鲶鱼部分组织抗菌肽抗菌功效的研究

采用乙酸提取法提取鲶鱼表面黏液、皮肤、鱼肉、内脏等不同组织抗菌肽,采用双缩脲法测定蛋白质含量;以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为受试菌,采用滤纸片法,比较不同组织抗菌肽对不同菌种的抗菌效果,结果表明：各组织蛋白质含量分别为黏液0.336mg/mL、皮肤1.629mg/mL、鱼肉10.284mg/mL、内脏0.562mg/mL。内脏提取物的抑菌效果最好,且对枯草芽孢杆菌抑制效果最佳,抑菌圈直径达10.73mm。     

大豆肽的生理功能和制备工艺

大豆肽是大豆蛋白质的水解产物,主要功能性营养物质包括多肽、寡肽、游离氨基酸和糖类,其相对分子质量低,易于消化吸收。丰富的小肽能调节矿物质、脂类代谢,降低胆固醇,提高免疫力。文章综述了大豆肽的生理功能和制备工艺。     

新型穿膜肽介导 p53融合蛋白的表达及其免疫原性分析

目的：原核表达新型细胞穿膜肽RDP介导p53融合蛋白,并检测其免疫原性的强弱．方法：以质粒pET28a‐p53为模板扩增p53基因,并克隆至原核表达载体pET28a‐RDP中,构建重组表达质粒pET28a‐RDP‐p53,转化至大肠杆菌Rosetta ,IPTG诱导表达蛋白并纯化,SDS‐PAGE确定该蛋白准确性．同时,将昆明小鼠分为空白对照组（等容生理盐水）和RDP‐p53融合蛋白高、中、低剂量（4 mg／kg ,2 mg／kg ,1 mg／kg）组,经腹腔注射免疫,每隔2 d给药1次,30 d后眼球取血,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中IgG的含量．结果：双酶切及测序结果显示, p53基因已克隆入表达载体中;RDP‐p53融合蛋白在上清和沉淀中均获得表达．ELISA测定结果表明,与对照组比较,低、中剂量组小鼠血清中IgG含量没有明显升高（p＞0.05）,高剂量组显著升高（p＜0.05）．结论：成功表达并纯化RD P‐p53融合蛋白,其免疫原性较弱且与给药剂量相关,为进一步研究RD P‐p53融合蛋白对脑肿瘤的药理作用奠定基础．     

红松松针精油抗氧化和抑菌活性研究

本文以红松松针精油为研究对象,主要研究了红松松针精油的抗氧化和抑菌活性。通过对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子(O₂-·)自由基的清除活性以及总还原力探讨红松松针精油的抗氧化活性;以大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌为供试菌种,测定抑菌圈和最低抑菌浓度来研究红松松针精油的抑菌活性。实验结果显示:该精油对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子(O₂-·)自由基的半数清除率IC₅₀值分别为4.24、4.46、3.26 mg/mL;精油对大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为(15.2±0.12) mm、(13.3±0.15) mm、(9.5±0.21)mm,最低抑菌质量浓度分别为1.26、2.50、5.00 μL/mL。实验结果证明,红松松针精油作为天然抗氧化、抑菌剂具有巨大的开发潜质。      

枯草芽孢杆菌J-4菌株产抑菌物质发酵条件优化

为了提高枯草芽孢杆菌J-4菌株发酵液中抑菌物质的含量,采用单因素试验和正交试验相结合的方法,对基础发酵培养基的组成(碳源、氮源、无机盐含量)和发酵条件(发酵时间、装液量、发酵温度、接种量)进行优化。优化后的培养基组成为葡萄糖1.00%、黄豆饼粉1.00%、MgSO_40.15%、Na_2HPO_40.10%、NaH_2PO_40.10%;发酵条件为发酵时间36 h、装液量100 mL(250 mL)、发酵温度37℃、摇瓶接种量5%。在此条件下,枯草芽孢杆菌J-4菌株抑菌圈面积提高50.25%。     

斑点叉尾(鱼回)LEAP2成熟肽在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性

LEAP-2 (Liver expressed antimicrobial peptide-2) 抗菌肽是一类主要在动物肝脏中表达的小分子肽,其生物学活性来自成熟肽区域,它们在动物的免疫系统中发挥了重要作用。本文以斑点叉尾鮰 (Ictalurus punctatus) LEAP-2成熟肽(mLEAP2)为研究对象,拟通过建立毕赤酵母表达系统,实现mLEAP2在毕赤酵母中的重组DNA表达,以期获得具生物学活性的重组体mLEAP2 (rmLEAP2),为进一步研究其功能和扩大制备奠定基础。首先以既有的斑点叉尾鮰mLEAP2的原核表达载体“pET-32a-mLEAP2”为模板,通过PCR扩增,获得5’端含EcoRⅠ酶切位点、3’端含NotⅠ酶切位点及6×his标签的LEAP-2成熟肽基因mLEAP2,然后将其与真核表达载体pPIC9K连接,构建重组表达载体“pPIC9K-mLEAP2”;电转化至毕赤酵母GS115细胞中,经不同浓度G418和选择性培养基筛选,获得高拷贝酵母转化子;在29 ℃、250 r/m条件下,以0.5%的甲醇对其诱导表达120 h;采用固化金属离子亲和层析(IMAC)对表达产物进行纯化,通过MALDI-TOF/TOF质谱对纯化产物的结构进行分析和鉴定。结果表明：表达的重组体蛋白为预期的目的蛋白rmLEAP2,其表达量约2.2 mg/L;另一方面,抑菌实验结果显示rmLEAP2具有明显的抑制枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的活性。     

