微生物学大实验模块“天然酵母菌的筛选、扩大培养和鉴定”的教改研究与实践

以“天然酵母菌的筛选、培养和选育”为主线,设计了一个由4个相互关联、前后衔接一体的实验组成的综合性研究型实验模块,进行教学实践与改革。实验模块主要包括：培养基的配制、分装与灭菌,酵母菌的分离与纯化,酵母的扩大培养,菌种的鉴定。强化实践,提高学生对于知识的综合应用能力。     

混菌固态发酵降解羽毛生产饲料蛋白质工艺研究

试验主要以酵母菌和淡紫拟青霉为发酵微生物,羽毛粉和麸皮为发酵底物,采用混菌固态发酵方式,探究基质初始水分以及麸皮与羽毛粉的比例等因素对饲料蛋白质生产的影响。试验结果表明,麸皮:水=1:1时最适合酵母菌的生长;麸皮:水=1:0.8时,最适合淡紫拟青霉的生长。以1:1的水料比,当麸皮:羽毛粉=7:3时,最适合酵母菌的生长;而当麸皮:羽毛粉=6:4时,最适合淡紫拟青霉的生长。因此,混菌固体发酵降解羽毛生产饲料蛋白质最佳初始水分是1:1,麸皮与羽毛比为7:3。     

酵母硒对凡纳滨对虾生长和抗氧化性能的影响

【目的】研究饲料中添加不同水平酵母硒对凡纳滨对虾生长和抗氧化性能的影响.【方法】选取初始体质量为(0.41±0.01)g的凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei 720尾,随机分为6个试验组,每组3个重复,每个重复40尾虾,在室内循环水养殖系统(容积250 L)中进行为期56 d的生长试验.在基础饲料中分别添加硒(酵母硒)0、0.15、0.30、0.45、0.60、1.00 mg·kg-1,制成6种不同硒水平的半纯化饲料,实测饲料硒质量分数分别为0.25、0.41、0.56、0.68、0.84、1.20 mg·kg-1.【结果和结论】结果表明,添加酵母硒对凡纳滨对虾增质量率、特定生长率、饲料系数、成活率均无显著影响(P0.05),随着饲料硒水平的增加,凡纳滨对虾的增质量率和特定生长率不断升高,在0.84 mg·kg-1硒组达到最大值.各试验组对虾肝胰腺超氧化物歧化酶和总抗氧化能力均高于对照组,而丙二醛含量均低于对照组,但差异不显著(P0.05).以增质量率和特定生长率为评价指标,通过二次线性回归分析表明,在该试验条件下凡纳滨对虾饲料中硒含量为0.98 mg·kg-1时其生长性能最高.     

酵母细胞壁多糖与铝硅酸盐复合物对猪生长性能、免疫指标及养分消化率的影响

本研究旨在探讨酵母细胞壁多糖(yeast polysaccharide,YP)与铝硅酸盐复合物(alumi-nosilicate complex,AC)对猪的生长性能、免疫指标及养分消化率的影响。试验选用平均体重为(66.18±1.26)kg的杜×长×大三元杂交猪140头,随机分成5组,每组4个重复,每个重复7头猪。各组分别饲喂添加不同剂量复合物的试验饲粮,A组为对照组,不添加复合物;B组添加0.1%YP;C组添加0.1%YP和0.9%AC;D组添加0.1%YP和1.9%AC;E组添加0.1%YP和2.9%AC。试验期51 d。结果表明:1)D、E组平均日增重显著低于对照组(P<0.05),各组平均日采食量和料重比差异不显著(P>0.05);2)与对照组相比,D组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及补体3(C3)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)水平显著提高(P<0.05),血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和补体4(C4)水平无显著差异(P>0.05);3)各组养分消化率无显著差异(P>0.05)。由此可见,YP和AC复合使用降低了育肥猪的生长性能,0.1%YP和1.9%AC同时添加可增强生长猪的免疫功能。     

基于酵母双杂交技术的绒山羊波形蛋白互作蛋白鉴定

为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相色谱质谱联用采集免疫共沉淀数据筛选出肌动蛋白(ACTB)和vimentin进行基因引物设计、克隆、酵母表达载体构建和蛋白互作鉴定。结果显示:成功克隆出绒山羊vimentin基因CDS区序列的长度为1 401 bp, ACTB基因CDS区序列的长度为1 128 bp;构建了酵母表达载体;试验组共转化pGBKT7-vimentin与pGADT7-ACTB的Y2HGold菌株在二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基和四缺板SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-GaL/AbA培养基上,均能生长出淡蓝色菌落,而在对照组共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基上长出白色菌落,表明共转化的pGBKT7-vimentin与pGADT-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac被激活,共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac未被激活。提示:vimentin与ACTB两种蛋白间存在相互作用。     

无糖奶啤的研制

奶啤是以鲜牛乳、麦芽、酒花为主要原料,利用二次生物发酵技术酿制的一种高附加值,低醇的高级乳制饮品。目前国内奶啤蔗糖含量高,市场上还没有无糖奶啤的产品,为了丰富奶啤的种类,本试验用木糖醇作为蔗糖替代品,研制出一款无糖的特色奶啤。在单因素试验基础上,利用响应面优化无糖奶啤的配方及工艺。结果表明,小麦料液比为1∶5（kg/L）,将麦芽料液进行糖化、过滤,投入0.2 g/L卡斯卡特啤酒花煮沸30 min,添加0.2 g/L捷克萨兹啤酒花煮沸45 min后,接入0.2%的艾尔酵母,20 ℃的条件下发酵5 天,然后与发酵乳（5∶1）混合,在28 ℃下后酵10 h后过滤,加入1‰的三氯蔗糖、5%木糖醇、0.3%复配乳化增稠剂,20 Mpa均质两次,灭菌后得到成品。在此工艺条件下,得到的无糖奶啤感官评分较高,酒香和乳香和谐一体,风味饱满。