围产期奶牛脂类代谢病监测指标的研究

对呼和浩特市地区某牛场105头围产期奶牛,采用紫外可见分光光度法进行了血中葡萄糖、谷草转氨酶、游离脂肪酸、胆红素、谷丙转氨酶、甘油三酯、胆固醇、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白和尿素氮含量的测定,采用梯度稀释法对乳中酮体进行检测。实验结果表明:脂肪肝的发病率为41.9%,酮病的发病率为18.1%,患隐性脂肪肝奶牛占整个患脂肪肝奶牛的24.4%,围产期患酮病奶牛都有不同程度的肝细胞脂肪浸润。脂肪肝病牛葡萄糖含量极显著低于正常值(p<0.01),谷草转氨酶和游离脂肪酸含量极显著高于正常值(p<0.01),血清中胆红素、谷丙转氨酶和甘油三酯的含量极显著高于正常值(p<0.01),胆固醇、碱性磷酸酶、总蛋白和白蛋白的含量极显著低于正常值(p<0.01),而尿素氮差异不显著。酮病奶牛血中葡萄糖、总蛋白、白蛋白、胆固醇和碱性磷酸酶的含量极显著低于正常值(p<0.01),谷草转氨酶、游离脂肪酸、谷丙转氨酶、胆红素和甘油三酯的含量极显著高于正常值(p<0.01),而尿素氮差异不显著。     

木犀草素对急性汞中毒小鼠血液生化指标、肝脏及肾脏的影响

试验旨在研究小鼠急性汞中毒后血液、肝脏及肾脏的中毒表现及木犀草素对急性汞中毒小鼠血液指标、肝脏及肾脏的影响。将28只小鼠随机分成4组,分别为对照组(腹腔注射0.9%生理盐水)、木犀草素组(灌胃100 mg/kg木犀草素)、氯化汞组(腹腔注射4 mg/kg氯化汞)和氯化汞+木犀草素组(腹腔注射4 mg/kg氯化汞,灌胃100 mg/kg木犀草素)。检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,肌酐(CREA)和尿素氮(BUN)水平,血液白细胞(WBC)、红细胞(RBC)和血红蛋白(HGB)水平及肝脏组织谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,并观察肝脏、肾脏组织形态学改变。结果显示,与对照组相比,氯化汞组的血清ALT、AST活性极显著升高(P < 0.01),血清CREA、BUN,血液WBC及肝脏组织MDA含量均显著增加(P < 0.05),血液RBC、HGB及肝脏组织GSH水平均显著降低(P < 0.05),肝脏、肾脏病理变化明显。与氯化汞组相比,氯化汞+木犀草素组的血清ALT、AST活性,CREA和BUN,血液WBC及肝脏组织MDA含量均显著降低(P < 0.05);血液RBC、HGB及肝脏组织GSH含量均显著升高(P < 0.05),肝脏、肾脏病理变化减轻。小鼠急性汞中毒后,其中毒表现为炎症和贫血的发生及肝脏、肾脏不同程度的损伤,木犀草素可减弱急性汞中毒小鼠血液、肝脏和肾脏的毒性作用。     