不同蛋白水平下添加抗菌肽对赤点石斑鱼影响的研究

评估了不同饲料蛋白水平(44%,48%,52%)和抗菌肽浓度(0.01%,0.02%)对赤点石斑鱼生长性能、血清生化、消化酶和抗氧化能力的影响。实验组分别为:D1(44%,0.01%),D2(48%,0.01%),D3(52%,0.01%),D4(44%,0.02%),D5(48%,0.02%),D6(52%,0.02%)。每组3个平行,养殖8周结果如下:一定范围内,增重率、特定生长率和饲料转化率随蛋白水平和抗菌肽浓度增加,D5组显著高于D1组(P0.05)。形态学指标,D6组肝体比(HSI)、脏体比(VSI)和肠系膜脂肪(IPF)显著低于D5组(P0.05)。同一蛋白水平下增加抗菌肽浓度可降低肌肉粗脂肪含量,D4组显著低于D1组(P0.05)。血清总蛋白、白蛋白含量随蛋白水平和抗菌肽浓度的增加而升高(P0.05),D3和D5组谷丙转氨酶、谷草转氨酶和血糖显著低于其他组(P0.05)。D5组胰蛋白酶高于其他组(P0.05),D1组过氧化物酶显著低于其他组(P0.05)。随着抗菌肽浓度增加,胃蛋白酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性增加,且丙二醛含量降低(P0.05)。实验结果表明,48%蛋白水平下添加0.02%抗菌肽可以提高赤点石斑鱼生长性能,增强消化酶活性和抗氧化能力,降低饲料系数。     

壳聚糖/羧甲基纤维素钠负载苦瓜小分子多肽复合物的制备及其复合效果的表征

以壳聚糖盐酸盐（CSC）和羧甲基纤维素钠（CMC）为壁材,采用离子凝胶法制备苦瓜小分子多肽复合物,并对其制备工艺和特性进行研究。结果显示,复合物的最佳制备工艺为CSC浓度5.35 mg·mL^-1,CMC浓度1.60 mg·mL^-1,包埋时间33.10 min,此时包埋率可达到69.98%。红外光谱和X-射线衍射分析结果表明,芯材和壁材产生了离子交联作用,苦瓜小分子多肽被成功包埋在CSC/CMC复合壁材中。扫描电镜显示复合物表面疏松多孔,呈不规则形状。所制得的复合物在胃肠液中具有较好缓释特性,在室温下贮藏30 d后仍具有较强的DPPH自由基清除能力。     

Investigations on the Wound Healing Potential of Tilapia Piscidin (TP)2-5 and TP2-6

Wound healing is a highly orchestrated process involving many cell types, such as keratinocytes, fibroblasts and endothelial cells. This study aimed to evaluate the potential application of synthetic peptides derived from tilapia piscidin (TP)2, TP2-5 and TP2-6 in skin wound healing. The treatment of HaCaT keratinocytes with TP2-5 and TP2-6 did not cause cytotoxicity, but did enhance cell proliferation and migration, which could be attributed to the activation of epidermal growth factor receptor signaling. In CCD-966SK fibroblasts, although TP2-5 (31.25 μg/mL) and TP2-6 (125 μg/mL) showed cytotoxic effects, we observed the significant promotion of cell proliferation and migration at low concentrations. In addition, collagen I, collagen III, and keratinocyte growth factor were upregulated by the peptides. We further found that TP2-5 and TP2-6 showed pro-angiogenic properties, including the enhancement of human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) migration and the promotion of neovascularization. In a murine model, wounds treated topically with TP2-5 and TP2-6 were reduced by day 2 post-injury and healed significantly faster than untreated wounds. Taken together, these findings demonstrate that both TP2-5 and TP2-6 have multifaceted effects when used as topical agents for accelerating wound healing.     

蜂王浆的抗菌活性研究

本文采用平板培养法研究蜂王浆的抗菌活性 ,发现新鲜蜂王浆对10种试验菌均有不同程度的抑制作用。根据抑菌斑的大小判断 ,蜂王浆对各种试验菌株的抑制程度为 :枯草杆菌>威克氏酵母>蜡状芽孢杆菌>隐球酵母>鼠伤寒沙门氏菌>大肠杆菌O111>福氏志贺氏2型菌>假单孢杆菌>N1 米曲霉>霉菌W15。