中国大鲵资源现状及保护对策

20世纪80—90年代,大鲵资源锐减,栖息地越来越小,呈现零星破碎化和点状分布的特点。为中国大鲵资源的保护和开发利用提供参考依据,分析了野生大鲵的地理分布、种群数量、资源衰退的原因和大鲵人工驯养现状,并根据大鲵资源近年来的发展特点,提出了针对性的生态保护对策。     

水温对大鲵摄食的影响

通过１年多的观察证明,大鲵在人工养殖条件下,水温对其摄食具有显著的影响。观察结果表明,大鲵冬眠的复苏温度为８．５℃±１．５℃,春季摄食高峰期的温度为２３．２℃±２．０℃,夏季停止摄食的起始温度为２７．８℃±１．８℃,夏季复苏温度为２４．７±１．２℃,秋季摄食高峰期温度为１８．０℃±１．６℃,开始冬眠的温度为１１．５℃±１．６℃。     

大鲵成熟精、卵的形态学观察及受精卵孵化中的形态变化

本文通过连续９年观察中国大鲵成熟精子,连续１０年观察中国大鲵成熟卵子的形态后加以概括描述。正常精子呈尖椒状,全长约１９０μｍ,头部约占全长的２５％,头尾部之间无明显颈部。中国大鲵产出的卵为念珠状长链型带形卵,卵球含三层膜,卵有单胞卵也有多胞卵,卵的形态多样。受精卵孵化过程吸水增大,第五天吸足平衡,吸水率达１８５％;胶带也吸水增大,第四天基本吸足,吸水率达１５０％。     

不同饵料种类喂养大鲵的比较试验

本文作者报道了用鲻鱼、黄带鲱鲤及黄鳝作为饵料鱼饲喂大鲵的比较试验结果。饲喂黄带鲱鲤及黄鳝的大鲵,其生长比饲喂鲻鱼的大鲵为快,用三种饵料鱼轮换喂养的大鲵,比用三种饵料鱼分别单独饲喂的大鲵,生长要快。     

大鲵人工繁殖技术初步研究

利用长200m、宽5．2m、高4．5m的山洞,在6m^2和0．48m^2的养殖池中用石板材和鹅卵石搭设人工洞穴,以人工养殖的Ⅴ-Ⅶ龄的子二代大鲵作为亲体开展人工繁殖研究。亲鲵培育水温19．0～20．5℃,pH7．2—7．3,DO5．8～7．4mg／L,光照〈300Lux;催产选择在7月上旬进行。激素选用LRH-A2＋HCG,剂量LRH—A2 10-20ug／kg＋HCG1000～2000IU／kg,雌雄同剂量。一次性腹腔注射;受精卵孵化温度18～18．5℃,pH7．2～7．3,DO6．0—8．0mg／L,光照〈100Lux。2010年7月催产雌鲵26尾,雄鲵24尾,催产后第4d,4尾雌鲵产卵3800粒,获受精卵962粒,受精率25．32％。受精卵经35—38d的孵化,共孵出稚鲵172尾,孵化率为17．88％。     

Characterization and Functional Properties of Gelatin Extracted from Chinese Giant Salamander (Andrias Davidianus) Skin

The characteristics and functional properties of gelatin obtained from Chinese giant salamander (Andrias davidianus) skin were investigated. After alkaline and acetic acid pre-treatment, yield of the gelatin by hot water extraction (60°, 8 h) was 17.63 g/100 g (wet basis), and the gelatin contained 89.46 g/100 g protein, 0.3 g/100 g fat, and 0.41 g/100 g ash (dry basis). Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) results of the gelatin showed clear band pattern for collagen subunits,β- and α-chains. The gelatin contained 18.85% imino acids, 28.62% hydrophobic amino acids, and 19.68% essential amino acids, which is slightly lower than porcine skin gelatin (PSG). The gelatin exhibited thermo-reversible properties, with gel strength of 192.50 ± 11.47 g, rupture distance of 10.17 ± 0.20 mm, gelling temperature of 4.98°, and melting temperature of 18.04°, Emulsifying activity index (EAI) of the gelatin diminished with increasing concentrations from 10 to 40 mg/mL (p < .05), whereas the emulsifying stability index (ESI) improved significantly (p < .05). Higher concentrations (30 and 40 mg/mL) could significantly enhance the gelatin’s foam expansion (FE) and foam stability (FS) (p < .05). Water absorption ability and oil absorption ability of the gelatin were 7.1 g water/g gelatin and 9.8 g oil/g gelatin, respectively. These results imply that the gelatin with good interfacial properties could potentially be used as a novel ingredient in food emulsion systems.