中草药复合微生态制剂对急性肝脏损伤蛋鸡肝脏保护作用的研究

试验旨在研究中草药复合微生态制剂（CHCP）对急性肝脏损伤蛋鸡肝脏的保护作用。试验分两部分：①用四氯化碳豆油（SCCl₄）建立蛋鸡急性肝脏损伤模型。选取1 d健康蛋雏鸡108只随机分为4组,模型Ⅰ~Ⅲ组分别按1、2、4 mL/kg体重灌胃10%（V/V）SCCl₄,对照组按2 mL/kg体重灌胃豆油,分别在14、28及35 d时各灌胃一次;②CHCP对蛋鸡急性肝脏损伤的影响。选择1 d 健康蛋雏鸡60只随机分为5组：对照组（豆油）、模型对照组（SCCl₄）及低、中、高剂量CHCP组（SCCl₄+1‰ CHCP、SCCl₄+2‰ CHCP、SCCl₄+4‰ CHCP）,7 d起饮水使用CHCP,14、28 d按2 mL/kg体重剂量给鸡灌胃10% SCCl₄。结果表明,按2 mL/kg体重剂量在14、28 d分别灌胃10% SCCl₄即可造成蛋鸡肝脏损伤,引起肝细胞脂肪变性,空泡样变严重,核固缩,坏死;与模型对照组相比,低、中、高剂量CHCP组蛋鸡血清谷草转氨酶（AST）含量分别降低4.35%（P > 0.05）、7.57%（P > 0.05）及9.79%（P < 0.05）,中、高剂量CHCP组血清谷丙转氨酶（ALT）含量分别降低34.92%（P < 0.01）、36.51%（P < 0.01）,血清总胆红素（TB）含量分别降低25.49%（P < 0.01）、27.45%（P < 0.01）;蛋鸡肝细胞切片显示CHCP不同剂量组肝细胞充血减轻,未见脂滴空泡,排列整齐,细胞质丰富而均匀。结果表明,本试验所用的CHCP按2‰、4‰饮水使用均能减少肉鸡肝细胞坏死,降低血清转氨酶活性及TB水平,对SCCl₄诱导的肝脏损伤有保护作用。     

壬基酚对1月龄泥鳅的急性毒性及鳃、肝脏组织学损伤研究

为了研究壬基酚(Nonylphenol,NP)对淡水鱼类幼鱼的急性毒性及相关组织的损伤效应,选取平均体质量6.0 g、平均体长9.2 cm的1月龄泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)为受试材料,检测壬基酚对幼鱼的急性毒性效应,按等对数间距法,将NP设置为1.69、1.95、2.25、2.60、3.00 mg/L共计5个浓度处理组进行急性毒性实验,同时设置空白对照组,每组设3个平行样,每个样投放10条泥鳅,观察NP对泥鳅鳃、肝脏组织结构的损伤变化,并统计半致死浓度和安全浓度。结果表明,壬基酚对1月龄泥鳅24、48、72、96 h的半致死质量浓度分别为3.722、2.939、2.466、2.175 mg/L,安全浓度为0.550 mg/L。组织学切片观察显示,壬基酚高浓度处理使泥鳅鳃小片细胞脱落严重,鳃小片变细;泥鳅肝脏细胞出现空泡、肿大、核脱落等现象,细胞间隙变大,边界模糊。实验表明,壬基酚属于高毒性酚类污染物,对1月龄泥鳅的毒性作用随着暴露浓度增加、作用时间的延长而增强,在高剂量暴露下可造成泥鳅鳃和肝脏组织的严重损伤。     

重庆猪肉(肝)中几种抗生素类药物残留研究

本文对重庆市猪肉(肝)中青霉素、氯霉素、四环素和磺胺类等抗生素类药物残留进行分析研究,从中可以看出抗生素残留现象在重庆市猪肉中还普遍存在,且有的还非常严重。对如何控制抗生素残留提出了一些对策。     

车前子提取物抑制扑热息痛诱导小鼠肝损伤的作用研究

【目的】研究车前子提取物干预扑热息痛(Acetaminophen,APAP)引起小鼠肝损伤的作用,并探究其潜在作用机制。【方法】运用半仿生酶法提取车前子活性成分,采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测其主要成分。体内研究车前子提取物对APAP肝损伤的保护作用,将60只雌性昆明小白鼠随机分为正常对照组(NC)、APAP肝损伤模型组(LD)、车前子对照组(PA)以及APAP干预的车前子提取物高、中、低剂量组(HPA+LC、MPA+LD、LPA+LD)。其中NC组和LD组小鼠灌胃生理盐水、PA组小鼠灌胃200μg/mL车前子提取物,HPA+LD,MPA+LD和LPA+LD组小鼠分别灌胃车前子提取物200,100,50μg/mL,每天2次,连续6 d;末次给药12 h后,采血并分离肝脏,检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,评价肝脏损伤程度;检测肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H_2O_2)和丙二醛(MDA)含量,评价肝脏的氧化应激程度;检测CYP2E1 mRNA和蛋白表达,并通过细胞色素P450酶2E1(Cytochrome 2E1,CYP2E1)法体外筛选车前子抗APAP肝损伤可能的有效成分。【结果】LC-MS检测发现,车前子提取物有37种主要成分;血清生化指标检测发现,不同剂量的车前子提取物明显减少APAP诱导的氧化产物,增强抗氧化防御能力,减轻肝脏损伤且呈剂量依赖性;车前子提取物显著降低CYP2E1 mRNA和蛋白表达,说明车前子抑制CYP2E1的活性;车前子提取物中抗APAP肝损伤的有效成分为车前草苷D、车前草苷E、高车前素和高车前苷。【结论】车前子提取物的有效成分为车前草苷D、车前草苷E、高车前素和高车前苷。车前子提取物对APAP诱导的肝损伤具有保护作用,其潜在作用机制可能与抑制肝脏CYP2E1的表达和活性有关。     

