新生牛睾丸细胞的分离纯化与冷冻保存

以新生牛作为实验动物,取睾丸进行制样组织学观察,并将睾丸消化成单细胞悬液,对生精上皮细胞进行分离纯化、细胞鉴定及冷冻保存,研究不同分离纯化及冷冻保存方法对睾丸细胞的影响。结果表明,新生牛曲细精管中含有精原干细胞和支持细胞,差速贴壁法能有效分离两种细胞;精原干细胞鉴定,AKP、C-kit、OCT-4均呈阳性;支持细胞鉴定,油红O、波形蛋白均呈阳性。精原干细胞冷冻保存以10%的二甲基亚砜为冷冻剂的效果最好,支持细胞冷冻保存以10%乙二醇和0.1 mmol.L-1海藻糖组合效果最好。     

新兴地区鸭疫里默氏杆菌血清3型的分离鉴定

通过对广东省新兴地区某番鸭养殖场疑似鸭疫里默氏杆菌病的病死鸭进行病原分离、生化鉴定及血清学鉴定,确诊该次疫情为鸭疫里默氏杆菌血清3型所引起。     

大麦芽阿魏酸酯酶的分离纯化及其部分酶学性质的测定

本试验采用硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-52离子交换层析对大麦芽中的阿魏酸酯酶(FAE)进行了分离纯化,并测定了其部分酶学性质。结果显示,分离纯化后获得了阿魏酸酯酶纯品,纯化倍数达34倍;经SDS-PAGE电泳显示为单一条带,并测定其相对分子质量约为29.3 ku;最适反应温度为50℃;最适pH为5.5,但阿魏酸酯酶在60℃以下,pH 4.5~7.5之间有较好的稳定性;Zn2+、Cu2+、Fe3+对酶活有很强的抑制作用,Na+和EDTA对酶有一定的激活作用。     

山羊中绵羊肺炎支原体的分离及鉴定

从四川省乐至县发生胸膜肺炎性传染病的山羊群中采集12个鼻拭子及4个肺组织病料,进行病原分离培养和特异性PCR检测。结果从9个鼻拭子和4个肺组织中分离到支原体,经鉴定均为绵羊肺炎支原体,未发现丝状支原体簇成员及多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌。结果表明,绵羊肺炎支原体是引起该山羊群发生胸膜肺炎的病原,同时说明绵羊肺炎支原体也是山羊支原体性肺炎的重要病原之一。     

3株猪胸膜肺炎放线杆菌山东株的分离及鉴定

从山东省几个猪场的疑似猪传染性胸膜肺炎病例中,采集病猪的肺脏、气管和扁桃体等病变组织,经细菌分离得到3个分离株BZ1株、BZ2株、BZ3株。经过革兰氏染色镜检、菌落形态观察、培养特性试验、生化试验、药敏试验、动物感染试验等一系列细菌学鉴定方法,可将3株分离菌鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。     

猪圆环病毒2型云南株分离鉴定及ORF2序列分析

本研究根据GenBank中已经发表的猪圆环病毒2型基因序列,设计了2对PCV2特异性引物,从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)感染病例中检测出3株云南省PCV2流行株,通过ve-ro细胞分离病毒,并用透射电子显微镜观察到了约17nm的病毒样粒子的存在。经同源性比较分析,3个分离株之间核苷酸同源性为99.5%～99.8%,与甘肃省PCV2分离株核苷酸同源性最低(90.7%),浙江省分离株核苷酸同源性最高(99.7%),与南美洲分离株核苷酸同源性最低(92.0%),瑞典分离株核苷酸同源性最高(99.4%),这可能与云南省猪种引进有关。     

