板栗赤霉素缺陷型短雄花序芽变的初步鉴定及CmGID1基因的表达分析

 利用赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯利和吲哚乙酸分别涂抹板栗短雄花序,结果显示仅赤霉素能够抑制短雄花序顶端的细胞程序性死亡,并在一定程度上恢复短雄花序的伸长生长。通过RT-PCR扩增方法,从板栗短雄花序芽变和正常雄花序cDNA中克隆出赤霉素受体基因GID1部分序列。测序及序列分析结果表明：克隆的cDNA片段为786 bp,所推导的氨基酸序列与杨毛果GID1氨基酸序列有91%的同源性,与陆地棉、蓖麻GID1均有85%的氨基酸序列同源性。经氨基酸序列功能分析,推测该GID1序列是板栗有编码功能的赤霉素受体基因,命名为CmGID1（GenBank登录号为HQ651231）。实时荧光定量PCR结果显示,从花序萌发至花药萌发前期,除其中一个时期（5月23日）外,芽变短雄花序CmGID1的表达量均高于正常雄花序;在花序的快速生长期,芽变短雄花序CmGID1表达量显著高于正常雄花序（P < 0.01）;且赤霉素处理后恢复生长的短雄花序CmGID1表达量显著降低（P < 0.01）。综合试验结果,初步揭示了该短雄花序为一个赤霉素缺陷型突变体。     

放线菌HN20对黄瓜和生菜的促生作用

为探究放线菌HN20菌株对黄瓜、生菜的促生潜力,通过培养皿法及盆栽法,测定不同浓度放线菌HN20发酵液处理黄瓜、生菜的各项生长指标。结果表明:HN20发酵液对黄瓜促生作用不明显,对生菜促生作用显著;100倍发酵稀释液能明显促进生菜各项生长指标,尤其能显著增加植株可溶性糖的含量,提高植株的根系活力。     

一株滇重楼内生真菌的分类鉴定及转化孕酮的研究

本文首先结合形态学特征和ITS—r DNA序列分析,鉴定菌株YNCA1219为稻恶苗霉(Fusarium moniliforme Sheld.)。以菌株YNCA1219对孕酮进行生物转化研究,分离得2个转化产物,通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)及红外(FTIR)等手段对孕酮转化产物进行结构鉴定,其结构为11α-羟基孕酮(Ⅰ)和11α,15β-二羟基孕酮(Ⅱ)。结果表明菌株YNCA1219转化孕酮具有一定的专一性。     

油菜菌核病菌秋季与春季萌发菌株生物学特性的比较

通过室内和田间试验,观察并比较采自湖北省咸宁市核盘菌秋季萌发菌株与春季萌发菌株的生物学特性。结果表明:9个秋季萌发菌株(aSs-1至aSs-9)和9个春季萌发菌株(sSs-1至sSs-9)在菌丝生长速率、菌核产量、菌核大小和对油菜的致病力等方面均无显著差异(P0.05);室内和田间菌核的萌发均受菌核形成温度和诱导菌核萌发温度的影响,高温形成的菌核易于萌发;核盘菌秋季萌发菌株和春季萌发菌株在菌核萌发特性方面存在明显差异。     

布鲁菌缺失疫苗株M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA的构建及毒力和免疫原性的评估

【目的】利用分子生物学技术,通过同源重组的方法构建了新型的羊种布鲁菌Brucella melitensis减毒活疫苗株,为布鲁菌的防治提供新的选择.【方法】以羊种布鲁菌减毒活疫苗M5株及缺失bp26基因的M5-Δbp26缺失突变株为亲本株,利用电击转化法,将含有znuA基因上下游同源臂的自杀质粒转入到亲本株中,通过同源重组敲除znuA基因.对构建的新型基因缺失株进行生物学特性及毒力的鉴定与分析.【结果和结论】PCR及核苷酸序列测序结果表明,羊种布鲁菌减毒活疫苗znuA单基因缺失株和bp26、znuA双基因缺失株均构建成功,分别将其命名为M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA.与亲本株相比,2种缺失突变株的生物学特性没有显著性差异;体外连续传至20代后,菌落PCR和核苷酸测序结果显示M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA株具有良好的遗传稳定性.小鼠脾脏质量和脾脏菌落数表明,M5-Δbp26-ΔznuA双基因缺失株毒力最弱,单基因缺失株M5-ΔznuA和M5-Δbp26次之.血清中抗体水平的监测显示,znuA基因的缺失对布鲁菌减毒活疫苗诱导机体体液免疫的能力没有影响.获得了免疫原性保持良好而毒力减弱的羊种布鲁菌减毒活疫苗基因突变株M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA.     