Hepatic abscesses in cats: 14 cases (1985-2002)

In this retrospective study, we describe 14 cats diagnosed with hepatic abscesses. The objective of the study was to report the clinical signs, physical examination findings, clinicopathologic findings, and outcomes in affected cats. These findings were then compared with those previously reported in dogs and humans. Clinical signs were vague and included anorexia, lethargy, and weight loss. Only 23% of cats had fever, whereas 31% were hypothermic. Increases in serum activities of alanine aminotransferase and alkaline phosphatase were found in 45 and 18%, respectively, of the 11 cats that had laboratory work performed. Abdominal ultrasound examinations were performed in 7 cats, and abnormalities were found in 71% of them. Four cats had solitary abscesses, all of which were located in the right liver lobes. The other 10 cats had multifocal small abscesses or microabscesses, and all of these cats had clinical signs suggestive of sepsis. Cytologic evaluation of samples obtained by abdominocentesis indicated septic inflammation in 67% of cats in which peritoneal fluid was analyzed. Hepatic abscess cultures yielded polymicrobial growth in 66% of the cats: Escherichia coli was the most commonly cultured organism. Overall mortality rate was 79%. All survivors underwent exploratory laparotomy for partial hepatectomy to resect the abscess followed by medical management. Hepatic abscesses should be considered in cats with signs consistent with sepsis. More routine use of ultrasonography may aid in earlier diagnosis of hepatic abscesses, potentially improving prognosis and outcome.     

应用SELDI-TOF-MS技术对患脂肪肝奶牛血浆差异蛋白的分离鉴定及生物学分析

【目的】脂肪肝是围产期奶牛主要代谢性疾病之一,50%产后奶牛受其影响。产后奶牛生产力降低、繁殖性能低下、免疫功能减弱、肝功能衰竭和过早死亡都与脂肪肝有关。表面增强激光解析/电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）是一种对生物样本蛋白质研究的新型高敏感性蛋白质组学方法,文章旨在探讨脂肪肝奶牛血浆蛋白质组学特征。【方法】于黑龙江某集约化养牛场选择产后7-28d,1-2胎次荷斯坦奶牛40头。清晨空腹尾静脉采血10mL,应用肝素抗凝（150U）迅速离心（3 000 r/min,5 min）分离血浆,置于-80℃冰箱冷冻保存。依据血浆甘油三酯（TG＞0.20 mmol·L^-1）, 血浆β-羟丁酸（BHBA＞1.2mmol·L^-1）浓度和临床症状,将其分为试验组（T）20头和健康对照组（C）20头。应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,利用Ciphergen Protein Chip Software (Version 3.1.1)对在试验组和对照组所有样品中得到的峰图进行分析,得到原始数据。将两组之间的数据峰值做wilcoxon sum rank test统计检验,用计算出的P值判断峰在两组中是否有显著差异。以0.01作为P值的阈值,筛选出P值小于0.01的差异峰。在得到的差异峰中,将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比 (mass to charge ratio,m/z)进行比较,找到最相似的蛋白作为差异峰可能检测蛋白的预测结果。【结果】与对照组相比,试验组奶牛血浆蛋白质谱存在39个差异峰,在得到的39个差异峰中,将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比值进行比较,最终获得26个可预测的差异峰,预测蛋白11种。结果显示,相对于C组,11种预测蛋白在T组中均表达下调。通过生物信息学（Network,GO,Pathway）分析,应用Cytoscape软件对获得的11种蛋白进行牛类基因网络搜索,得到Networks分析结果图。在数据库中搜索到了试验结果中的淀粉样肽前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)和纤维蛋白原α链(fibrinogen alpha chain, FGA)两种差异蛋白,并得到其相关的Networks分析结果。应用Cytoscape软件中BinGO插件对11种蛋白进行GO分析,并得到GO分析结果。对这些蛋白质经软件搜库得到已经注释的差异蛋白有9种,分别为FGA、血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A protein, SAA)、血浆蛋白酶c1抑制剂（plasma protease c1 inhibitor, SERPING1 or C1INH）、血清载脂蛋白-CⅢ（apolipoprotein c-Ⅲ,ApoCⅢ）、海帕西啶（hepcidin, HAMP）、骨桥蛋白（osteopontin, OPN or SPP1）、 甲状腺素运转蛋白（transthyretin, TTR）、胱蛋白酶抑制剂C （cystatin-c, CysC or CST）、神经分泌血管生长因子蛋白（neurosecretory protein, VGF）。应用KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）pathway数据库搜索。搜索结果显示只有6种蛋白质可在数据库中搜到,分别是FGA、SERPING1、APO-CⅢ、APP、CysC、SPP1。并得到其相关的Pathway分析结果。这些蛋白可能是与奶牛脂肪肝发病机制相关的物质。【结论】应用SELDI-TOF-MS技术有效的分离了健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白,均在肝脏代谢或脂肪肝疾病发生发展过程中起重要的调节作用,对探究奶牛脂肪肝发病机理及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。差异蛋白对奶牛脂肪肝的发病机理的影响尚待进一步研究。     