高锌对仔猪肝脏脂肪代谢的影响

本研究旨在探讨高浓度硫酸锌对仔猪肝脏脂肪代谢的影响.试验选用120头平均始重为(26.66±2.45)kg的"杜×长×大"三元杂交仔猪,随机分成4组(对照组、试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和试验组Ⅲ),每组3个重复,每个重复10头猪,分别饲喂添加60、300、1 000和3 000 mg/kg锌的基础饲粮.预试期7 d,正试期16 d.结果表明,与对照组相比,1)各试验组血清总甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量均显著提高(P<0.05);2)试验组Ⅲ血清总胆固醇、C18:1脂肪酸含量显著升高(P<0.05),肝脏C18:0、C18:2脂肪酸含量显著降低(P<0.05),而C16:0脂肪酸含量无显著变化(P>0.05);3)试验组Ⅱ和试验组Ⅲ肝脏硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)mRNA水平、血浆瘦素和胰岛素含量都显著升高(P<0.05).随着锌浓度的升高,血浆四碘甲状腺原氨酸(T4)含量显著降低(P<0.05),三碘甲状腺素原氨酸(T3)和胰高血糖素含量有上升趋势,但差异不显著(P>0.05).由此可知,饲粮中添加1 000和3 000 mg/kg锌上调了仔猪肝脏SCD1转录水平,促进了机体饱和脂肪酸(C18:0)的去饱和化,增加了机体甘油三酯和胆固醇的合成,且高锌可通过促进瘦素和胰岛素的分泌调节机体的脂肪代谢.     

预处理条件对石斛兰叶片原生质体分离的影响

试验研究了不同预处理条件对石斛兰叶片原生质体分离的影响,结果表明：预处理可以提高原生质体的产量,石斛兰叶片原生质体分离最佳预处理方法为：12 h黑暗条件萎蔫处理,0.4mmol/L CaCl2浸泡16 h,0.5 mol/L甘露醇浸泡16 h。     

林蛙头多糖的提取工艺优化及其降血脂功能1）

采用生物酶法提取林蛙头多糖,应用响应面法对提取工艺进行了优化,分析了提取物对大鼠降血脂的功效。结果表明：林蛙头多糖最佳提取工艺参数为：酶解温度55℃、加酶量2％、林蛙头水溶液质量浓度1∶10 g／mL、酶解时间4．5 h、pH＝10．0,此条件下林蛙头多糖得率最高为4．3％;高脂模型大鼠降血脂试验结果显示,林蛙头多糖能明显降低高脂模型大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）质量浓度,提高血清中高密度脂蛋白胆固醇（ HDL－C）质量浓度,对高脂大鼠具有显著的降血脂作用。     

蒙古黄芪幼苗对盐胁迫的生长和生理响应

为研究不同浓度NaCl胁迫对蒙古黄芪生理代谢的影响,以绿茎(L07-22)和紫茎(Z09-1)2个蒙古黄芪新品系幼苗为试验材料,通过测定盐胁迫下植株的生长和生理特性指标,揭示其对盐胁迫的响应。结果表明,在较高浓度NaCl处理下,蒙芪L07-22和蒙芪Z09-1幼苗相对含水量显著降低。随着NaCl浓度的增加,蒙芪L07-22和蒙芪Z09-1幼苗相对电导率和细胞膜伤害率增加,幼苗的半致死NaCl浓度分别为150 mmol·L^-1和130 mmol·L^-1。蒙芪L07-22和蒙芪Z09-1幼苗丙二醛（MDA）和可溶性糖含量随NaCl浓度的增加呈先升高后降低的趋势,幼苗MDA含量在250 mmol·L^-1 NaCl处理下达到最大,分别是各自对照的2.5和3.5倍,而在200 mmol·L^-1 NaCl处理下可溶性糖含量达到最大,分别是各自对照的1.1和1.5倍。蒙芪L07-22和蒙芪Z09-1幼苗的膜结构在盐胁迫下受到一定程度的损伤,其幼苗盐敏感损伤浓度为100~250 mmol·L^-1。二者相比而言,蒙芪L07-22在测定的多数指标中表现出更高的苗期耐盐性。