大豆体细胞无性系（Clone）的变异与优良品系筛选

本研究以栽培大豆辽豆８５－３８γｍ２、九农１５及半野生大豆公野交２２４６等１０个品种为材料,通过茎节培养从辽豆８５－３８γｍ２中获得了可以继代２的体细胞无性系并再生植株。不同继低培养世代（ＳＣ１、ＳＣ２、ＳＣ２）的再生植株在株高、叶形、分枝数、百粒重等重要农艺性状上均产生了变异,通过二年的田间产量鉴定与产量比较,从ＳＣ２中筛选出４个高产、虫食率低的优良品秒。     

亚麻微生物脱胶技术的研究──Ⅱ．脱胶菌株的鉴定

脱胶菌Ｋｅ３４和Ｌｅ１０能在３５℃有氧条件于普通琼脂（即营养琼脂）培养基上生长。早期菌落为不规则圆形，表面暗淡，不透明、粘稠、周边不整；后期菌落出现皱褶、干燥、乳白色。普通肉汤内产生有皱纹的菌膜，振之不碎散，菌液不浑浊，无沉淀。菌体均为革兰氏（Ｇｒａｍ＇ｓ）阳性，杆状，散在，大小：Ｋｅ３４为０·６－０·９×２·４－３·５μｍ，Ｌｅ１０为０．６－０．８×２．１－３．３μｍ；产生芽孢，中生或偏中生，不使菌体明显膨大，大小：Ｋｅ３４为０．５－０．８×１．０－１．６μｍ；Ｌｅ１０为０．５－０．ｇ×１．１－１．６μｍ；萄萄糖琼脂上的幼龄菌，美兰淡染着色均一；它们均能运动。生理生化：均在７％ＮａＣｌ中生长，石蕊牛奶不产酸、胨化，ｐＨＳ．７生长，Ｖ－Ｐ反应阳性，水解淀粉，硝酸盐还原为亚硝酸盐，好氧生长，不利用两酸盐等。因此对它们种的鉴定为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌。     

戊糖乙醇发酵菌种的选育及菌种特性的研究

[目的]选育能利用木糖产乙醇的菌株。[方法]从自然界中分离、筛选能够发酵戊糖产生乙醇的酵母菌株,并对所得菌株进行发酵性能研究。[结果]选出了1株能利用木糖产乙醇的菌株b-11。其特性研究结果表明,菌株b-11耐乙醇浓度为5%,对数生长期为12～18 h,在50 g/L的木糖发酵培养基中发酵48 h时乙醇浓度达到最高值3.105 9 g/L,木糖利用率达82.52%,糖醇转化率是理论转化率的16.36%。[结论]该研究为利用木质纤维素生产燃料乙醇提供了参考。     

氮离子注入井冈霉素产生菌诱变高产菌株的研究

探索了氮离子注入技术在井冈霉素产生菌高产菌株诱变中的应用。向井冈霉素产生菌注入能量10 keV、剂量15×1013个/cm2氮离子实施诱变,再生培养后单菌落接斜面上摇床进行效价测定,筛选高产菌株。结果获得诱变菌株9275#,其有效A组分含量较出发菌株提高33.52%,且具有高的遗传稳定性。     

蚕蛹蛋白高效分解菌的分离筛选及部分酶学性质的研究(英文)

[目的]获得蚕蛹蛋白高效分解菌,探索其有关酶学性质。[方法]从腐败蚕蛹中采用稀释平板分离蛋白高效分解菌。先进行菌株的初筛:取采集的样品2g,分别加入装有LB培养基的摇瓶中,置摇床上180r/min,37℃培养4～5d。将发酵液稀释一定倍数,涂布法进行分离,根据酪素培养基中单菌落透明圈和菌落直径比值(H/C)大小,选取H/C比值较大的菌株进行复筛。将初筛得到的待测菌株接种于发酵培养基中,32℃摇床培养60h。发酵液离心(4000r/min,5min)后取上清,测定酶活力,并比较不同菌株发酵液蛋白酶pH、温度作用范围。对筛选出的菌株所产中性蛋白酶再进行pH值条件下酶活力稳定性测验,酶活力热稳定性试验,及不同金属离子对中性蛋白酶活力的影响试验。蚕蛹粉采用筛选出的菌株固体发酵后,于60℃烘箱烘干,测定其中小分子蛋白含量。[结果]经筛选得到1株产中性蛋白酶的KB细菌,在摇瓶发酵条件下其酶活达到589.08U/ml,发酵蚕蛹粉后中小分子蛋白含量达到15.09%,比未发酵的对照和实验室现用菌株发酵分别提高了95.72%和15.67%,这表明KB菌株在蚕蛹粉发酵中优于实验室现用菌株。KB菌株所产中性蛋白酶在pH值6.5～9.0条件较稳定,pH值8.0为其最适pH值,在pH值8.0、温度55℃条件下处理0～30min时的酶活较稳定,残余酶活力在90.0%以上。[结论]初步获得蚕蛹蛋白高效分解菌。