The Distribution of Soluble Copper- and Zinc-Binding Proteins in Liver and Kidney of Chronic Copper-Poisoned Goats

The distribution of copper and zinc among the soluble proteins in the liver and kidney from chronic copper-poisoned goats was examined after gel filtration of the proteins. The concentrations of copper in the liver and kidney cortex from five experimentally copper-poisoned goats were: 550–810 µg/g liver and 190–420 µg/g kidney cortex (wet weight). In general the copper-binding proteins from, both the liver and kidney samples were separated into two different fractions with approximate molecular weights (m.w.) of > 65,000 and 10,000, respectively. From the liver samples, varying amounts of copper were eluted in a fourth fraction with m.w. < 2,000. In the majority of kidney samples the dominating copper-binding protein fraction was the high molecular weight fraction. Absolute amounts of copper recovered in the metallothionein-like protein fraction were nearly the samt for all samples investigated. The distribution of zinc-binding proteins in both liver and kidney samples was nearly the same. The high molecular weight fraction dominated, and no zinc was bound to metallothionein-like proteins.     

镰刀菌毒素对断奶仔猪血清酶、肝脏抗氧化功能及组织病理学的影响

试验旨在研究镰刀菌毒素污染日粮对断奶仔猪血清酶、肝脏抗氧化功能及组织病理学的影响。选择35日龄体重为(8.45±0.94) kg的健康三元杂交(杜×长×大)断奶雌性仔猪40头,随机分为2组,每组20个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂用霉变玉米和霉变玉米蛋白粉替代基础日粮中50%的玉米和玉米蛋白粉配制而成的镰刀菌毒素污染日粮(玉米赤霉烯酮(ZEN) 0.90 mg/kg,呕吐毒素(DON) 1.43 mg/kg,烟曲霉毒素(FUM) 5.85 mg/kg)。仔猪单栏饲喂,预试期7 d,正试期35 d。结果表明:①与对照组相比,试验组断奶仔猪血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性均显著升高(P<0.05),肝脏相对重显著降低(P<0.05);②与对照组相比,试验组断奶仔猪血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著降低(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);③病理组织学观察发现,试验组断奶仔猪肝脏出现一定程度的组织损伤,部分肝小叶边缘发生明显的炎性细胞浸润,肝细胞发生局部空泡变性。由此可知,镰刀菌毒素污染日粮(0.90 mg/kg ZEN,1.43 mg/kg DON,5.85 mg/kg FUM)饲喂断奶仔猪可引起仔猪血清酶活性改变,肝脏抗氧化功能降低,肝脏组织出现一定程度的病理损伤,从而影响肝脏功能的发挥。