigate the antioxidant property of white sorghum flour extracts in vitro and also to identify the fractions responsible for the antioxidant activity. In the present study, we analyzed the antioxidative properties of various extracts (water, 60% methanol, 60% ethanol, and 60% t-butanol) of white sorghum flour employing the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) model system. Phenolics, antiradical and antioxidant activities were also examined in chromatographic sub-fractions of the soxhlet methanolic extract. Our results indicated that the various extracts exhibited significant antioxidant activity that did not correlate with the phenolic content. Further, two sub-fractions eluted with methanol and acetone/methanol were found to possess strong antioxidant activity in two assay systems. Our results suggest that a diet rich in sorghum may be useful in combating diseases in which free radical production plays a key role.     

Mutagenic activity ofMintostachys mollis in AHH1 lymphoblast cells

Cultured AHH₁ human lymphoblast cells were exposed to an extract ofMintostachys mollis, which is used as a medicinal plant and preservative in Peru, to detect its mutagenic activity. A three-day exposure to concentrations of 1, 10, 30 and 50 µg/ml resulted in induced mutant fraction of 1.02, 1.79, 2.21 and 3.80 mutations per million cells per day, expressed as 6-Thioguanine resistance. A concentration of 10µg/ml induced 11.9 times the spontaneous mutant fraction of AHH₁ cells. The doubling dose determined to be 838 ng/ml. A concentration of 30 µg/ml of this compound resembled the induced rate of 1 µM benzo () pryene.     

Integrating multiple electromagnetic data to map spatiotemporal variability of soil salinity in Kairouan region,Central Tunisia

Soil salinization is a major problem affecting soils and threatening agricultural sustainability in arid and semi-arid regions,which makes it necessary to establish an efficient strategy to manage soil salinity and confront economic challenges that arise from it.Saline soil recovery involving drainage of shallow saline groundwater and the removal of soil salts by natural rainfall or by irrigation are good strategies for the reclamation of salty soil.To develop suitable management strategies for salty soil reclamation,it is essential to improve soil salinity assessment pro cess/mechanism and to adopt new approaches and techniques.T his study mapped a recovered area of 7200 m2 to assess and verify variations in soil salinity in space and time in K airouan region in Central Tunisia,taking into account the thickness of soil materials.Two electromagnetic conductivity meters(EM38 and EM31)were used to measure the electrical conductivity of saturated soil-paste extract(ECe)and apparent electrical conductivity(E Ca).Multiple linear regression was established between ECe and ECa,and it was revealed that ECa-EM38 is optimal for E Ce prediction in the surface soils.Salinity maps demonstrated that the spatial structure of soil salinity in the region of interest was relatively unchanged but varied temporally.Variation in salinity at the soil surface was greater than that at a depth.These findings can not only be used to track soil salinity variations and their significance in the field but also help to identify the spatial and temporal features of soil salinity,thus improving the efficiency of soil management.     

分子印迹固相萃取气相色谱-质谱法测定鸡蛋中三聚氰胺

以环丙氨嗪为虚拟模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,采用本体聚合法合成了对三聚氰胺具有良好交叉识别能力的分子印迹聚合物(MIP).将其制备成固相萃取小柱,可有效分离、净化和富集鸡蛋中的三聚氰胺.提取的三聚氰胺进一步经Sylon BFTTM衍生后,采用气相色谱-质谱选择离子监测模式(SIM)测定...     

树干注药后吡虫啉在核桃组织中的分布动态研究

采用高效液相色谱(HPLC)测定了吡虫啉经树干注药后在核桃树体中的分布动态。结果表明,树干注药后吡虫啉在核桃树体内具有较好的传导、分布性能,其在不同组织中的含量差异较大,含量由大到小顺序为:叶片＞果皮＞果仁。吡虫啉在核桃树体内残留期较长,注药后60 d时,药剂在核桃叶片、果皮和果仁中的含量分别为0.256、0.178 和0.046 mg/kg;注药后80 d时,吡虫啉在叶片、果皮和果仁中的含量均小于0.05 mg/kg。根据吡虫啉在核桃果仁中的残留量变化动态及国外相关最大允许残留限量标准,建议在利用吡虫啉树干注药防治核桃害虫时,注药时间距核桃采收期应大于60 d。