Use of real‐time quantitative PCR to document successful treatment of Mycoplasma haemocanis infection with doxycycline in a dog

An 8‐year‐old Jack Russell Terrier was diagnosed with hemolytic anemia caused by hemoplasmosis 4 years following splenectomy. Quantitative real‐time PCR (qPCR) analysis was used initially to confirm infection with Mycoplasma haemocanis and subsequently to monitor and direct medical therapy. Doxycycline was administered beyond resolution of clinical signs until hemoplasma DNA could no longer be detected by qPCR. The dog remained clinically healthy and hemoplasma‐negative 8 months following cessation of therapy. Canine hemoplasmosis should remain as a differential diagnosis for hemolytic anemia in dogs, particularly those that are splenectomized or immunocompromised, even in geographic regions where prevalence of infection is low. Prolonged doxycycline administration has been shown by qPCR to lead to sustained absence of detectable infection and should be considered as a first line treatment for canine hemoplasmosis.     

鸡传染性贫血病毒海安分离株感染雏鸡的病原动态分析

雏鸡是鸡传染性贫血病毒（Chickenanemiavirus,CAV）的最易感宿主。为系统了解中国国内CAV海安分离株（HA9805）感染雏鸡后的病原动态及与血清学和致病性的关系,本研究对1日龄SPF鸡进行了人工感染实验,感染后不同时间进行样品采集,并用病毒学、血清学以及组织病理学方法进行了检测与分析。研究结果发现,CAV海安分离株（HA9805）通过胸肌接种可引发雏鸡CAV病毒血症,引起CAV特征性临床症状及病理变化,并导致雏鸡高达13．3％的死亡率;血清中CAV核酸以及中和抗体的产生与组织病理变化以及疾病进程密切相关。该结果为CAV的早期诊断,制定有效的预防与控制措施提供了科学依据。     

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为探明2012-2013年贵州省紫云县马匹大量死亡的病因,为其科学防治提供参考,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法对当地养殖的贵州矮马、西南马进行马传染性贫血病毒(Equine Infectious Anemia virus,EIAV)、马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)和马疱疹病毒Ⅰ型(Equine herpesvirus type-1,EHV-1)3种病毒的抗体水平检测,并与伊犁马进行比较.结果表明:3个马群中均未检测到EIAV抗体,EHV-1抗体阳性率达98.15％～100％;与伊犁马相比,贵州矮马和西南马EAV抗体的阳性率较高,分别为48.15％和19.35％,并与2个马群的血液理化指标存在一定相关性.紫云县贵州矮马和西南马存在较高比例的EAV感染,马驹和虚弱马匹感染EAV后死亡率较高,因此推测EAV可能是导致马匹死亡的原因之一.     

鸡传染性贫血病毒VP3蛋白的原核表达及其单克隆抗体的研制

本研究首先利用同源重组一步克隆法将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)的VP3基因克隆到pGEX-6P-1原核表达载体上,经IPTG诱导及SDS-PAGE分析成功获得了重组蛋白rGST-VP3的表达.随即以纯化的重组蛋白rGST-VP3免疫Balb/c小鼠,通过脾细胞与SP2/0细胞融合以及间接免疫荧光(IFA)筛选,获得2株稳定分泌CIAV-VP3抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8;亚型鉴定表明,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均为IgG1;效价测定发现,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8的腹水间接免疫荧光效价分别为1:102400与1:12800;Western blot进一步证实,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均能识别重组蛋白rGST-VP3.本研究结果为后期研究VP3蛋白在CIAV致病中作用及其诱导凋亡分子机制奠定了坚实的物质基础.     

马传贫DNA荧光研究

本文采用了荧光探针——(艹啡)薄啶溴红(Ethidium Bromide,简称 EB)插入核酸双链区,形成一种具有较强荧光效应的络合物方法,对马传贫白细胞 DNA进行了荧光滴定和圆二色谱分析。结果表明:马传贫病毒感染的马白细胞 DNA 含量为正常马白细胞的4倍;正常马、免疫马、传贫马在核物质水平上,三者的空间构象存在差异。这一成果为马传贫早期诊断和区分传贫马与免疫马提供了分子水平上的依据。     

马传染性贫血病马与弱毒疫苗免疫马的区别试验

 本文应用淋巴细胞杂交瘤技术研制出具有抗马传染性贫血病驴白细胞弱毒抗原株系特异性的单克隆抗体（McAb）的酶结合试剂，以斑点试验（DB）与琼脂免疫双扩散试验（ID）相结合的方法，用于马传贫病马与马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马血清抗体的鉴别。使用本方法对339匹实验马进行测试，共检出马传贫病马11匹，马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马239匹，既未接种弱毒疫苗又未感染马传贫马89匹。另外，对106匹人工马传贫病马和21匹马传贫弱毒疫苗免疫马作了病理学验证，结果与免疫学检测相符。疫区在清除病马之后，病情停息。疫苗免疫马经贸易成交，更换畜主后，再次检疫未发现马传贫病例。结果表明，本方法对马传贫病马与马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马的区别诊断有实用价值。     

山东省部分养殖场点马属动物主要病毒疫病调查

为了解山东省马属动物主要病毒疫病流行现状,采集青岛市2个马场以及济南、聊城和德州等驴养殖密集地市4个驴场的血清和全血样品各694份,分别进行马传染性贫血、H3N8亚型马流感血清抗体检测和非洲马瘟病原检测。结果显示:马传染性贫血、非洲马瘟检测全部为阴性,H3N8亚型马流感群体阳性率和样品阳性率分别为100%(6/6)和81.38%(520/639)。结果表明:马传染性贫血和非洲马瘟在这些养殖场点已得到很好的预防,但鉴于国外严峻的疫情形势,需要继续加强监测,防止病原传入;H3N8亚型马流感流行较为普遍,感染率较高,需要重点加强防控。本调查为山东省马属动物疫病防控提供了数据参考。