Abbreviations: CGSS, Chinese giant salamander skin; CSG, Chinese giant salamander skin gelatin; PSG, porcine skin gelatin; EAI, emulsion activity index; ESI, emulsion stability index; FE, foam expansion; FS, foam stability; WAC, water absorption capacity; OAC, oil absorption capacity.     

放养密度和饵料种类对中国大鲵幼苗存活与生长的影响

研究了放养密度和饵料种类对幼中国大鲵（Andrias davidianus）生长发育的影响,跟踪分析了自胚胎孵化至一龄幼鲵的存活与生长发育状况。结果表明,自胚胎孵化至一龄幼鲵的养殖密度为每0.1m210～20尾时,其成活率可达到100%,投放密度每0.1m2自20尾增加到60尾,平均存活率、年体长增加和年体重增加均显著降低。投喂摇蚊幼虫、猪肉、牛肉、羊肉和小鱼虾,幼苗的存活率分别为100%、90%、95%、85%和95%,体长增加分别为8.09cm、5.45cm、5.28cm、4.57cm、6.82cm,体重增加分别为25.97g、12.68g、11.82g、10.86g和20.67g。可见,摇蚊幼虫和小鱼虾是一龄幼大鲵的适宜饵料。     

大鲵虹彩病毒β-丙内酯灭活方法的研究

为探讨β-丙内酯(β-propiolactone,BPL)灭活大鲵虹彩病毒(Giant salamander iridovirus,GSIV)的最适条件,研究了BPL对GSIV的灭活方法。采用终浓度分别为0.025%、0.05%、0.1%、0.2%的BPL灭活细胞培养的GSIV,4℃条件下分别灭活24 h、48 h、72 h、96 h,通过细菌培养、细胞培养、病毒核酸PCR扩增以及鱼体感染试验进行灭活病毒的安全性检验,确定最适灭活条件。试验结果表明,GSIV经终浓度为0.1%的BPL 4℃灭活处理72 h后可完全灭活病毒,灭活病毒无细菌污染,接种对GSIV敏感的鲤上皮瘤细胞系(EPC)细胞无细胞病变效应(CPE)出现,病毒主衣壳蛋白(MCP)基因特异性引物PCR反应未扩增出靶基因产物,灭活病毒对健康大鲵的感染试验未出现疾病症状。灭活效果检测结果表明,与未灭活GSIV相比较,最适灭活条件下的GSIV结构蛋白与抗原性未发生显著变化。结论显示BPL可用来灭活GSIV,本研究确立了BPL灭活GSIV的最适条件,为大鲵虹彩病毒细胞培养灭活疫苗研究奠定了重要基础。     

患病大鲵中嗜水气单孢菌的分离鉴定及其防治

2009年5月,贵州省贵定县人工饲养的大鲵（娃娃鱼）发生了以四肢和腹侧的皮肤溃烂、口腔粘膜弥漫性出血以及肝脏肿大为临床病理特征的传染病。本研究对该传染病进行了病原分离、动物回归、菌株16S rRNA基因测序检测、药物敏感性、药物治疗及灭活乳化疫苗免疫保护方面的实验研究。试验结果表明,动物回归分离菌株与病原分离菌株其形态特征及理化特性一致,分离菌基因16S rRNA测序检测与嗜水气单胞菌的同源性达到99.57%以上,因此确诊该病为鱼类嗜水气单孢菌感染。致病株具有较强的耐药性,敏感药物治疗能抗菌,但皮肤溃烂组织、深部肌肉组织抗炎效果较差。经致病菌株灭活乳化免疫和免疫保护攻毒试验表明,灭活乳化疫苗免疫平均保护率达83.33%。     

麋鹿皮肤成纤维细胞的细胞周期同步化研究

为给体细胞核移植提供更多的G0/G1期供体细胞以提高克隆的成功率,本试验采用不同的接触抑制和血清饥饿时间及含羞草酸(mimosine)不同浓度和时间3种方法对麋鹿皮肤成纤维细胞进行同期化处理,然后利用流式细胞仪分析细胞周期.结果表明,接触抑制24 h G0/G1期比例可达91.95%;血清饥饿24 h有89.42%的细胞处于G0/G1期,当处理时间超过144 h细胞凋亡和异常聚集的比例会增加;适宜浓度(0.4 mmol ·L-1)的含羞草酸处理24 h能使麋鹿成纤维细胞同步化至G0/G1期,但易引起细胞损伤.